石磊
- 作品数：11 被引量：52H指数：4
- 供职机构：广东药学院药科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于特异性结合多肽ZS-1的肺癌新肿瘤标志物的筛选被引量：3
- 2010年
- 目的:利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS-1(EHMALTYPFRPP)从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,并进行初步确认,为肺癌的临床早期诊断和靶向治疗奠定基础。方法:本实验以ZS-1为探针,通过将偶联生物素的多肽ZS-1固化在亲和素处理的酶标板,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过三轮减性筛选后,挑取与ZS-1特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析,随后采用组织芯片技术对相关生物大分子进行了检测。结果:通过生物信息学分析首次发现与ZS-1结合的肺癌细胞膜受体蛋白为KIAA1199,随后以KIAA199抗体检测人肺癌组织芯片证实,KIAA1199的阳性检出率为32.8%。结论:从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选出潜在的肺癌肿瘤标志物KIAA1199,为肺癌的早期诊治奠定基础。
- 王素军潘雪刁臧林泉王桂香石磊谢海棠
- 关键词：CDNA文库肺癌肿瘤标志物
- 利用肺癌特异性结合多肽ZS-6筛选肺癌相关标志物被引量：6
- 2010年
- 目的利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS-6从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,为肺癌的临床早期诊断和靶向治疗奠定基础。方法以生物素标记的十二肽ZS-6为探针,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过四轮减性筛选后,挑取与ZS-6特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析。结果筛选出18个与ZS-6特异性结合的噬菌体克隆,测序结果显示其中1个为未知功能的新基因,其余的均已确定为肿瘤相关基因。结论从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选出潜在的肺癌肿瘤标志物,为肺癌的早期诊治奠定基础。
- 冯文彬潘雪刁周捷石磊罗军强李询臧林泉
- 关键词：CDNA文库肺癌肿瘤标志物
- 利用RNAi沉默KIAA0280后对缺氧诱导大鼠神经元凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的利用RNA干扰（RNAi）技术，观察脑缺血相关新蛋白KIAA0280被特异性沉默后对正常神经元和缺氧诱导神经元凋亡的影响。方法取新生大鼠培养至5-7d的神经元，经由密闭容器引起缺氧诱导神经元凋亡模型。采用RNAi技术封闭KIAA0280的表达，观察该基因被封闭后对正常神经元的生长以及缺氧诱导神经元凋亡的作用和影响。结果脂质体转染KIAA0280基因特异性siRNA 12、24h后对正常细胞生长具有一定的影响；在此基础上缺氧4、8h，发现RNAi组的神经元对缺氧诱导的神经元凋亡比对照组对缺氧更加敏感，更易受损伤。结论KIAA0280对正常神经元具有一定的作用，并且对缺氧诱导凋亡神经元具有一定的保护作用。
- 黄海潮潘雪刁金桂芳巫玮潘琴石磊臧林泉
- 关键词：RNAI缺氧神经元凋亡
- 利用体内噬菌体展示技术筛选及鉴定肺癌特异性结合肽被引量：2
- 2010年
- 目的利用体内噬菌体展示技术筛选并鉴定与肺癌特异性结合的多肽。方法用肺癌细胞A549接种裸鼠复制荷瘤动物模型,将随机肽库尾静脉注入裸鼠体内,循环15 min后取肿瘤组织中结合的噬菌体,如此进行3轮体内筛选后挑取噬菌体克隆,ELISA初步鉴定噬菌体克隆对肺癌细胞的亲和力、特异性。将阳性噬菌体克隆扩增、测序获得外源多肽氨基酸序列,化学方法合成多肽,鉴定多肽对肺癌细胞和组织的亲和力、特异性。结果ELISA结果显示,随机挑选的20个噬菌体单克隆中,1个对A549具有很强亲和力。测序获得多肽,命名为zp2。化学合成多肽zp2。竞争抑制、细胞免疫荧光和组织免疫荧光实验结果表明多肽zp2与肺癌细胞A549及肺癌组织特异性结合。结论利用体内噬菌体展示技术筛选出与肺癌细胞A549特异性结合的多肽,为肺癌诊断及治疗药物的研制奠定基础。
- 潘琴石磊潘雪刁冯冰虹巫玮王素军王桂香王来友金桂芳臧林泉
- 关键词：A549噬菌体随机肽库特异性结合肽
- 清胰汤保留灌肠对急性重症胰腺炎患者胃肠动力学变化机制的研究被引量：20
- 2008年
- 【目的】观察清胰汤保留灌肠治疗重症急性胰腺炎(SAP)的临床效果,同时测定血清胃动素(MTL)、胆囊收缩素(CCK)和血管活性肠肽(VIP)的变化,旨在探讨清胰汤保留灌肠治疗SAP的作用机理。【方法】SAP患者36例,随机分成A、B组:A组18例,常规治疗+清胰汤保留灌肠治疗;B组18例,常规治疗;观察患者临床指标变化,动态测定患者血清MTL、CCK、VIP浓度。【结果】A组18例SAP患者症状体征指标变化与B组比较有显著性差异(P<0.01)。A组、B组SAP患者治疗前、后血清MTL、CCK、VIP浓度与正常值相比显著增高(P<0.01),治疗后A、B组患者血清MTL、CCK、VIP浓度变化相比较有显著性差异(P<0.01)。【结论】清胰汤保留灌肠治疗SAP疗效显著,其作用机制可能与调节机体中胃肠激素(胃动素、胆囊收缩素和血管活性肠肽)的水平有关。
