段春光
- 作品数：48 被引量：137H指数：7
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 携带人VEGF_(165)和ANG-1双基因的腺病毒载体的构建及目的基因的表达被引量：2
- 2010年
- [目的]构建并鉴定携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和血管生成素-1(ANG-1)双基因共表达重组腺病毒载体pAd-VIA。[方法]采用基因克隆技术克隆目的基因VEGF165、ANG-1基因,将得到的基因通过引入内部核糖体进入位点序列(IRES),亚克隆至含有报告基因EGFP的穿梭载体pTrack-CMV中,构建携带双基因的腺病毒穿梭载体pTrack-CMV-VIA。进而使用AdEasyTM腺病毒系统重组并包装腺病毒。通过绿色荧光蛋白(GFP)表达、酶联免疫吸附分析(ELISA)方法检测制备的腺病毒pAd-VIA感染的大鼠骨髓基质干细胞中外源基因VEGF165及Ang-1的表达。[结果]该重组腺病毒质粒经测序、酶切鉴定,证明基因序列正确。转染QBI-293A细胞后,可观察到GFP明显表达。重组合腺病毒载体pAd-VIA获得成功包装,扩增后病毒滴度为2×1010PFU/ml,大鼠骨髓基质干细胞转染48 h后,绿色荧光蛋白表达阳性,ELISA结果显示转染组在感染48 h后,培养细胞上清中的VEGF165浓度为(42.5±2.082)ng/105细胞,ANG-1浓度为(16.67±2.08)ng/105细胞,未转染组几乎未检测到外源基因的表达,有统计学差异(P<0.05)。[结论]成功构建携带人VEGF165、ANG-1双基因共表达重组腺病毒载体,为组织工程人工骨血管化的研究奠定基础。
- 张金康孟国林刘建胡蕴玉袁志段春光毕龙白峰黄鑫禚文昆李国臣
- 关键词：血管生成素-1腺病毒载体基因转染
- 降钙素基因相关肽对大鼠骨髓单核巨噬细胞破骨分化作用的实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的通过体外实验研究外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠骨髓单核巨噬细胞(BMMs)破骨分化能力的影响,为CGRP在抗骨质疏松治疗方面的应用提供理论依据。方法采用差速贴壁的方法分离出SD大鼠髓腔内单核巨噬细胞,原代培养并传代,在培养体系中添加含不同浓度CGRP(实验组:10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L;对照组:无CGRP)的破骨诱导液,对前体细胞进行破骨诱导7天后进行相关实验检测,分别采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP染色)观察破骨细胞的生成能力;用RT-PCR方法检测破骨细胞系特征性基因(RANK、TRAP、NFATc1);Western-blot检测破骨特征性TRAP和RANK蛋白的表达;骨磨片甲苯胺蓝染色检测诱导的破骨细胞的骨吸收功能。结果 TRAP染色显示CGRP各浓度组镜下成熟破骨细胞的个数显著低于对照组,有统计学差异(P<0.05)并随CGRP浓度的增高成熟破骨细胞数减少,CGRP组间亦差异明显(P<0.05);RT-PCR检测破骨特征性RANK、TRAP、NFATc1 mRNA和Western-blot测破骨特征性TRAP、RANK蛋白的表达各CGRP组均低于对照组(P<0.05);骨磨片破骨细胞甲苯胺蓝染色后单倍视野下CGRP组破骨陷窝数量也明显少于对照组(P<0.05),且与药物组浓度与陷窝数量呈负相关性。结论 CGRP能够抑制BMMs向破骨方向的分化,为CGRP抗骨质疏松的治疗提供理论支持。
- 张文强段春光孟国林王春梅唐鹏王铮曾艳平刘建
- 关键词：降钙素基因相关肽单核巨噬细胞
- 人免疫球蛋白G（IgG）多克隆、单克隆抗体的制备及IgG与HSP70在肿瘤细胞内共定位及其意义的研究
- 免疫球蛋白/(IgG/)是免疫系统中的重要分子，以往经典的免疫学理论认为IgG都是B淋巴细胞和浆细胞分泌的，而新近的研究表明上皮性肿瘤也能分泌IgG。同时以往的研究已证实，在肿瘤细胞中，热休克蛋白/(HSP/)高表达。我...
