王辉
- 作品数:14 被引量:15H指数:2
- 供职机构:上海海洋大学更多>>
- 相关领域:环境科学与工程轻工技术与工程农业科学医药卫生更多>>
- 代谢型谷氨酸受体5的纯化及纳米抗体的筛选
- 2023年
- 文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行表达纯化,然后对野生单峰驼进行7次免疫,对抽取骆驼的外淋巴细胞总RNA进行提取,经过反转录的方式转为c DNA,将用巢式PCR对VHH片段进行扩增并与p MECS噬菌粒载体进行连接,并电转化至TG1大肠杆菌中构建纳米抗体噬菌体展示文库;其三通过M13噬菌体展示技术对文库进行淘选,淘选出多个互补决定区3序列不同的纳米抗体;最后纯化出纯度较高的m GluR5蛋白,构建出库容量为5.47×10^(8)CFU/mL的噬菌体文库菌,经过两轮液相淘选,获得了12个互补决定区3序列不同的纳米抗体。研究成功筛选出12个与m GluR5特异性结合较高的纳米抗体,为m Glu R5的靶向药物研发和G蛋白偶联受体的信号通路研究奠定了基础。
- 王辉马梦洁许剑锋
- 关键词:代谢型谷氨酸受体5
- 南美白对虾养殖技术集成关键及其养殖水体微生物的鉴定
- 南美白对虾(Penoeusvannomei)又称白对虾、凡纳滨对虾,和中国对虾(Penoeuschinensis)、斑节对虾(Penoeusmonodon)并称为世界三大高产养殖虾种。南美白对虾为热带性虾种类,原产于南美...
- 王辉
- 文献传递
- 便携式过滤装置
- 本实用新型公开了便携式过滤装置,属于环境DNA过滤技术领域。它包括第一底座、第二底座、支撑量筒、按压组件和筒盖,所述第二底座位于第一底座的上方,所述第一底座和第二底座之间通过连接条相连接,所述支撑量筒通过连接件安装在第二...
- 李晨虹刘芊芊王辉
- 一种用于环境DNA的过滤器
- 本发明公开了一种用于环境DNA的过滤器,属于环境DNA领域。它包括滤器底座、滤膜支架、滤膜、防静电隔网、滤棉、限位压网、滤器上盖和防爆卡;所述滤膜支架设在滤器底座的内部,所述滤膜完整平铺在滤膜支架上,并固定在滤器底座上;...
- 李晨虹王辉刘芊芊辛妮
- 利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合、试剂盒及方法
- 本发明属于生物技术领域,具体公开了利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合、试剂盒及方法。本发明创新了引物设计方法,筛选出六种优势拟柱孢藻多重PCR引物组合,结合优化的PCR反应体系和条件,能够在多种类蓝藻背景下...
- 李晨虹陈子涵王辉
- 环境DNA技术在水生生物监测中的挑战、突破和发展前景被引量:9
- 2023年
- 近年来,人类活动影响导致水生态系统平衡遭到破坏,水生生物多样性锐减,水生态健康状况堪忧。快速、有效地监测水生生物是评价水生态健康,科学开展水生态环境保护和管理的前提。环境DNA(environmental DNA,eDNA)技术是一种运用分子生物学方法,从环境样品中提取DNA并进行测序和分析来反映物种信息的技术。由于该技术只需采集环境样品(水、土壤、沉积物等)便能获得大量物种信息,具有非入侵性、灵敏性及低成本等特点,近年来备受关注。但是,已有的研究实践表明,目前eDNA技术仍然面临一些挑战,阻碍了其常态化、业务化应用。从生物多样性调查、入侵和濒危物种监测、食性研究等方面列举了eDNA技术在水生生物监测中的应用实例,并总结目前eDNA技术在采样效率、假阳性和假阴性、来源不确定性、数据库缺失和定量结果不准确等5个方面所面临的问题和挑战;进一步探讨研究者针对这些问题所提出的相应解决方案和技术突破。最后,对eDNA技术未来的发展前景进行了展望,以期为研究人员使用eDNA技术提供启发。
- 李晨虹凌岚馨谭娟谭娟王辉王辉李曌
- 利用qPCR检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法
- 本发明属于分子生物学和分子生态学技术领域,具体公开了利用qPCR检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明创新了引物设计方法,筛选出四种优势鳄雀鳝qPCR引物探针组合,结合优化的PCR反应体系和条件,能够在多...
- 李晨虹王辉戚亿利凌海宁
- 基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法
- 本发明属于分子生物学和分子生态学技术领域,具体公开了基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明创新设计方法,筛选出两组食蚊鱼的RPA特异性引物与探针,结合侧流层析试纸条检测法,建立了一种食蚊鱼的RP...
- 李晨虹张秋灏王辉
- 基于RPA技术检测缅甸蟒的引物探针组合、试剂盒及方法
- 本发明属于生物技术领域,具体公开了基于RPA技术检测缅甸蟒的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明筛选出两组缅甸蟒的RPA特异性引物与探针,结合侧流层析试纸条检测法,建立了一种缅甸蟒的RPA‑LFD检测方法。该方法操作简便、...
- 李晨虹张秋灏王辉
- 基于RPA技术现场检测齐氏罗非鱼的引物探针组合、试剂盒及方法
- 本发明属于分子生物学和分子生态学技术领域,具体公开了基于RPA技术现场检测齐氏罗非鱼的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明创新设计方法,筛选出一组齐氏罗非鱼的RPA特异性引物与探针,结合侧流层析试纸条检测法,建立了一种齐氏...
- 李晨虹孙立张秋灏王辉