秦敏
- 作品数：17 被引量：13H指数：3
- 供职机构：成都生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学化学工程更多>>
- 一种破伤风类毒素的制备方法
- 本发明公开了一种破伤风类毒素的制备方法，它包括如下步骤：(1)取破伤风梭状芽孢杆菌培养液，杀菌，离心，澄清过滤，得上清；(2)取上清液，超滤，分次加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为22～26(w/v)，离心，收集沉淀，将沉淀溶...
- 秦敏张华杨国友唐朝晖吴永超顾洁耿其秀
- 文献传递
- 氢氧化铝佐剂氨水法配制工艺优化被引量：2
- 2014年
- 目的:优化氢氧化铝佐剂氨水法配制工艺,提高佐剂质量。方法:优化配制工艺,包括配制过程中增加除菌过滤,提高搅拌转速,恒温等;再将优化前后配制的佐剂进行氨含量、pH、粒径、沉降率、内毒素等检测,根据检测结果进行对比。结果:优化后的氢氧化铝佐剂外观蓝白色悬液,平均粒径分布在275-435nm之间,氨含量检测<1/5000,pH在4.7±0.2范围内,不易发生沉淀,内毒素<5IU/mg铝,且处于无菌保存状态。结论:工艺优化提高了氢氧化铝佐剂质量,减少了批间差异。
- 胡高翔毕跃东吴永超徐恒秦敏
- 关键词：氢氧化铝佐剂无菌
- Triton X-100含量的高效液相色谱检测方法
- 本发明公开了一种Triton？X-100定量检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，步骤如下：(1)制备供试品溶液：取待检样品，制成供试品溶液；(2)制备对照品溶液：取标准品Triton？X-100，溶于水，制成对照品溶液...
- 秦敏杨国友唐浩蔡峰
- 文献传递
- 应用中空纤维膜去除无细胞百日咳料液中的脱毒剂和色素
- 2013年
- 目的应用中空纤维膜洗滤技术去除无细胞百日咳料液中的脱毒剂和色素。方法采用不同浓度的盐溶液作为中空纤维膜洗滤液,通过洗滤过程的水通量衰减程度,洗滤后制品外观和蛋白回收率,原液戊二醛残留量,原液效价和毒力来确定洗滤液。用物理和化学清洗相结合的方式对使用后的膜进行清洗再生,以水通量恢复率对清洗效果进行评估。结果用盐溶液Ⅱ作为洗滤液,在洗滤过程维持跨膜压基本恒定的情况下,中空纤维膜水通量大、且衰减缓慢,洗滤后收集的制品外观呈淡黄色,蛋白颗粒均匀,蛋白回收率高,所制备原液的戊二醛残留量、效价和毒力检定结果均符合《中国药典》三部(2010版)要求。中空纤维膜使用后,用物理和化学清洗相结合的清洗方式使中空纤维膜的水通量恢复率分别达99.06%,98.11%,99.62%。结论中空纤维膜可用于去除无细胞百日咳料液中的脱毒剂和色素。
- 李应伟杨国友胡慧琼黄锴张华秦敏
- 关键词：中空纤维膜无细胞百日咳色素
- 氨水法制备的氢氧化铝佐剂吸附能力检测方法的建立及验证被引量：1
- 2014年
- 目的建立氨水法制备的氢氧化铝佐剂吸附能力的检测方法,并进行验证。方法参照《欧洲药典》中氢氧化铝佐剂吸附能力检测方法的原理,将氨水法制备的氢氧化铝佐剂分别以0.25-1 mg/ml 6个最终铝浓度,吸附0.5-10 mg/ml 7个浓度的牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）溶液,根据吸附效果,筛选最佳吸附铝浓度和适合的BSA溶液浓度,建立氨水法制备的氢氧化铝佐剂吸附能力检测方法,并验证该方法的准确度、重复性和中间精密性。结果在最终铝浓度为0.3 mg/ml时,可完全吸附3个低浓度蛋白,3个高浓度蛋白呈较好的浓度梯度,符合《欧洲药典》要求。经验证,该方法检测氨水法配制的氢氧化铝佐剂的吸附能力准确度、重复性和中间精密性良好。结论建立了氨水法制备的氢氧化铝佐剂吸附能力的检测方法,为氢氧化铝佐剂相关质量标准的建立奠定了基础。
- 张莉刘志刘晓凤唐朝辉杨国友许敬敏秦敏
- 关键词：氢氧化铝佐剂
- 一种白喉类毒素的制备方法
- 本发明公开了一种白喉类毒素的制备方法，它包括如下步骤：(1)取白喉杆菌培养液，加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20～24％(w/v)，离心，去除沉淀，澄清过滤；(2)加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为21～25％(w/v)，离心，...
