黄庆
- 作品数:12 被引量:82H指数:4
- 供职机构:四川大学更多>>
- 发文基金:“九五”国家科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程文学文化科学更多>>
- 枯草杆菌DC-2纳豆激酶基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达被引量:39
- 2002年
- 纳豆激酶是一种纤维蛋白溶解酶 ,有望开发成为新型的溶栓药物 .从中国豆豉中分离的具有较强纤溶活性的枯草杆菌DC 2中提取总DNA ,根据纳豆激酶 (NK)基因序列设计引物 ,用PCR法扩增NK基因 .序列分析表明 ,NK基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献报道的序列分别有 93 4 %和 94 5 %同源性 .将NK基因插入载体pGEX 4T1构建表达质粒pGEX NK ,转化大肠杆菌JM10 9后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,发现大量NK融合蛋白表达 ,并形成包涵体 .SDS PAGE分析表明 ,NK融合蛋白作为包涵体的分子量为 5 3kD .凝胶自动扫描结果显示 ,NK融合蛋白约占菌体可溶性蛋白的 2 6 % .
- 彭勇黄庆张义正
- 关键词:纳豆激酶基因融合蛋白基因克隆大肠杆菌
- 国家文化软实力与文化产业民族化发展
- 2010年5月6日,中国社科院在北京发布《文化蓝皮书:2010年中国文化产业发展报告》。报告数据显示,2009年我国文化产业国内外市场规模大约为8000亿元人民币。而2004-2005年文化产业增加值的年均增速为22%,...
- 黄庆
- 关键词:文化产业软实力
- 大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒载体pSUGV4的构建被引量:23
- 2001年
- 作者用DNA重组技术,构建了大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒载体pSUGV4,它是以大肠杆菌(Escherichia coli)质粒载体pUC18为骨架,与来自穿梭质粒表达载体pREP9含有革兰氏阳性菌复制起点(ori+)和卡那霉素抗性(kanr)基因片段重组而成.上述穿梭质粒载体可用于在大肠杆菌(E.coli)和枯草杆菌(Bacillus subtilis)中进行基因克隆工作.
- 刘成君黄庆赵莲张义正
- 关键词:DNA重组技术卡那霉素抗性基因大肠杆菌枯草杆菌基因克隆
- 脱毛蛋白酶、其制造方法、使用方法和产生此蛋白酶的微生物
- 本发明涉及一种来源于短小芽孢杆菌菌株(Bacillus pumilus)CGMCC NO.0518的蛋白酶。该酶能水解蛋白质和肽;在50℃下,在pH 9.6时的酶活最高;在50℃下,pH 6-11范围内酶活力稳定;最适反...
- 张义正刘德明李珉刘彦程昌凤黄庆
- 文献传递
- 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)脱毛蛋白酶基因的克隆与序列分析被引量:12
- 2004年
- 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以及对该序列的同源性分析后,设计出相应引物,用PCR方法扩增了该菌株的碱性蛋白酶基因AP。测序结果表明,该克隆基因全长1588bp,有一个全长1149bp的编码区序列,推测蛋白质序列长383个氨基酸残基,成熟肽分子量为27.8kD。推测的成熟蛋白酶N′-末端具有与DHAPN′-末端完全匹配的序列,说明克隆到的基因为脱毛蛋白酶基因。同源性分析表明,该基因序列与已报道的其他碱性蛋白酶基因有较高的同源性。
- 黄庆潘皎彭勇李昕张义正
- 关键词:短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因PCR制革业脱毛工艺
- 虚无“镜像”中的“他者” ——拉康结构精神分析学的“主体”思想述评
- 拉康在20世纪的精神分析学领域有着举足轻重的地位,他从结构主义的视角来关注主体的命运,以“重返弗洛伊德”为旗帜对古典精神分析学进行了重构。在后现代语境中诸多对主体的消解理论中,拉康结构精神分析学的“主体”思想却显的卓尔不...
- 黄庆
- 关键词:镜像阶段他者
- 文献传递
- 短小芽孢杆菌(Bacillus beives)转化系统的建立
- 黄庆
- 关键词:短小芽孢杆菌穿梭载体原生质体转化枯草杆菌基因启动子
- 脱毛蛋白酶的纯化及其基因的克隆与表达研究
- 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-42-C-31是一株从成都市生活垃圾中分离,经过多次反复诱变后得到的碱性蛋白酶产生菌.摇瓶和100L小型发酵实验结果表明,其发酵液中含有的碱性蛋白酶具有很好的脱毛效果...
- 黄庆
- 关键词:短小芽孢杆菌碱性蛋白酶纯化基因克隆基因表达
- 制革脱毛酶的纯化及其基因的克隆与序列分析
- 利用酪蛋白平板筛选、蛋白酶活性测定、脱毛试验和SDS-PAGE分析相结合的方法,成功地从自然界中筛选到1株蛋白酶活性较高、具有良好脱毛效果且胶原水解活性很低、在SDS-PAGE分析时只出现一条碱性蛋白酶带的细菌菌株
- 黄庆彭勇张义正
- 关键词:短小芽孢杆菌脱毛碱性蛋白酶基因克隆
- 文献传递
- 纳豆杆菌纳豆激酶成熟肽基因的克隆与同源性分析被引量:9
- 2002年
- 纳豆杆菌 (Bacillusnatto)是从日本传统食品纳豆中筛选出来的 ,它具有较强的溶栓作用 .根据已发表的纳豆激酶基因序列设计一对引物 ,利用聚合酶链式反应 (PCR) ,从纳豆杆菌的基因组DNA中扩增和克隆到纳豆激酶基因 .序列分析表明 ,该纳豆激酶基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献已报道的序列分别有 93.4 %和 94 .5 %的同源性 ,显示了极高的同源性 .但该基因与该室克隆的豆豉溶栓酶基因的同源性仅为 80 .1%,这表明纳豆激酶与豆豉溶栓酶确实不是同一种酶 .
- 彭勇黄庆张义正
- 关键词:纳豆激酶基因克隆同源性分析