毛君婷
- 作品数：20 被引量：45H指数：4
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省农业厅兽医科技计划项目贵州省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭肠炎病毒感染鸭肝酵母双杂交cDNA文库的构建被引量：2
- 2011年
- 为构建应用于酵母双杂交系统的鸭肠炎病毒(DEV)感染鸭肝cDNA文库,利用Trizol法提取接种DEV GZ株病毒液5 d的鸭肝总RNA,利用cDNA合成试剂盒反转录合成双链cDNA,与pGADT7酵母表达载体连接,转化酵母受体菌Y187,以未经稀释、1∶10和1∶100比例稀释的菌液无菌接种于SD/-Leu缺陷型固体培养基,置于30℃培养3 d,随机挑取生长良好的酵母菌落进行菌落PCR,检测插入片段的大小。结果显示,获得的原始文库克隆总数为1.0×106CFU,随机选取23个克隆进行PCR检测,插入片段长度集中在0.5～1 kb之间。结果表明,构建的cDNA文库有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。
- 张荷毛君婷杨颖王开功周碧君文明
- 关键词：酵母双杂交鸭肠炎病毒CDNA文库
- 贵州省规模化养猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查被引量：3
- 2009年
- 采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT),对贵州省4个地区6个规模化猪场240份血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪圆环病毒2型(PCV2)抗体水平检测。结果:CS-FV、PPV和PRV免疫抗体阳性率分别为64.2%、77.9%和59.2%;PRRSV、PCV2抗体阳性率分别为10.4%和32.5%。上述结果表明,猪细小病毒病、猪伪狂犬病和猪瘟免疫效果比较理想,但6个规模场存在PRRSV和PCV2混合感染,应引起各养殖场高度重视。
- 杨均王开功史开志毛君婷
- 关键词：繁殖障碍性疾病血清学调查抗体
- 大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 为探索减毒胞内侵袭菌介导的粘膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,以大肠杆菌与葡萄球菌16S rRNA基因拷贝数为研究对象,采用实时定量技术(Real-time PCR)对2种细菌进行定量检测,建立大肠杆菌与葡萄球菌数量快速检测方法。结果表明:扩增出的2种细菌核苷酸序列与GenBank上已知目的菌种同源性为100%,构建的2条标准曲线相关系数均接近1,误差较小,熔解曲线显示均成单一峰值。成功构建了大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR标准曲线,可为进一步研究减毒沙门氏菌介导的粘膜免疫奠定基础。
- 尹传宝陈俊朱琦毛君婷程振涛周碧君文明
- 关键词：粘膜免疫大肠杆菌葡萄球菌REAL-TIMEPCR
- PRRSV特种野猪分离株NSP2基因序列分析和疫苗免疫效果
- 为了解流行于猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）发病特种野猪群的PRRSV进化特征,对发病猪场现场PRRSV流行毒株的NSP2基因进行序列分析,结果表明该现场毒株NSP2基因缺失90个核苷酸,与国内近年广泛流行的高致病性PRR...
- 周碧君毛君婷史开志王开功文明
- 关键词：特种野猪疫苗免疫
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征和大肠杆菌病混合感染的诊断
- 2009年
- 贵州省某种猪场仔猪陆续死亡,为确诊病因,采用流行病学调查,临床症状及病理剖检观察,PRRS病原核酸RT-PCR检测,细菌分离培养等方法进行诊断。结果:此次疫病由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和大肠杆菌混合感染所致。
- 杨均王开功江昭华史开志毛君婷
- 贵州省猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学调查
- 为了解2007年4月至2008年7月贵州省猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)分子流行病学特征，本文在此期间基于Nsp2基因在全省33个发病猪场展开PRRSV调查。结果表明，有3种不同Nsp2基因缺失类型毒株在贵州省流行。参考...
- 文明毛君婷史开志周碧君王开功
- 关键词：流行病学调查
- 文献传递
- DEV-NP基因酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活检测
- 2011年
- 为构建鸭肠炎病毒(DEV)核衣壳蛋白(NP)基因酵母双杂交诱饵载体,采用PCR技术扩增出DEV-NP基因,克隆至酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7中,以PCR检测、限制性酶切和序列测定等方法进行鉴定;然后采用PEG/LiAc法将阳性质粒pGBKT7-NP转化酵母Y2HGold,在不同营养缺失型培养基进行自激活检测,结果显示,经PCR检测和EcoR I/BamHⅠ双酶切,可见到与预期相一致的目的片段;测序表明该片段含DEV NP基因全部序列;转化Y2HGold酵母菌后,在SD/-Trp/X-α-Gal固体培养基上长出蓝色菌落,而在SD/-Trp/X-α-Gal/AbA固体培养基上未见有菌落生长。无自激活作用的诱饵载体pGBKT7-NP的成功构建,为DEV NP宿主结合蛋白的筛选奠定了基础。
- 张荷代淑燕毛君婷王开功周碧君文明
- 关键词：诱饵载体酵母双杂交自激活作用
- PRRSV不同Nsp2基因缺失型毒株混合感染的鉴定被引量：6
- 2009年
- 从疑似猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪的肺、淋巴结提取样本RNA,针对PRRSV的部分Nsp2基因进行了RT-PCR扩增。结果显示,扩增得到大小不同的2种(HW1和HW2)DNA条带。对PCR产物进行序列分析的结果表明,HW1和HW2都是Nsp2基因的扩增产物,HW2大小为1 062 bp,相对于经典PRRSV缺失90 bp,HW1为975 bp,缺失177 bp,二者之间的核苷酸同源性为98.2%;氨基酸同源性为96.6%。这说明病猪混合感染了2种Nsp2基因不同程度缺失的PRRSV。
- 毛君婷周碧君史开志汪德生文明李永明
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征
- 高质量鸭肝脏组织总RNA的提取及稳定性测试被引量：3
- 2009年
- 为获得高质量的鸭肝组织RNA样本,通过优化提取方案,从1 g超低温(-80℃)的冻存组织中提取RNA,以紫外分光光度计对RNA的含量进行了测定,并对其纯度进行了分析;通过琼脂糖凝胶电泳对RNA的完整性进行了检测,并对所得样本的稳定性进行了测试。结果表明:试验得到了1 528μg RNA,样品OD260/OD280=1.93,电泳得到的28 s和18 s RNA条带清晰可见,没有发生降解,样品在室温条件可保存24 h以上,在-20℃可保存8 d以上。提取的RNA质量较高。
- 毛君婷史开志文明周碧君
- 关键词：稳定性
- 贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查被引量：3
- 2010年
- 为了解2007年4月至2008年7月贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子流行病学特征,在此期间基于PRRSV的Nsp2基因在全省33个发病猪场展开调查。结果表明,有3种不同Nsp2基因缺失类型毒株在贵州省流行。参考PRRSV经典毒株相应序列,根据Nsp2基因缺失的不同情况将PRRSV贵州省流行毒株分为3种类型,类型Ⅰ(3/33)缺失177个碱基,类型Ⅱ(29/33)缺失90个碱基,类型Ⅲ(1/33)缺失93个碱基。类型Ⅱ毒株与近年来国内广泛流行的高致病性PRRSV缺失情况一致,类型Ⅰ和Ⅲ是2种新发现的缺失型毒株,但其系统发生地位与高致病性PRRSV接近。
- 毛君婷史开志周碧君王开功汪德生文明李永明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学
