黄鹰
- 作品数：34 被引量：42H指数：3
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>
- 粟酒裂殖酵母tRNA前体3′末端加工酶Trz1p功能的研究
- 2009年
- [目的]研究粟酒裂殖酵母tRNA前体3′末端加工酶Trz1p在体内的功能,为以后进一步探索Trz1p的功能奠定基础。[方法]构建Trz1+的表达载体pREP82x-trz1-5 flag,通过醋酸锂转化法将pREP82x-trz1-5 flag转入yYH1菌株和Trz1+的缺失菌株ySS0319中,并进行随机孢子分析。[结果]Trz1p C-端添加5FLAG仍能促进tRNA前体3′末端的加工成熟,但Trz1-5flag不能救活Trz1+的缺失菌株。[结论]粟酒裂殖酵母Trz1p具有tRNA前体3′末端加工功能。
- 苏文陈赵振冯振华黄鹰
- 关键词：粟酒裂殖酵母
- Loss of ppr3,ppr4,ppr6 or ppr10 perturbs iron homeostasis and leads to apoptotic cell death in Schizosaccharomyces pombe
- 苏杨杨艳梅黄鹰
- 裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)PPR蛋白Ppr10和Ppr11参与细胞色素c氧化酶(复合体Ⅳ)亚基的翻译
- 闫建华汪一荣王平张清珍马旭亭苏敏慧黄鹰
- 粟酒裂殖酵母Cyc2定位及功能的研究
- 2020年
- 芽殖酵母中CYC2蛋白与Cyt c的装配有关,对线粒体功能的发挥十分重要.但该蛋白在粟酒裂殖酵母中的同源蛋白Cyc2的功能还未可知,本文研究了粟酒裂殖酵母中Cyc2的定位及其对线粒体功能的影响.构建Δcyc2菌株后观察其在甘油培养基上的表型,并构建回补菌株验证表型,结果发现Δcyc2在甘油板上表现出了生长缺陷;通过检测Δcyc2菌株内由mtDNA编码的呼吸链蛋白的表达量,结果发现Cyc2的缺失并不会影响呼吸链蛋白的表达;利用生物信息学分析Cyc2序列,发现它的N端含有一段线粒体定位序列(MTS)且该蛋白没有跨膜区域,为确定该蛋白在细胞中的具体定位,分别构建Cyc-GFP和Tom20-Flag/Cyc2-Myc菌株,通过荧光观察及生化方法确定该蛋白为线粒体内膜外周蛋白.综上所述,粟酒裂殖酵母Cyc2为线粒体内膜外周蛋白,不会影响线粒体呼吸链蛋白的表达,可能通过其他途径参与线粒体功能的发挥.
- 杨贵红黄鹰
- 关键词：粟酒裂殖酵母线粒体
- A Survey of green plant tRNA3'-end processing enzyme tRNAase Zs,homologs of the candidate prostate cancer susceptibility protein ELAC2
- Background:tRNase Z removes the 3’-trailer sequences from precursor tRNAs,which is an essential step preceding...
- 黄鹰
- 关键词：TRNABIOINFORMATICS
- 文献传递
- 粟酒裂殖酵母Atp25蛋白定位和功能研究
- 2021年
- 通过荧光显微镜观察、线粒体提取、基因敲除和免疫印迹等技术,研究粟酒裂殖酵母Atp25蛋白定位和Atp25蛋白缺失对线粒体功能的影响.Atp25是核基因组编码蛋白质,生物信息学预测和荧光显微镜观察结果显示Atp25蛋白定位在线粒体中,免疫印迹技术进一步验证了Atp25蛋白的定位.表型研究结果显示,Δatp25菌株存在生长及呼吸缺陷.Δatp25菌株中线粒体呼吸链复合体亚基蛋白(Cox1、Cox2、Cox3、Cob1、Atp6)水平显著降低.实时荧光定量PCR结果表明,Δatp25菌株中这些复合体亚基的mRNA水平没有变化.
