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E-64对绵羊卵母细胞成熟过程中CTSB和CTSS基因mRNA表达水平的影响: 2012年; 利用实时定量PCR(qPCR)检测成年绵羊单卵体外成熟过程中空白对照组和E-64添加组0 h(卵泡期)、8 h、16 h、24 h(成熟期)4个时间点组织蛋白酶成员CTSB、CTSS及GAPDH的cDNA水平。结果表明,CTSB及CTSS的mRNA相对水平在成熟过程中呈现上升变化趋势,并且E-64可有效降低CTSB及CTSS的mRNA水平。细胞凋亡基因CTSB及CTSS mRNA的减少,对卵母细胞及胚胎发育质量的提高具有重要意义。; 张艳普孙树春田树军李俊杰胡媛媛温兵强祁昕; 关键词：单卵 IVM

组织蛋白酶对羊卵母细胞发育能力影响的研究进展: 2012年; 组织蛋白酶（cathepsin,CTS）是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,包括组织蛋白酶B（CTSB）、组织蛋白酶S（CTSS）和组织蛋白酶C（CTSC）等,它们是一类主要存在于溶酶体中的细胞内肽键水解酶。对组织蛋白酶的研究可以追溯到上世纪上半叶,CTSC是第一个被纯化的蛋白酶。但之后的几十年相关研究发展缓慢,直至上世纪80年代,组织蛋白酶B、H、L才被鉴定并测序。1990年,人的CTSB的晶体结构被测定^[1],自此有关组织蛋白酶的研究飞速发展、迅猛前进。本文将从组织蛋白酶的性质、合成加工、生理功能。; 祁昕刘彦斌田树军; 关键词：组织蛋白酶 CATHEPSIN 卵母细胞发育卵丘细胞半胱氨酸蛋白酶溶酶体

绵羊CTSB基因克隆及其活性与卵母细胞发育能力相关性研究: 组织蛋白酶B(CTSB)是重要的溶酶体半胱氨酸蛋白酶，在多种生理及病理活动中发挥作用，对动物的卵母细胞成熟及胚胎发育能力有着重要影响。研究绵羊卵母细胞在体外成熟过程中CTSB活性的变化规律及其与卵母细胞发育能力的相关性，...; 祁昕; 关键词：绵羊酶活性组织蛋白酶B 卵母细胞发育能力

便携式CO_2培养箱保存绵羊卵母细胞及胚胎的效果研究: 2013年; 检验LEC960G型便携式CO2培养箱保存绵羊卵母细胞及胚胎的效果。卵母细胞及胚胎始终在标准CO2培养箱中培养作为对照(Ⅰ组),卵母细胞或胚胎在便携式CO2培养箱中分别保存4 h作为试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,比较各组间卵母细胞的成熟效果及胚胎发育能力。结果表明:Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组卵母细胞在成熟率(92.75%、92.37%、92.96%)、卵裂率(91.83%、91.33%、89.80%)、囊胚率(28.39%、33.18%、25.01%)、孵化囊胚率(25.22%、18.33%、18.84%)及囊胚细胞数目(124.00、120.33、119.00)方面均无显著性差异(P>0.05)。LEC960G型便携式CO2培养箱保存绵羊卵母细胞或早期胚胎4 h,并不会降低其后续发育能力。; 祁昕田树军常庆玲蔡文涛李俊杰孙树春; 关键词：卵母细胞胚胎绵羊

西洛酰胺对绵羊卵母细胞核成熟及后期胚胎发育的影响被引量：3: 2012年; 本实验研究不同浓度西洛酰胺(Cilostamide)对绵羊卵母细胞核成熟的抑制效果,并探讨FSH对Cilostamide抑制效果的影响,以及延迟卵母细胞核成熟对随后胚胎发育能力的影响,旨在探索提高绵羊体外胚胎发育能力的新方法。结果表明:5μmol/L的Cilostamide为较合适的添加浓度,使卵母细胞核成熟延迟约4 h;FSH与Cilostamide对抑制核成熟起到协同作用;5μmol/L Cilostamide处理可使绵羊卵母细胞孤雌激活后囊胚率达到40.4%,显著高于对照组29.0%的囊胚率(P<0.05)。; 胡媛媛田树军温兵强孙树春赵驻军祁昕; 关键词：卵母细胞促卵泡素体外成熟绵羊

