王仁
- 作品数：33 被引量：53H指数：4
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- 耳机——高校语音室管理的一个薄弱环节及其管理模式的改进被引量：2
- 2008年
- 结合长期从事语音室管理工作的实践，从本校的语音管理出发，较详细地探索现今语音室管理存在的问题，并提出相应的解决办法，旨在推动高校对语音设备附件耳机的管理进行改革。
- 洪春王仁
- 关键词：语言室耳机
- FRG4基因全长克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2009年
- 为了对新的人突触相关蛋白FRG4进行全长克隆及生物信息学分析,从人胎肝文库PCR扩增FRG4基因全长cDNA序列,用生物信息学方法对FRG4基因进行基因组结构分析、多序列同源性比较、跨膜区段、亲疏水性分析、功能结构域预测等。结果表明cDNA文库基础上运用热启动PCR获得FRG4全长cDNA序列,生物信息学分析显示FRG4基因与人类的突触相关蛋白有99%同源性;定位在X染色体的短臂2区2带2亚带2次亚带;由9个外显子和8个内含子组成;无跨膜区段;有一结构域BSD;该基因编码蛋白可能为一水溶性蛋白。
- 王仁姜志胜王佐赵战芝李国华杨向东
- 关键词：生物信息学分析动脉粥样硬化跨膜区功能结构域
- 脂蛋白(a)通过下调Notch信号通路抑制兔骨髓源性内皮祖细胞血管生成被引量：1
- 2011年
- 目的研究脂蛋白(a)对兔骨髓源性内皮祖细胞血管生成的影响及其机制。方法采用密度梯度离心及差速贴壁法从新西兰白兔骨髓中分离培养内皮祖细胞(EPC)。实验共分4组:对照组、脂蛋白(a)组、Delta-like4(Dll4)(Notch信号通路激动剂)组,兴奋剂+脂蛋白(a)组。免疫荧光双抗及功能学鉴定EPC,matrigel胶血管样结构形成分析,实时定量PCR和Western blot分别检测Jag-1的mRNA和蛋白水平。结果脂蛋白(a)呈剂量依赖性对兔骨髓源性内皮祖细胞血管生成产生影响,在培养液中加入50 mg/L脂蛋白(a)24 h后,单位面积血管密度降低,单位面积血管的长度下降到50 mm/cm2,抑制血管生成37.5%+2.3%,随着脂蛋白(a)浓度的增加,损伤加重,在70 mg/L时单位面积血管的长度减少到38 mm/cm2,抑制率52.5%+2.8%,90 mg/L时达到24 mm/cm2抑制率70.0%+3.1%,低于50 mg/L时损伤变化不明显。加入Notch信号通路激动剂Dll4后,血管损伤减轻,密度增加,单位面积血管的长度在脂蛋白(a)浓度50 mg/L时由原来的50 mm/cm2恢复到72 mm/cm2,在90 mg/L血管长度时由原来的24 mm/cm2恢复到41 mm/cm2。而在Notch信号通路激动剂组,血管结构密度增加,单位面积血管样结构的长度达到120 mm/cm2,PCR和Western blot检测Jag-1的mRNA和蛋白表达增加,说明脂蛋白(a)对血管生成的影响通过Notch信号通路实现。结论脂蛋白(a)通过下调Notch信号通路抑制兔骨髓源性内皮祖细胞血管生成。
- 王佐王仁
- 关键词：NOTCH信号通路骨髓源性内皮祖细胞血管生成
- 新的人突触相关蛋白（FRG4）生物信息学分析、抗体制备及表达检测
- 该研究首先通过生物信息学预测了FRG4基因的功能结构域,分析了其进化途径,进行同源性比较,确定了其编码蛋白的抗原表位,进而采用固相多肽合成法制备了FRG4抗原,免疫新西兰兔制备了兔抗人多克隆抗体,并对单核/巨噬细胞THP...
- 王仁
- 关键词：动脉粥样硬化生物信息学抗体制备多肽合成
- 文献传递
- 外源性硫化氢通过抑制SR-A表达减少THP-1源性巨噬细胞内脂质蓄积被引量：3
- 2010年
- 目的探索外源性硫化氢对THP-1源性巨噬细胞脂质蓄积的影响及机制。方法以硫氢化钠(NaHS)做为外源性硫化氢的供体,采用油红O染色结合光密度法测细胞内脂质含量,RT-PCR和Westernblot法测SR-A mRNA和蛋白表达。结果氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)显著诱导巨噬细胞内脂质蓄积和SR-A表达,而NaHS呈浓度依赖性降低ox-LDL诱导的细胞内脂质蓄积,并显著下调SR-A mRNA和蛋白水平。结论外源性硫化氢可能通过抑制SR-A表达减少ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞脂质蓄积。
- 赵战芝王佐谭建苗李国华雷建军王仁唐志晗任重刘录山易光辉姜志胜
- 关键词：硫化氢THP-1源性巨噬细胞脂质蓄积清道夫受体A
- Apo(a)对小鼠骨髓源性内皮祖细胞血管生成能力的影响及其机制研究
- 周围血管疾病一直严重危害着人类健康，目前尚无非常有效的治疗方法。内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)的发现开辟了一条新的治疗途径。EPCs是成熟血管内皮细胞的前体细胞，既可不...
