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抗人CD86双价抗体的表达及与抗原的结合特性: 2012年; 目的:用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达抗人CD86双价抗体(CD86-diabody),鉴定该抗体对表达CD86分子肿瘤细胞的识别及介导的生物学效应。方法:从分泌抗人CD86小鼠源抗体的杂交瘤1D1中克隆抗体重、轻链可变区基因VH及VL。SOE-PCR构建VH-(GGGGS)-VL双价抗体基因,整合到真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染CHO细胞,FCM筛选G418加压培养的阳性克隆。IMAC纯化并定量抗体。免疫荧光法分析抗体对人B系淋巴瘤细胞株Raji及Daudi膜型CD86分子的阳性结合率,将抗体加入到Raji细胞的培养体系中,培养72 h,MTT法分析抗体对细胞体外增殖的影响。结果:获得了稳定分泌抗人CD86-diabody的CHO细胞株。培养上清中抗体纯品的得率为5.24 mg/L。抗体与Raji及Daudi细胞的阳性结合率分别为77.2%及70.6%。经抗体孵育72 h,Raji细胞体外增殖抑制率为37%。结论:成功制备了抗人CD86-diabody,可特异性结合细胞膜型CD86分子,并对表达该分子的肿瘤细胞体外增殖具有抑制效应。; 王志强安萌朱华亭孔永王婧韩莲花夏永洁邱玉华; 关键词：CHO细胞双价抗体抑制增殖

人CXCR3B基因转染细胞株的构建、鉴定及生物学功能研究被引量：7: 2011年; 目的:克隆人CXCR3B基因,并构建含有该目的基因的真核表达载体,获得稳定表达人CXCR3B分子的基因转染细胞株L929-huCXCR3B。方法:采用PCR方法从pMD19-T/huCXCR3A质粒中扩增人CXCR3B基因,通过双酶切装入真核表达载体pIRES2-EGFP中;脂质体法转染L929细胞,G418加压筛选阳性克隆;分别用RT-PCR方法与免疫荧光技术分析阳性克隆中人CXCR3B在mRNA和蛋白水平的表达。MTT分析基因转染细胞株L929-huCXCR3B在Mig(monokineinduced by IFN-γ,IFN-γ诱导的单核因子)作用下的增殖能力。结果:成功克隆了人CXCR3B基因并构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/huCXCR3B,转染该载体后获得了稳定表达人CXCR3B的基因转染细胞株L929-huCXCR3B,膜表面CX-CR3B分子的阳性表达率为93%。该基因转染细胞与其配体Mig共培养24、48及72 h,抑制率分别为41.44%、44.01%和24.80%。结论:L929-huCXCR3B细胞株的建立为研究CXCR3B信号转导及制备相应的单克隆抗体(mAb)奠定了基础。; 郭静雅陈昌友王志强张彦军黄赛男朱华亭邱玉华; 关键词：趋化因子 L929细胞基因转染

层状双氢氧化物基复合材料的制备及其电化学性能的研究: 随着时代的发展，二维材料在能量存储和转化领域已经引起了越来越多的关注。层状双氢氧化物(LDHs)作为一种具有代表性的二维材料，由于其组成、结构和形貌的简易可调以及独特的物理化学性质，在该领域表现了巨大的潜力。通过不同的制...; 王志强; 关键词：复合材料双氢氧化物

抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析被引量：2: 2013年; 目的构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv),研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能。方法从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因,构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞。经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化。流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争抑制效应。MTT法分析CD86-scFv与Raji细胞表达的CD86结合后对细胞生长的影响。结果获得了稳定表达抗人CD86-scFv的CHO细胞株及相应抗体。CD86-scFv与CD86基因转染细胞株L929-CD86、天然表达CD86分子的人B系淋巴瘤细胞Raji和Daudi细胞的阳性结合率分别为67.0%、72.3%和80.5%。CD86-scFv对鼠源亲本抗体1D1具有竞争结合能力,将CD86-scFv(终浓度20μg/mL)加入Raji细胞共同培养72 h时的细胞生长抑制率为28.3%。结论成功构建了稳定分泌抗人CD86-scFv的CHO细胞株(命名为SA-IV)。该抗体能够识别CD86分子并具有良好的生物学活性。; 安萌王志强朱华亭孔永王婧沈立军韩莲花夏永洁邱玉华; 关键词：CD86 单链抗体真核表达

