朱卫民
- 作品数：13 被引量：226H指数：9
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省高校高新技术产业发展项目江苏省自然科学基金更多>>
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- 建立青菜(Brassica chinensis)农杆菌介导法基因转化体系被引量：39
- 1997年
- 以青菜地方品种矮脚黄、苏州青的子叶、子叶柄、真叶为外植体，在改良ＭＳ培养基上离体培养获得再生植株。在不定芽诱导培养基中添加２～２０ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３可显著提高子叶不定芽诱导频率；添加０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ和１～２ｍｇ／ＬＣＰＰＵ既可提高不定芽诱导频率，又可获得较多数量的不定芽。用含ＣｐＴＩ基因和ＮＰＴＩＩ基因的农杆菌感染子叶，获得了具有卡那霉素抗性的再生植株。培养基中添加羧苄青霉素促进子叶再生不定芽，头孢霉素和卡那霉素则抑制子叶再生。卡那霉素敏感性测定结果表明，当培养基中含卡那霉素１０ｍｇ／Ｌ时。
- 蔡小宁佘建明朱祯朱卫民袁希汉苏小俊
- 关键词：青菜农杆菌介导法基因转化体系再生植株
- 外源基因在不结球白菜转基因植株后代中的表达被引量：10
- 2002年
- 应用农杆菌介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂基因和新霉素磷酸转移酶基因的重组质粒导入不结球白菜地方品种———“中脚黑叶”和“矮脚黑叶”中 ,获得抗虫转基因植株。卡那霉素抗性和抗虫性在转基因植株自交后代T1代植株中发生分离 ;在T2 代中出现 3种不同类型的株系 :抗性纯合、杂合型和敏感性纯合株系。卡那霉素抗性和抗虫性在转基因植株自交后代中的表现基本符合孟德尔显性单基因的分离规律。从T2 、T3 、T4代中选择出抗虫性纯合株系 ,并获得一批对 1～ 2龄鳞翅目小菜蛾、斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率达 6 0
- 佘建明蔡小宁朱卫民张初贤朱祯袁希汉苏小俊李彬
- 关键词：不结球白菜转基因植株豇豆胰蛋白酶抑制剂基因抗虫性
- 影响大白菜子叶再生植株的因素被引量：3
- 2002年
- 以大白菜 42号自交不亲和系、2 1 8号自交不亲和系、夏丰无菌苗子叶为外植体 ,研究了几种培养基成份对离体培养植株再生的影响。在无菌苗萌发培养基上添加 7.5mg/LAgNO3,可提高不定芽诱导频率。高压灭菌前后添加AgNO3,从大白菜子叶诱导不定芽频率无差异。降低培养基中NH4 NO3含量导致不定芽诱导频率降低。适当增减培养基中KNO3含量对不定芽诱导无影响 ,在不定芽诱导培养基中可以使用适量的2 ,4-D代替NAA ,但再生的不定芽明显畸形。
- 蔡小宁佘建明朱卫民陈舒泛
- 关键词：大白菜子叶再生植株
- 三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶基因克隆及植物表达载体的构建被引量：4
- 2003年
- 通过RT PCR技术从盐生植物三角叶滨藜总RNA中,扩增并克隆了BADH68基因。该基因全序列显示,核苷酸序列长1520bp,12～1515bp为1个开放阅读框架,推测的氨基酸序列全长为500个氨基酸残基,其核苷酸序列与菠菜和山菠菜同源性分别为89%和95%。利用BamHI和SacI酶切位点将BADH68基因连接到pCAMBI A2301的多克隆位点,并把35S启动子和nos终止子分别连接到BADH基因的上游和下游的多克隆位点上,获重组植物表达质粒pCAMATBADH682,并转入根癌农杆菌LBA4404中,获LBA4404(pCBAMATBADH682)菌种。
- 何晓兰吴纪中刘桂华张保龙钦佩侯喜林朱卫民
- 关键词：三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶基因克隆植物表达载体基因构建
- 定点诱变G5-淀粉酶被引量：1
- 1999年
- 利用定点突变技术，分别改变位于 Ｇ５淀粉酶氨基酸序列上高度保守区段内的３个氨基酸 Ｔｒｐ５７、 Ｔｙｒ１３９和 Ｌｙｓ１８８。其中， Ｔｒｐ５７和 Ｔｙｒ１３９分别被 Ｈｉｓ、 Ｐｈｅ、 Ｌｅｕ 和 Ｔｙｒ 取代， Ｌｙｓ１８８分别被 Ａｒｇ 和 Ｑｌｎ 取代，共得到９种单点突变基因。这些突变基因均在大肠杆菌中获得表达。对这些突变基因所表达的 Ｇ５淀粉酶的水解活性及其变化进行了初步分析。发现这些突变酶对淀粉和 Ｇ５的水解活性有不同程度的下降，而且对 Ｇ５的水解活性的下降尤为明显，其中，个别突变酶在基本保持对淀粉的水解活性的同时，对 Ｇ５的水解活性有大幅度的下降。
- 朱卫民伊藤义文