- 王仁
- 关键词：载脂蛋白NOTCH通路内皮祖细胞下肢缺血血管生成
- 新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备被引量：2
- 2005年
- 目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,并免疫家兔;用免疫组化检测蛋白在人肝癌细胞HepG2细胞中的表达。结果:通过生物信息学分析选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,制备兔抗人FRG4多克隆抗体。高效液相色谱检测显示抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16000,Westernblot证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实其主要在HepG2细胞胞浆中表达。结论:成功制备了新的人突触相关蛋白(FRG4)多克隆抗体。
- 王仁杨向东屈顺林刘俊文闾宏伟姬志娟盛树力
- 关键词：巨噬细胞动脉粥样硬化多肽合成抗体
- 蛋白酶体抑制剂MG132诱导人巨噬细胞THP-1凋亡被引量：4
- 2004年
- 泛素-蛋白酶体途径是生物体内进行蛋白质选择性降解的重要途径之一,广泛参与细胞周期调控、DNA修复、细胞信号转导、细胞凋亡等多种生理过程。为了研究调控泛素-蛋白酶体途径表达对巨噬细胞THP-1凋亡和细胞内载脂蛋白B的蓄积的影响,本实验采用蛋白酶体抑制剂MG132(5μmol/L)处理THP-1细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内载脂蛋白B含量,用半定量逆转录-聚合酶链反应检测细胞内UPP途径相关基因的表达。结果发现:MG132可以诱导THP-1细胞凋亡;实验组细胞内载脂蛋白B蓄积增加;实验组细胞内泛素活化酶、泛素缀合酶和泛素-蛋白连接酶mRNA表达均降低,而26S蛋白酶体mRNA无显著改变。结果提示,蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导THP-1细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制泛素-蛋白酶体途径中泛素活化酶、泛素缀合酶和泛素-蛋白连接酶活性,使细胞内栽脂蛋白B经泛素-蛋白酶体途径降解减少,在细胞内蓄积而使细胞凋亡率增加。
- 刘俊文杨向东王仁屈顺林杨永宗
- 关键词：病理学与病理生理学蛋白酶体抑制剂巨噬细胞凋亡
- 胆固醇损伤内皮细胞差异表达基因的生物信息学分析被引量：3
- 2005年
- 目的利用差异表达基因克隆方法(抑制消减杂交)获得大量的动脉粥样硬化相关候选基因和表达序列标签后,探讨如何进行后续基因表达及功能的研究。方法利用Internet网络上的数据库及生物学分析软件对胆固醇损伤内皮细胞后获得的差异表达基因进行核酸序列和蛋白质序列分析,探索差异表达基因克隆后的研究方法和思路。结果通过电子延伸得到一个684bp的全长cDNA序列;通过核酸序列分析,该序列定位在线粒体基因组的7587位～8270位,含有一个完整的开放阅读框,编码与氧化磷酸化相关的9个亚基。对其中一个亚基细胞色素氧化酶Ⅱ(COX2)分析得知,细胞色素氧化酶Ⅱ基因编码一段25.6kDa的弱酸性的信号锚蛋白,细胞色素氧化酶Ⅱ蛋白的三维结构是一个典型的椅式结构,它含有一段疏水区域,一个跨膜结构域和一个胞质结构域。运用蛋白的进化分析,得知细胞色素氧化酶Ⅱ蛋白胞质结构域的氨基酸序列在进化过程中高度保守。结论生物信息学技术是一种高效的获取疾病相关基因信息的方法,利用生物信息学方法对细胞色素氧化酶Ⅱ基因进行分析,获得了基因及其编码蛋白的相关信息,该蛋白参与电子传递,可能与细胞的氧化应激有关。
- 彭瑾瑜朱勋唐蔚青王抒黎健王仁郭芳刘俊文杨向东
- 关键词：病理学与病理生理学生物信息学分析动脉粥样硬化内皮细胞胆固醇
- 泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备
- 2005年
- 目的探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法。方法将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列,通过生物信息学分析,预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对,并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及实验难度等,确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,采用固相多肽合成法合成该抗原片段,偶联后经过基础免疫,6次加强免疫,经追踪检测,于第四次免疫后10～14天颈动脉放血,分离血清,冷冻抽干,-20℃保存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体。结果用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体,该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1∶16000,Westernblot检测可见40kDa处有目的带,用免疫组织化学方法从HepG2细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达,证实该抗体具有较好的反应性和特异性。结论固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高;泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备,为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础。
- 冯大明王仁孙文清郭芳屈顺林杨向东
- 关键词：病理学与病理生理学多肽合成多克隆抗体