羔羊卵母细胞组蛋白H4K12乙酰化对其发育能力的影响: 2013年; 为探讨羔羊卵母细胞体外发育能力较低的原因,本实验以4~6周龄道赛特与小尾寒羊杂交羔羊和成年绵羊卵母细胞为实验材料,比较羔羊与成年羊卵母细胞第一极体排出率、孤雌激活后卵裂率、囊胚发育率及生发泡期（GV期）卵母细胞H4K12乙酰化水平的差异。结果表明：羔羊卵母细胞体外成熟后第一极体排出率显著低于成年羊（55.5%vs.70.6%）（P〈0.05）;孤雌激活后卵裂率（61.9%）和囊胚发育率（13.1%）与成年羊（78.2%和35.6%）相比差异显著（P〈0.05）;羔羊GV期卵母细胞H4K12乙酰化水平也显著低于成年羊（P〈0.05）。羔羊GV期卵母细胞H4K12乙酰化水平显著降低,很可能是羔羊卵母细胞体外发育能力降低的重要原因之一。; 李俊杰田树军孙树春金东航祁昕蔡文涛; 关键词：卵母细胞发育能力羔羊

E-64对绵羊卵母细胞成熟过程中CTSB和CTSS基因mRNA表达水平的影响被引量：1: 2012年; 本实验利用qPCR检测成年绵羊单卵体外成熟过程中空白对照组和E-64添加组0(GV)、8、16、24 h(MII)4个时间点CTSB、CTSS及GAPDH的cDNA数量。结果表明:CTSB及CTSS的mR NA相对数量在成熟过程中呈现上升变化趋势,并且E-64可有效降低CTSB及CTSS的mR NA数量。细胞凋亡基因CTSB及CTSSmR NA的减少,对卵母细胞及胚胎发育质量的提高具有重要意义。; 张艳普孙树春田树军李俊杰胡媛媛温兵强祁昕; 关键词：单卵 IVM 绵羊

绵羊单卵反转录平台的优化及应用: 2012年; 为了研究发育生物学中单个卵母细胞基因的表达,优化由单卵得到质量良好cDNA的操作步骤,试验应用试剂盒并增加质控环节,得到优质cDNA,同时将cDNA试用于差异显示PCR(DDRT-PCR)。结果表明:该试验方法得到的cDNA稳定性、重复性、完整性都很可靠。; 张艳普孙树春田树军胡媛媛温兵强祁昕; 关键词：单卵反转录 CDNA

咖啡因和Scriptaid对绵羊核移植重构胚发育的影响被引量：2: 2011年; 为提高绵羊体细胞核移植效率,以绵羊卵丘细胞为核供体,在融合后的核质互作期间加入咖啡因,在激活后对重构胚进行培养的过程中,加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid。结果表明:咖啡因浓度以2.5 mmol/L或5 mmol/L为宜,尽管卵裂率、桑椹胚率以及囊胚发育率与对照组差异不显著(P>0.05),但囊胚细胞数显著高于对照组(P<0.05);以0.2μmol/L Scriptaid处理组囊胚发育率最高,达24.31%,显著高于对照组和0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但与0.4μmol/L Scriptaid处理组相比差异不显著(P>0.05);囊胚细胞总数以0.2μmol/L Scriptaid处理组最高,显著高于0.8μmol/L Scriptaid处理组(P<0.05),但是与对照组和0.4μmol/L Scriptaid处理组差异不显著(P>0.05)。以上结果表明,咖啡因处理对绵羊核移植重构胚的囊胚发育率无显著影响,但可以显著提高囊胚细胞总数;Scriptaid可以显著提高绵羊核移植重构胚的囊胚发育率。; 温兵强李俊杰胡媛媛祁昕张艳普刘志涛田树军孙树春; 关键词：咖啡因核移植绵羊

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祁昕