王鸿宾
- 作品数:7 被引量:27H指数:3
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划中国科学院知识创新工程重要方向项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 不同血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及VP60基因的克隆分析和RT-PCR检测方法的建立
- 本研究从临床病料中分离鉴定出3株不同血凝性的兔出血症病毒(RHDV),命名为whn-1,whn-2,whn-3,其中whn-2株血凝效价为1:640,whn-1,3的血凝效价仅为1:5,1:10。采用RT-PCR方法将w...
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒血凝性衣壳蛋白
- 文献传递
- 黑曲霉变异株A-828酸性植酸酶的生物合成和性质的研究被引量:2
- 2009年
- 经钴60及原生质体紫外联合诱变后,筛选出一株高产植酸酶的菌株(A-828),酶活力达到66,000U/mL,为出发株的17倍。通过滤膜超滤浓缩和Bio-gel P-150层析纯化,纯化倍数为11.2倍,活力回收率为37.7%。SDS-PAGE分析表明,变异株植酸酶的分子量约为66kDa,酶学实验结果表明:该酶的最适pH有两个,分别为2.5和5.5,但在2.5时所表现的活力是5.5时的5倍,酶的最适温度为55℃。在20-60℃保温20min,活力不改变。2mmol/L的Fe2+、Cu2+、Cr3+抑制了酶的活性,但同样浓度Ca2+、Mn2+、EDTA、DTT对酶的活力影响不显著。
- 曾继蛟李英伦王鸿宾石峰岳丽丽李运敏刘志刚矫庆华
- 关键词:纯化原生质体PHYB
- 一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析被引量:10
- 2006年
- 从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒(RHDV),命名为Yaan-1。HA试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性;但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规RHDV高免血清形成清晰的沉淀线;电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。采用RT-PCR方法将Yaan-1株的衣壳蛋白VP60基因进行了克隆测序,序列分析表明VP60基因序列全长1740bp,编码579个氨基酸,测序结果提交GenBank(注册号为DQ069280),并与世界各国的常规RHDV分离株进行比较,结果表明核苷酸同源性为90.0%~98.0%,氨基酸同源性为94.1%~99.0%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区;同时对Yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性RHDV中国分离株,丰富了地方毒株资源,为明确我国地方株的分子流行病学,以及对VP60蛋白分子特征研究提供了新材料。
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰周万蓉王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因
- 猫干扰素FeIFN-ω和FeIFN-α的克隆、表达和体外生物学活性研究
- 猫干扰素omega(FeIFN-ω)属Ⅰ型干扰素,具有抗病毒,抗增殖和免疫调节功能。干扰素的生物学活性具有种属限制性,但也有报道,人IFN-ω对其他种属也有作用,而且较之IFN-α具有更为广谱的生物学活性和更高的抗病毒能...
- 王鸿宾
- 关键词:免疫调节生物学活性
- 文献传递
- 兔出血症病毒Yaan株衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析被引量:12
- 2005年
- 采用RT-PCR方法扩增兔出血症病毒(RHDV)Yaan株衣壳蛋白VP60基因,将扩增片段克隆到pMD 18-T载体上,经酶切及PCR鉴定后测序.结果显示,VP60基因全长1 740 bp,编码579个氨基酸.将Yaan株与其他RHDV分离株进行比较,结果显示,核苷酸同源性为90.5%~97.5%,氨基酸同源性为94.3%~99.5%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区,表明毒株具有高度保守性;同时对Yaan株与国外标准株AST/89的VP60蛋白氨基酸变异及其亲水性、柔性区、抗原区和表面结构进行了比较分析.
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因
- 新型猫源干扰素FelFN-ω与干扰素FelFN-α的表达及抗病毒活性比较
- ω型干扰素(IFN-ω)与α型干扰素(IFN-α)同属于Ⅰ型干扰素,都具有抗病毒,抗增殖和免疫调节的功能,但它们之间的活性却存在较大差异。通过PCR扩增猫ω型干扰素基因(feIFN-ω),根据GeneBank公布的猫α型...
- 王鸿宾贾晓娟杨利敏孙蕾王红宁刘文军2
- 关键词:抗病毒活性
- 文献传递
- 新型猫源干扰素FeIFN-ω与干扰素FeIFN-α的表达及抗病毒活性比较被引量:4
- 2008年
- ω型干扰素(IFN-ω)与α型干扰素(IFN-α)同属于Ⅰ型干扰素,都具有抗病毒,抗增殖和免疫调节的功能,但它们之间的活性却存在较大差异。通过PCR扩增猫ω型干扰素基因(FeIFN-ω),根据GenBank公布的猫α型干扰素基因序列,合成猫α型干扰素基因(FeIFN-α)。分别构建原核表达载体pET-His/FeIFN-α和pET-His/FeIFN-ω,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化,复性后蛋白用细胞病变抑制法进行抗病毒活性测定。结果显示,重组猫ω型干扰素(FeIFN-ω)抗病毒活性明显高于重组猫α型干扰素(FeIFN-α),尤其对H9N2亚型禽流感病毒(AIV),FeIFN-ω的活性是FeIFN-α的160倍,对犬瘟热病毒(CDV),FeIFN-ω的活性是FeIFN-α的4倍,而日本同类产品Intercat对CDV和AIV均未表现活性。以上研究为以ω型干扰素为基础的抗病毒药物应用奠定了重要的理论基础。
- 王鸿宾贾晓娟杨利敏孙蕾王红宁刘文军
- 关键词:抗病毒活性