- 关键词：定点诱变淀粉酶
- 陆地棉（G．hirsutumL．）茎尖分生组织培养及其在基因导入上的应用被引量：43
- 1994年
- 陆地棉栽培品种的种子无菌发芽１～３天。将萌动种子的顶端分生组织培养在无激素或附加低浓度激素ＭＳ基本培养基上，直接再生完整小植株。从顶端分生组织到再生植株所需的最短培养时间约１０天。顶端分生组织供体种芽的萌芽天数及其所连接的胚轴长度对植株再生频率有明显影响，但与品种的关系较小，不同品种均能获得再生植株。应用基因枪轰击法将ＣＰＴⅠ基因和ＮＰＴⅡ基因的重组质粒导入到棉花茎尖分生组织，培养获得卡那霉素抗性株。
- 吴敬音朱卫民佘建明蔡小宁朱祯李向辉
- 关键词：陆地棉植株再生
- 棉花茎尖分生组织在微粒轰击法基因转化中的应用被引量：25
- 1998年
- 利用棉花茎尖分生组织易于再生成完整植株的特点，结合使用基因枪轰击法将ＣＰＴＩ基因导入棉花茎尖分生组织。经过再生、筛选等培养过程已获得若干卡那霉素抗性株。棉花品种、棉株茎尖的发育天数及茎尖附带的下胚轴长度等对转化效果都有不同程度的影响。筛选的起始时间、培养基的转换时间及卡那霉素的浓度梯度等因素对筛选效果有明显影响。
- 朱卫民吴敬音佘建明蔡小宁朱祯李向辉
- 关键词：棉花基因转化
- 结球甘蓝抗虫转基因植株及其后代的抗性表现被引量：20
- 2001年
- 应用农杆菌介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因和新霉素磷酸转移酶 (NPTⅡ )基因的重组质粒导入结球甘蓝栽培品种春甘蓝“鸡心 2 3”和秋甘蓝“黑叶头”。对转基因当代植株 (T0 )及其自交后代 (T1、T2 、T3)群体进行卡那霉素抗性、抗虫性鉴定和分子检测。经PCR DNA分子杂交检测 ,确认抗虫基因———豇豆胰蛋白酶抑制剂基因已整合到受体植株的基因组中 ,并在有性生殖过程中传递给后代。卡那霉素抗性和抗虫性状在T0 代植株上得到表达 ;T1代植株中发生分离 ;T2 代中呈现出 3种不同类型的株系 :抗性纯合、杂合型和敏感性纯合株系 ;从T3 代中获得卡那霉素抗性和抗虫性纯合的株系。试验结果显示 ,卡那霉素抗性和抗虫性状在转基因植株自交后代中的表现基本符合显性单基因的分离规律。在T2 、T3 代抗虫性纯合的株系中 ,鳞翅目小菜蛾、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的 1～ 2龄幼虫校正死亡率为 6 %～ 10 0 % ,从中选出一批校正死亡率达 80
- 佘建明蔡小宁朱卫民张初贤丁万霞李建斌李彬朱祯
- 关键词：结球甘蓝转基因植株豇豆胰蛋白酶抑制剂卡那霉素抗性
- 6BA和AgNO_3对甘蓝型油菜带柄子叶外植体不定芽再生的影响被引量：37
- 2001年
- 通过研究两个甘蓝型油菜 (BrassicanapusL )亲本材料“宁A6”和“宁R1”带柄子叶外植体不定芽再生能力 ,探明了 6BA和AgNO3 浓度对外植体不定芽再生能力影响效果 ,并确定了促进两种不同基因型甘蓝型油菜不定芽再生的最适 6BA和AgNO3 浓度。组织学观察表明 。
- 何小兰吴敬音朱卫民薛启汉
- 关键词：AGNO3甘蓝型油菜不定芽再生植物生长调节剂硝酸银
- 嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因的亚克隆和表达
- 1993年
- α-淀粉酶是芽孢杆菌产生的一种胞外多糖酶（Stephen AO等,1983）,在酒精、啤酒酿造、制糖和纺织工业上广泛使用。国内外科学家相继报道了α-淀粉酶基因的克隆（Palva I,1982; Mielenz JR,1983;Tsukagushi N 等,1984;周建华等,1986;任大明等,1987）,但尚未能结合传统遗传育种方法得到高产的生产菌株。为了进一步研究α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达,本实验将α-淀粉酶基因以很高转化率转化到枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中,并能在两种宿主菌中复制和表达四环素抗性功能的穿梭质粒pHY300为载体,α-淀粉酶基因的亚克隆,在大肠杆菌HBl01中获得了表达,并将重组穿梭质粒pLE24转化到枯草芽孢杆菌168中。 1 材料和方法 1.1 材料 含有2.8Kb嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因插入片段的质粒Pα 102系本实验室以质粒pUC 19为载体,利用鸟枪法从嗜热脂肪芽孢杆菌（As1999）中克隆得到的。穿梭质粒pHY 300,购自日本宝酒造株式会社。大肠杆菌HB101(hsdR,hsdM,recAl3,supE-44,lacY,leuB6,thi-1)
- 张德玉吴宁一朱卫民管丽丽狄冽陈钧辉
- 关键词：穿梭质粒淀粉酶基因芽孢杆菌属