- 段春光
- 关键词：免疫球蛋白G热休克蛋白70肿瘤
- 文献传递
- 2D导航辅助经皮骶髂螺钉治疗骨盆后环骨折经验分析被引量：9
- 2016年
- 目的:观察C型臂透视2D导航引导下经皮骶髂螺钉治疗骨盆后环不稳定型骨折的手术安全性和临床效果。方法:2011年1月-2013年12月采用二维透视导航辅助经皮置入骶髂螺钉治疗C型(Tile分型)骨盆骨折患者22例,其中交通伤16例,坠落伤4例,重物砸伤2例。伤后就诊时间5 h^12d(平均20 h)。按照骨盆骨折Tile分型:B3.3型1例,C1.2型8例,C1.3型12例,C3.3型1例。其中伴有休克2例,腹部损伤3例,尿道损伤4例,脊柱损伤5例,骶神经损伤1例,胫骨骨折2例。结果:建立导航系统耗时13~30 min(平均18.50±6.20 min),每枚螺钉置入耗时15~25 min(平均17.50±7.20 min),置入每枚螺钉出血量约20 m L。所有患者螺钉置入位置均较满意,无穿透椎弓根或椎体骨皮质进入骶孔、骶管和前方的盆腔等现象出现,无伤口感染发生。采用Matta评分标准评价骨折复位情况:优15例,良5例,可2例。采用Majeed评分行功能评价:优13例,良6例,可3例。结论:采用导航下骶髂螺钉固定技术能够有效恢复骨盆后环稳定性,但需要手术者熟练掌握骨盆解剖结构及生物力学特点,有效增加手术准确性,避免副损伤。
- 高嘉锴贾帅军袁志孟国林毕龙段春光程建岗刘建
- 关键词：透视导航经皮内固定骶骨螺钉
- 葡萄胎和绒毛膜癌组织中葡萄糖调节蛋白94的表达及意义被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein,GRP94)在葡萄胎和绒毛膜癌组织中的表达及意义。方法:采用DA-KO EnVision免疫组织化学染色法对39例葡萄胎及20例绒毛膜癌组织中的GRP94进行染色,镜下观察GRP94在葡萄胎和绒毛膜癌组织中的特点,用图像分析软件对其积分光密度(IOD)进行分析。结果:39例葡萄胎组织中34例(87.2%)滋养层细胞胞质有GRP94表达,且合体滋养层细胞胞质比细胞滋养层细胞胞质表达强,P=0.000。在20例绒毛膜癌组织中16例(80%)癌细胞胞质有GRP94表达,同时也发现GRP94在合体滋养层细胞胞质比细胞滋养层细胞胞质表达强,P=0.017,且癌细胞胞质比癌旁平滑肌细胞胞质的表达强,P=0.000。在葡萄胎和绒毛膜癌滋养层细胞胞质中GRP94的表达随分化程度降低而升高,P=0.04;其中,在细胞滋养层细胞胞质中GRP94的表达也是随分化程度降低而升高,P=0.005。而在合体滋养层细胞胞质中发现GRP94的表达与分化程度不相关,P>0.05。结论:GRP94的表达强度与滋养细胞肿瘤的分化程度有关。
- 王艳霞李志超刘彦仿段春光王常建
- 关键词：膜蛋白质类热休克蛋白质70
- 新型复合多层组织工程支架体外细胞立体繁育系统研究被引量：1
- 2017年
- 目的设计一种新型多层复合支架细胞立体繁育体系对关节骨-软骨全层损伤进行修复,以期为修复骨-软骨全层缺损提供一种新的方法。方法创新设计一种模拟生理状态下骨-软骨全层结构的新型多层复合支架,由三部分构成:软骨层、骨骼层和钙化层,其中软骨层由改进的温度梯度热诱导相分离技术(TIPS)制成,骨骼层和钙化层由3D打印技术制成。另制作不含钙化层的支架为对照。经过冻干和消毒处理后,在支架上接种细胞,并通过电子显微镜、免疫荧光染色和显微CT观察细胞在支架上的生长情况,评估支架的生物相容性。结果软骨层支架的表面及内部结构规则,骨支架包含十字交叉结构,钙化层结构致密。含钙化层支架的最大抗张强度是不含钙化层支架的1.9倍,最大剪切强度是不含钙化层支架的2.1倍。两组的最大抗张强度与最大剪切强度比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。含钙化层支架的细胞粘附率和细胞增殖率与不含钙化层支架比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新型复合多层组织工程支架结构规则,具有较高的生物力学性能和良好的生物相容性,可以作为一种修复关节全层损伤的潜在新方法。
- 李征宇姬钢严少荣仉培武贾帅军郭健段春光董鑫
- 关键词：3D打印生物支架
- 抗人IgG单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的:制备高效价的抗人IgG单克隆抗体(mAb),并用于肾脏免疫性疾病的免疫荧光诊断。方法:以人IgG全长分子免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合,经筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗IgGmAb的杂交瘤细胞株。用ELISA及Westernblot鉴定mAb的特性(效价、Ig亚类、特异性及相对亲和力)。以纯化的mAb建立免疫荧光染色法,并用于肾小球肾炎的诊断。结果:筛选到1株可稳定分泌抗人IgGmAb的细胞株,腹水效价为1×10-6,Ig亚类为IgG2a(κ),相对亲和力达到1×10-5,Westernblot显示在相对分子质量(Mr)为53×103处出现特异性的条带,说明mAb能与IgG的γ链特异性结合。免疫荧光染色的结果显示,IgG分子在肾小球肾炎的活检组织中表达。结论:获得1株能特异性识别人IgG的mAb,可用于肾脏免疫性疾病的病理诊断。
- 段春光杨守京余璐吴艺舟刘彦仿
- 关键词：IGG单克隆抗体肾小球肾炎
- 内皮祖细胞参与大鼠脉络膜新生血管生成
- 杨秀梅王雨生屈晓杰段春光徐建锋
- 关键词：内皮祖细胞脉络膜新生血管
- 双基因修饰促进组织工程化人工骨血管化的研究
- 大段骨缺损的修复是临床面临的一大难题,目前尚未得到很好地解决。近年来组织工程的发展有望成为治疗大段骨缺损的新方法,但组织工程化的人工骨用于大段骨缺损的治疗时有一个关键性的问题必需克服,即人工骨血管化的问题。因为是否血管化...
- 段春光
- 关键词：骨组织工程ANG-1基因治疗快速成型技术
- 文献传递
- 腺病毒介导人VEGF165和ANG-1双基因转染1大鼠BMSCs及对其增殖的影响
- 目的:探讨携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和血管生成素—1(ANG—1)双基因的腺病毒表达载体pAd—VIA转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外表达及对BMSCs增殖的影响。方法将本室构建的编码人...
- 张金康孟国林刘建胡蕴玉毕龙袁志段春光李丹刘民白峰黄鑫禚文昆马煜
- 关键词：血管生成素-1骨髓基质干细胞增殖
- 文献传递
