王小行
- 作品数：9 被引量：51H指数：4
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：成都大熊猫繁育研究基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学石油与天然气工程更多>>
- 利用低强度脉冲电磁场对家猪精子电穿孔的研究
- 2002年
- 用低强度脉冲电磁场对家猪精子细胞进行电击处理 ,发现台盼蓝染料能够进入细胞 ,而且通过扫描电镜可以观察到细胞膜表面有明显的孔洞 .
- 王小行彭勇王子淑王保义张弘刘长军
- 关键词：家猪低强度脉冲电磁场精子电穿孔转基因动物电击法
- 麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测被引量：7
- 2006年
- 脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍应用于皮革、饲料及生物柴油工业的工业酶制剂,具有广泛的应用价值。目前对植物来源的脂酶研究较少。本研究用在生物柴油中具有应用前景的油料植物——麻疯树(Jatrophacurcas)作为研究对象,克隆了该物种的脂酶基因(JcLIP)。通过多序列比对并结合物种的亲缘关系设计了具有较高特异性的简并引物,通过使用RT-PCR和RACE技术,最终获得了麻疯树脂酶基因的全长序列并成功地在大肠杆菌中表达,酶活测定结果表明,麻疯树脂酶在大肠杆菌中表达在包涵体中,但是能产生具有活力的蛋白质,酶活约为0.8U.mL-1。结构预测和比较表明,JcLIP蛋白质具有脂酶的结构核心和催化活性中心,而在非核心区具有较毛霉脂酶更多的插入和随机卷曲,这可能是决定二者之间酶活差异的重要原因。
- 王小行彭峰牛冬云李钢陈放
- 关键词：脂酶麻疯树蛋白质结构
- 低强度瞬态电磁场下动物细胞的电穿孔效应被引量：16
- 2000年
- 用低强度瞬态电磁场 (TransientElectromagneticField ,TEMF)处理动物细胞后 ,一些胞内蛋白可以溢出细胞 ,荧光标记抗体蛋白 (IgG)可以进入细胞 ,通过扫描电镜观察到红细胞膜上有电致孔洞 ,证实了低强度瞬态电磁场作用能引起电穿孔 .
- 彭勇王子淑王小行陈文元吴致远郭尚勤王保义张弘刘长军吕学斌曾凯
- 关键词：IGG动物细胞
- 小熊猫染色体异染色质的显示被引量：4
- 1999年
- 以培养的小熊猫外周血淋巴细胞为实验材料，结合C-显带技术及CMA／DA／DAPI三重荧光染色的方法，对小熊猫的染色体组型、C-带带型以及CMA／DA／DAPI荧光带带型进行了研究。发现：①经C-显带技术处理，可在小熊猫染色体上呈现出一种极为独特的C-带带型．在多数染色体上可见到丰富的插入C-带（intercalaryC－bands）及端粒C-带，而着丝区仅显示弱阳性C-带；②除着丝粒区外，CMA诱导的大多数强荧光带纹与C-阳性带纹的出现位置具一致性，表明小熊猫染色体的这些阳性C-带富含GC碱基；③14号染色体为短臂中部具次级缢痕的中着丝粒染色体，是小熊猫的标记染色体，其着丝粒区显示强阳性C-带。
- 王亚军王喜忠王子淑马用信陈文元王小行宋云芳陈红卫何光昕费立松
- 关键词：小熊猫染色体C-带荧光染色
- 大熊猫繁育障碍与染色体脆性位点的相关性研究被引量：7
- 2001年
