黄晓斌
- 作品数:14 被引量:3H指数:1
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- 相关领域:医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 破骨细胞钠氢转运蛋白关键位点研究
- 2012年
- 目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2,对其关键氨基酸保守位点进行突变分析,鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能。方法采用突变试剂盒依次把此蛋白的D278和D279 2个位点的天冬氨酸中1个氨基酸突变成半胱氨酸,得到2个不同位点突变的定点突变体;构建酵母双基因表达载体,通过电穿孔的方式转入到酵母菌株中;Western印迹检测2个定点突变基因在酵母菌株的表达;通过NaCl选择压力显示2个突变体在高盐环境中的相互作用,观察菌株的抗盐生长表型。结果成功获得适合转化酵母的多个载体;在固体和液体培养基中,经半乳糖诱导后,各个载体均可使酵母异源表达钠氢转运蛋白2;生长曲线显示2个突变体可相互作用,部分恢复酵母菌株的抗盐能力。结论钠氢转运蛋白2通过关键位点D278和D279 2,以形成二聚体的方式在细胞中发挥着钠离子转运功能。
- 黄晓斌仲蕾蕾
- 关键词:破骨细胞酿酒酵母
- 一种抑制乳腺癌增殖的化合物及其应用
- 本发明公开了一种抑制乳腺癌增殖的化合物,其名称为6-(4-amino-1-tert-butyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl)-3-chloro-5-hydroxycycl ohexa...
- 滕勇梁桂兆黄晓斌吕凤林刘万钱余乐赵化侃陈晨
- 文献传递
- 一种具有抗乳腺癌活性的化合物及其应用
- 本发明公开了一种具有抗乳腺癌活性的化合物,其名称为methyl2-(4-fluoro-2-hydroxybenzamido)benzoate,结构式如I。本化合物是小分子化学物库经体外培养的肿瘤细胞中筛选得到,并进一步用...
- 滕勇梁桂兆吕凤林刘万钱黄晓斌赵化侃陈晨
- 文献传递
- 电视机塑料机箱注射模具CAD浇注系统、冷却系统设计及数据库的研究
- 黄晓斌
- 一种抗黑色素瘤的化合物及其应用
- 本发明公开了一种抗黑色素瘤的化合物,其名称为N-(3-(5-(2-amino-5-hydroxypyrimidin-4-yl)-2-tert-butylthiazol-4-yl)-2-fluoro-5-hydroxyph...
- 滕勇梁桂兆黄晓斌赵化侃
- 文献传递
- 在酵母中异源表达人破骨细胞钠氢转运蛋白
- 2012年
- 目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2(HsNHA2),鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能,并对其在细胞中的表达进行初步定位分析。方法采用高保真PCR试剂盒扩增出HsNHA2;构建酵母表达载体,通过电穿孔的方式转入到酿酒酵母菌株中;Western印迹检测其在酵母菌株的表达;通过NaCl选择压力观察菌株在高盐环境中的生长表型,并用根皮素抑制HsNHA2观察其抗盐功能;最后用细胞原位荧光染色确定HsNHA2在细胞中的表达位置。结果 Western印迹证实HsNHA2在酵母菌株中正常表达;生长曲线显示HsNHA2可使菌株在高盐环境中生长,根皮素抑制HsNHA2表达后菌株不能在0.2mol/L NaCl培养基中生长;免疫荧光染色初步证明HsNHA2表达在细胞膜上。结论 HsNHA2作为盐离子载体在酵母细胞中主要表达在细胞膜上行使转运Na+的功能,以维持细胞正常生长。
- 黄晓斌仲蕾蕾
- 关键词:破骨细胞酿酒酵母
- 破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达
- 2012年
- 目的:把RAW264.7和人外周血CD14+诱导成破骨样细胞,检测破骨细胞在成熟过程中钠氢转运蛋白2(Na+-H+An-tiporter 2,NHA2)的转录表达情况,并定位其表达位置。方法:细胞因子RANKL、M-CSF在体外诱导RAW264.7和人外周血CD14+细胞发育成破骨样细胞;RT-PCR检测NHA2在诱导过程中转录水平上所发生的变化;Western blot检测诱导前后此蛋白表达情况;细胞原位荧光染色对其表达进行细胞精确定位。结果:RAW264.7和人外周血CD14+细胞被RANKL、M-CSF诱导成破骨样细胞;RT-PCR结果显示NHA2随着破骨细胞的分化成熟转录水平不断加强;Western blot结果显示此蛋白只表达于成熟的破骨细胞中;细胞原位荧光染色结果显示这个蛋白主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中。结论:NHA2作为盐离子载体主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中,通过控制线粒体盐离子的代谢平衡来影响破骨细胞的发育分化。
- 黄晓斌仲蕾蕾
- 关键词:破骨细胞线粒体
- 一种抗前列腺癌转移的化合物及其应用
- 本发明公开了一种抗前列腺癌转移的化合物,其名称为N-(4-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-3-methoxy-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-2-fluoro-5-hydro xyph...
- 滕勇梁桂兆吕凤林刘万钱黄晓斌余乐陈晨
- 文献传递
- 番茄萜类生物合成途径研究进展
- 2013年
- 番茄中的萜类代谢既对植株本身生长产生影响,又对番茄果实的品质和颜色有着巨大的作用。番茄中大部分萜类化合物均属于类胡萝卜素类,都是通过萜类化合物通路合成的包括3个乙酰辅酶A分子缩合成3.甲基-3,5-二甲基戊酸(MVA),MVA在酶的作用下磷酸化形成焦磷酸酯,脱羧后形成异戊二烯焦磷酸(IPP);IPP在IPP异构酶(IPPI)的作用下异构化生成甲叉双丙烯焦磷酸(DMAPP),栊牛儿基栊牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)催化DMAPP与3个IPP分子缩合生成栊牛儿基栊牛儿基焦磷酸(GGPP)。2个GGPP分子在八氢番茄红素合成酶(PSY)的催化下聚合成八氢番茄红素(40碳);八氢番茄红素脱氢酶(PDS)催化八氢番茄红素成ζ-胡萝卜素,ζ-胡萝卜素在ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)的作用下生成番茄红素;在番茄红素β环化酶(LCYb)和ε环化酶(LCYe)的作用下进-步发生环化反应,分别合成仅胡萝卜素和β胡萝卜素;P450类胡萝卜素对此继续作用,通过2步羟化反应生成叶黄素。就番茄中的萜类代谢途径的关键酶基因进行了详细阐述,并对其最新研究进展进行了概括,同时展望了其发展前景。
- 黄晓斌
- 关键词:番茄
- 钠氢转运蛋白2敲出小鼠破骨细胞分化研究
- 2012年
- 目的建立NHA2基因敲出小鼠模型,观察NHA2-/-小鼠骨髓细胞分化为破骨细胞的能力及生长表型变化。方法首先用NHA2+/-杂合子小鼠繁殖得到NHA2-/-纯合子小鼠;以小鼠尾巴为材料做普通PCR鉴定其基因型;用RT-PCR检测基因敲出小鼠NHA2转录情况;从小鼠中取出骨髓进行破骨细胞诱导,观察其分化能力。结果 NHA2-/-小鼠骨髓细胞体外诱导成成熟破骨细胞能力减弱;但小鼠生长表型无明显变化。结论 NHA2作为盐离子载体在体外对破骨细胞的成熟分化有一定影响,在小鼠体内可能与其它离子载体共同调节盐平衡系统。
- 黄晓斌仲蕾蕾
- 关键词:破骨细胞逆转录PCR