- 张云黄鹰
- 关键词：线粒体粟酒裂殖酵母
- 抗Bt(Cry1B)毒素单链抗体在sf9昆虫细胞中的表达及活性测定被引量：1
- 2013年
- 通过构建pFastBacTM HT-A-scFv重组质粒,并将重组质粒化转DH10BacTM Escherichia coli感受态细胞,进行蓝白斑筛选,获得阳性克隆.PCR和基因测序检测证实挑取的白斑阳性单克隆存在完整、正确的单链抗体基因.提取阳性克隆中的重组杆状病毒穿梭载体（Bacmid-scFv）侵染sf9昆虫细胞,细胞发生明显病变特征.通过SDS-PAGE、Western blotting和间接竞争性ELISA等方法检测,发现单链抗体在sf9昆虫细胞中表达成功,测得纯化后蛋白浓度为103.000 0 μg/ml,Cry1B毒素对单链抗体的抑制中浓度（IC50）为1.010 0 μg/ml,最低检测线IC10为0.011 3μg/ml,线性检测范围为0.500 0～10.000 0 μg/ml.可溶性scFv对抗原类似物无交叉反应.
- 徐重新张霄张存政刘媛谢雅晶黄鹰刘贤金
- 关键词：单链抗体真核表达系统酶联免疫分析
- 亚致死剂量二嗪农对锦鲫的毒性效应及鱼体富集研究被引量：2
- 2009年
- 采用半静态法测定了二嗪农对锦鲫的急性毒性,并以AChE活性为毒性指标,研究了亚致死作用剂量(96h-LC50的1/5、1/10、1/20、1/40)下持续暴露30 d和在清水中恢复30 d时二嗪农对锦鲫的慢性毒性效应,以及锦鲫不同组织对二嗪农的富集作用,为评价二嗪农环境生态风险提供依据。结果表明:二嗪农对锦鲫的96h-LC50为11.04 mg/L,乙酰胆碱酯酶活性的抑制率随剂量的增加而增大,最高抑制率可达91%;酶活恢复过程缓慢,最高恢复率仅为21.6%;组织中的富集量大小依次为肝>肉,恢复30d后各组织仍有二嗪农残留且富集大小顺序保持不变。
- 侯方浩余向阳赵于丁刘贤进黄鹰
- 关键词：毒性效应乙酰胆碱酯酶生物富集
- 粟酒裂殖酵母蛋白质细胞定位载体的构建
- 2010年
- [目的]构建用于研究粟酒裂殖酵母蛋白质细胞定位的载体。[方法]将gfp+和nmt1+启动子基因克隆到pJK148质粒中,构建含有GFP的表达载体,并利用野生型trz1+检测荧光表达效果。[结果]nmt1+启动子与trz1+的起始密码子相距45个碱基时,无荧光信号。当nmt1+启动子与trz1+的起始密码子相距6个碱基时,荧光信号很强。[结论]可以利用pYJ4研究粟酒裂殖酵母蛋白质的细胞定位。
- 杨景于莹莹黄鹰
- 关键词：粟酒裂殖酵母GFP
- 粟酒裂殖酵母中Shy1定位及功能的研究
- 2016年
- 旨在揭示芽殖酵母线粒体蛋白SHY1(YGR112W)在粟酒裂殖酵母中同源蛋白Shy1的功能。借助基因敲除方法获得shy1基因缺失菌株获Δshy1,并观察其在以甘油为唯一碳源的非发酵培养基上的生长表型;生物信息学分析显示粟酒裂殖酵母Shy1在N端含有大概30个氨基酸的线粒体定位序列(MTS),为进一步确定Shy1蛋白的定位,借助nmt1启动子调控下的Shy1蛋白C端GFP荧光标记,观察GFP绿色荧光位置。最后利用Western blotting检测shy1的缺失对线粒体蛋白的影响。研究结果表明,shy1基因缺失菌株在以甘油为唯一碳源的非发酵培养基上表现出生长缺陷,是线粒体呼吸缺陷型菌株;当GFP标记于nmt1启动子调控下的Shy1蛋白C端时,绿色荧光观察确定Shy1蛋白定位在线粒体;Western blotting检测结果显示shy1缺失导致线粒体相关蛋白的表达量明显下降;结果表明,粟酒裂殖酵母Shy1定位于线粒体且是线粒体呼吸链正常发挥功能所必须的。
- 张清珍黄鹰
- 关键词：线粒体粟酒裂殖酵母