- 侯冰宗石磊房思炼李霄凌臧林泉
- 关键词：胆囊收缩素血管活性肠肽
- 肺癌细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的筛选能与肺癌细胞特异性结合的多肽并初步鉴定其亲和力和特异性。方法用人肺癌细胞A549使裸鼠致瘤,尾静脉注射肽库。取荷瘤鼠的肿瘤组织,用体内噬菌体展示技术进行筛选;经过3轮体内筛选,获得在肿瘤组织中富集的噬菌体;利用ELISA和细胞免疫化学DAB染色法初步鉴定各克隆亲和力、特异性;对阳性克隆行DNA测序,利用生物信息学对此多肽进行分析、比对。结果随机挑选的10个单克隆中,8个均对A549细胞具有较高亲和力,其中3号克隆亲和力最高,其可特异性结合肺癌细胞A549和NCI-H1299,且对A549的亲和力强于NCI-H1299。DNA测序结果显示该序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性。结论筛选出了能与肺癌细胞特异性结合的多肽。
- 潘琴石磊潘雪刁巫玮金桂芳臧林泉
- 关键词：肺癌细胞特异性结合肽
- 噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽被引量：7
- 2009年
- 目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为PhageZS6。细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS6对NCI-H1299具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
- 石磊潘雪刁王军业潘琴巫玮金桂芳房思练侯炳忠何兴祥臧林泉
- 关键词：噬菌体肽库多肽肺癌
- 原代神经元及PC12细胞用于药物体外急性毒性评价的实验研究被引量：2
- 2009年
- 【目的】研究原代神经元及PC12细胞用以评价药物或化合物的急性毒性，以判断是否可以替代动物实验，为建立稳定的体外高通量筛选化合物和药物的急性毒性评价体系奠定基础。【方法】原代分离培养大鼠皮质神经元，传代培养大鼠类神经元细胞——PC12细胞，取17种药物和化合物，分别稀释不同浓度，与上述两种细胞分别孵育24h，与空白对照组比较，以MTT法检测药物／化合物对细胞的抑制率，据此量效曲线计算出IC50，与大鼠口服LD50进行相关性分析。【结果】体外神经元的IC50与体内LD50相关性为：R^2=0．7253，PC12细胞毒性检测结果的IC50与动物体内急性毒性LD50相关性为：R^2=0．6441，二者均有明显相关性。【结论】利用体外分离培养的原代神经元以及PC12细胞，在短时间（24h）内可以评价药物或化合物的急性毒性，并可以预测化合物对人及动物的毒性，基本可以替代或减少动物实验。
- 巫玮周捷潘雪刁潘琴石磊臧林泉
- 关键词：细胞毒性免疫神经元PC12细胞
- ^(18)F-FDG PET/CT在评估乳腺癌术后转移灶治疗疗效中的价值被引量：2
- 2008年
- 目的探讨18氟-2-脱氧葡萄糖(18F-FDG)正电子计算机断层显像(PET/CT)显像在评估乳腺癌术后转移灶治疗疗效中的价值。方法选取乳腺癌手术后半年至5年,PET/CT显像诊断有转移灶且经病理证实的病例16例,经3个月至1年的治疗后,再行第2次PET/CT显像,通过2次显像的对比,观察病灶的18F-FDG的摄取变化及形态学的改变情况来评估疗效,并与临床症状的变化进行对照。结果16例病例中,PET/CT显像为疗效好的12例中,临床症状均明显好转;PET/CT显像为疗效不好的3例,临床症状有2例好转,另1例无改善;PET/CT显像病灶增多、无疗效1例,此病例7个月后死亡;PET/CT显像的临床符合率为87.5%(14/16),阳性预测值为100%(12/12),阴性预测值为50%(2/4)。结论18F-FDG PET/CT显像在评估乳腺癌术后转移灶治疗后疗效中具有非常重要的临床价值。
- 肖勇周宁李奕钊郭晓君石磊臧林泉
- 关键词：乳腺癌
- 噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物信息学分析、比对;利用ELISA、细胞免疫化学、组织免疫化学方法测定多肽的亲和力和特异性。结果:经过三轮减性筛选发现,随机挑选的9个单克隆中,其中1个对NCI-H1299和A549均具有较高亲和力,将其命名为ZS-9,测序结果为CAT AAT AAG CAT CTT CCG TCT ACG CAG CCT CTT GCG,根据测序结果推导出ZS-9的氨基酸序列HNKHLPSTQPLA,生物信息学分析表明ZS-9的氨基酸序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,表明我们筛选到一种新的肺癌相关抗原的配体。结论:利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞NCI-H1299和A549具有较高亲和力的多肽ZS-9,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
- 王军业石磊戴淑琴潘琴巫玮臧林泉戎铁华
- 关键词：噬菌体肽库