D-半乳糖致衰老小鼠脾脏T细胞亚群的改变及其意义被引量：3: 2012年; 目的:探讨D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠脾脏T细胞亚群的改变及其意义。方法:运用100 g/L D-半乳糖溶液建立小鼠亚急性衰老模型,并对此衰老模型进行生物学鉴定。ELISA检测模型小鼠血清中IFN-γ和IL-4的含量;流式细胞术检测模型小鼠脾脏中初始、活化及调节性T细胞相关分子的改变。结果:模型组小鼠血清中IFN-γ和IL-4含量分别为(82.93±2.74)pg/mL和(125.41±3.16)pg/mL,与对照组[(125.41±3.16)pg/mL和(8.28±2.47)pg/mL]相比含量降低(P<0.01)。脾脏中初始T细胞相关分子CD45RA表达下降[模型组:(4.46±1.21)%,对照组:(7.38±1.03)%,P<0.01];活化T细胞相关分子CD25表达下降[模型组:(6.74±0.81)%,对照组:(5.14±1.25)%,P<0.05];Foxp3在CD4+CD25+T细胞中表达上升[模型组:(18.32±1.44)%,对照组:(10.14±1.52)%,P<0.05]。结论:机体衰老时脾脏中初始和活化T细胞减少,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tr)增多,T细胞活化及免疫调节能力下降。; 张彦军朱华亭黄赛男夏永洁王志强沈立军安萌邱玉华; 关键词：D-半乳糖亚急性衰老脾脏 T细胞亚群

D-半乳糖所致衰老小鼠抗原提呈细胞的改变及其意义: 2012年; 目的:研究D-半乳糖所致衰老小鼠专职性抗原提呈细胞的改变及其意义。方法:取健康昆明雌性小鼠,2月龄,运用D-半乳糖建立衰老小鼠模型并进行生物学鉴定后,采用免疫荧光和流式细胞术测定脾脏中巨噬细胞CD11b、树突状细胞CD11c、B淋巴细胞CD40的表达;采用免疫组化法测定脾脏组织Fas表达的改变。结果:模型组小鼠巨噬细胞CD11b+/MHC-Ⅱ+CD11b+的百分率为9.78±1.42,与对照组10.76±1.93相比下降(P<0.05);模型组小鼠树突状细胞CD11c+/MHC-Ⅱ+CD11c+、B淋巴细胞CD40+的百分率分别为5.34±0.74、43.60±8.06,与对照组7.88±1.73、56.70±10.97相比明显下降(P<0.01)。模型组小鼠脾脏组织Fas表达增加。结论:D-半乳糖所致衰老小鼠脾脏各种专职性抗原提呈细胞减少,脾脏组织Fas的表达出现渐进性增加。; 黄赛男朱华亭张彦军夏永洁沈立军王志强安萌孔永邱玉华; 关键词：D-半乳糖衰老抗原提呈细胞 FAS

金属硫族半导体团簇中锰离子发光性能的调控机制研究: 掺Mn2+半导体纳米晶(或量子点)因Mn2+掺杂剂而具有独特发光性能，如良好光稳定性、大斯托克斯位移、微.毫秒级激发态衰减寿命等，因而在新能源转换和光电子器件等领域展现出巨大应用前景。有关掺Mn2+纳米晶的合成、光物理性...; 王志强; 关键词：锰离子发光性能

抗人CD86双价抗体的研制及生物学活性研究: B7分子是表达在抗原递呈细胞表面的协同刺激分子，其中 CD86(又称 B7-2)和CD80(又称B7-1)为B7分子家族重要成员，为T细胞活化提供重要的协同刺激信号。T细胞的活化不但需要TCR识别抗原肽段所介导的特异性信...; 王志强; 关键词：真核表达生物学活性 B7分子; 文献传递

绿色合成二维过渡金属碳化物或者氮化物纳米片的方法: 本发明公开了一种绿色合成二维过渡金属碳化物或氮化物纳米片的方法，其包括：将腐蚀插层剂与三元层状陶瓷材料混合并进行腐蚀插层反应后，再通过剪切分散处理获得二维过渡金属碳化物纳米片或二维过渡金属氮化物纳米片。本发明提供的二维过...; 耿凤霞宣琎楠王志强; 文献传递

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