- 通过研究建立起适合大熊猫染色体脆性位点表达的ＢｒｄＵ诱导体系。以大熊猫外周血淋巴细胞为材料，通过较长时间培养（９６ｈ），采用低浓度ＢｕｄＵ（１０ｕｇ／ｍｌ），短时间（４ｈ）诱导，并结合复制带技术将大熊猫染色体脆性位点的高发生区段准确地定位在Ｎｏ．２和Ｎｏ．１２号染色体着丝粒区域。经生物统计学分析发现，Ｎｏ．２和Ｎｏ．１２号染色体脆性位点表达频率在个体中有明显差异，而且前者与大熊猫个体的子代存活率呈负相关（ｒ＝－ ０．７７２）。研究结果提示，Ｎｏ．２染色体着丝粒处高效表达的脆性位点对大熊猫个体繁育及其后代的存活是不利的。
- 汪晓晶王小行谭言飞王亚军王喜忠陈红卫何光昕费立松
- 关键词：大熊猫脆性位点染色体
- 大熊猫及其近种活化素基因β_A亚基成熟肽序列的克隆分析及其在分类地位上的应用被引量：17
- 2002年
- 借鉴互联网中已经克隆到的Activin基因 βA 亚基成熟肽序列 ,设计并合成 1对兼并引物 ,利用PCR技术从大熊猫、小熊猫、马来熊的基因组DNA中直接扩增目的基因片段 ,并分别克隆到大肠杆菌载体pBlueScript+ 当中 ,然后对培养产物进行序列测定。DNA序列分析表明 ,三种物种的Activin基因 βA 亚基成熟肽序列长度均为 35 9bp ,无内含子。基因片段编码一个含有 119个氨基酸残基的肽段。大熊猫、小熊猫、马来熊在该成熟肽核苷酸和氨基酸序列上表现出高度的同源性 ,其中核苷酸同源性为 93.9% ,氨基酸同源性高达 99%以上。此外 ,3种动物的核酸限制性酶切图谱也高度相似。与GenBank中收录的其他物种Activin基因 βA 亚基成熟肽序列相比较 ,显示此片段在处于不同进化程度的物种之间仍具有高度保守性。运用系统发育与进化树软件包PHILIP ,并结合克隆序列对大熊猫、小熊猫、马来熊进化与分类地位进行了探讨。采用不同的统计学分析方法 ,所得到的 3个物种系统发育进化树的拓扑结构完全一致。相比较而言 ,大熊猫与马来熊有着较近的亲缘关系 ,而小熊猫与上述两个物种的亲缘关系相对疏远。结果支持将大熊猫与马来熊归为熊科、而将小熊猫单列成科的学术观点。这是首次以生殖相关的核基因作为研究对象 。
- 汪晓晶王小行王亚军王喜忠何光昕陈红卫费立松
- 关键词：大熊猫克隆分析系统发育
- 脆性位点诱导技术在大熊猫染色体研究中的引入与应用
- 2001年
- 本文简要介绍了近年来在细胞遗传学水平 (主要是染色体水平 )上对大熊猫进行的研究。其中着重讨论了 2 0世纪 90年代后期所兴起的结合复制带技术的大熊猫染色体脆性位点BrdU诱导体系 ;详细分析了这种技术的产生、发展和优点等方面的内容 ;
- 陈红卫汪晓晶王小行
- 关键词：大熊猫脆性位点染色体细胞遗传学
- 新型全细胞催化剂在麻疯树生物柴油中的应用
- 生物催化剂是生物柴油转酯反应研究中重要的研究对象，目前新酶种的发现和全细胞催化剂的开发是这个领域中的研究热点。麻疯树(Jatropha curcas)是重要的植物油脂资源，对生物柴油的开发具有重要价值，为此本文研究了麻疯...
- 王小行
- 关键词：麻疯树生物柴油脂肪酶基因克隆活性中心
- 盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因克隆及其蛋白质结构预测被引量：2
- 2006年
- 本文通过对盐生杜氏藻(Dunaliellasalina)cDNA文库进行大规模EST测序并结合RACE实验克隆了盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因,并且通过Southernblotting实验确定了该基因在这个物种中拷贝数。通过生物信息学的方法,预测该基因所编码的蛋白质结构,验证了该蛋白质具有3-磷酸甘油脱氢酶完整的功能性结构域和磷酸水解酶类结构域。本实验为解释盐生杜氏藻在面临高渗胁迫下快速合成甘油的机制提供了帮助。
- 李钢邓运涛任刚杨滔王小行
- 关键词：3-磷酸甘油脱氢酶结构域盐生杜氏藻