- 秦敏张飞伟张华唐朝晖吴永超顾洁耿其秀
- 文献传递
- 牛血清在百日咳毒素CHO细胞簇聚试验中的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察不同胎牛血清对百日咳毒素在中华仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cell,CHO）细胞簇聚试验中的影响。方法分别用两个厂家共6批次的牛血清培养CHO细胞,连续传3代后进行细胞簇聚试验,观察添加PT阳性对照、纯化PT、脱毒PT后其细胞的簇聚效果。结果 1、2号牛血清培养的CHO细胞生长缓慢,3-6号牛血清培养的CHO细胞生长正常。质量浓度16 ng/m L的PT阳性对照和纯化PT均未引起1-2号CHO细胞簇聚;3-6号牛血清培养的CHO细胞PT阳性对照判定终点分别为2、1、16、4 ng/m L,其纯化PT判定终点分别为1、0.5、8、2 ng/m L;脱毒PT质量浓度为40μg/m L时,1、2、5号牛血清培养的CHO不簇聚,而3、4、6号牛血清培养的CHO细胞脱毒PT判定终点分别为10、5、20μg/m L。结论 6种牛血清培养的CHO细胞簇聚程度存在差异,其中以4号牛血清培养的CHO细胞对PT阳性对照、纯化PT和脱毒PT最为敏感。需筛选对簇聚试验敏感度高的牛血清用于百日咳毒素CHO细胞簇集试验。
- 刘晓凤邓杰秦敏
- 关键词：胎牛血清
- 无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量检测方法的建立及验证被引量：3
- 2016年
- 目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量,并对该方法进行验证及初步应用。方法 HPLC条件:Agilent SB 300 C18色谱柱(规格:4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:纯化水与甲醇的体积比为20﹕80;检测波长:225 nm;色谱柱温:30℃;流速:0.8 ml/min;进样量:10μl。对方法的系统适应性、专属性、线性、准确性、精密性、耐用性及定量限进行验证,并用建立的方法检测6批无细胞百日咳纯化抗原中的Triton X-100残留量。结果该方法检测6份10μg/ml Triton X-100的理论塔板数在1 550~1 580之间,Triton X-100峰面积和保留时间的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为2.59%和0.04%;12μg/ml的Triton X-100溶液和无细胞百日咳纯化抗原样品中,Triton X-100能与其他物质完全分离;在2~30μg/ml范围内,Triton X-100浓度与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 01);该方法检测不同浓度Triton X-100样品的加标回收率均在98%~102%之间,RSD均不超过2%;同一实验人员在不同工作日和不同检测人员在同一工作日用该方法检测供试品中Triton X-100含量的RSD均小于4%;改变流动相的甲醇比例和柱温后,6次检测值的RSD分别为0.95%和0.51%;定量限可达0.5μg/ml。该方法检测6批无细胞百日咳纯化抗原中的Triton X-100残留量均较低。结论建立的HPLC法系统适应性、专属性、线性、准确性、精密性、耐用性良好,可用于无细胞百日咳纯化抗原中Triton X-100残留量的定量检测。
- 唐浩张飞伟刘晓凤胡慧琼杨国友秦敏
- 关键词：高效液相色谱TRITON
- 吸附无细胞百白破联合疫苗的细菌内毒素检查
- 2014年
- 目的分析吸附无细胞百白破联合疫苗（adsorbed diphtheria-tetanus-acellular pertussis combined vaccine,DTa P）细菌内毒素检查方法的可行性。方法确定供试品最大有效稀释倍数（maximum valid dilution,MVD）,并将两个厂家的鲎试剂（λ=0.25 EU/ml）进行灵敏度复核试验后,按照《中国药典》三部（2010版）附录ⅫE细菌内毒素检查法要求,采用稀释法进行供试品干扰试验,确定无干扰稀释倍数;采用凝胶限量试验对13批DTa P进行细菌内毒素检测,并采用动态显色法定量检测其中6批DTa P细菌内毒素含量。结果供试品MVD为800倍;两个厂家鲎试剂灵敏度均在0.125-0.5（0.5-2λ）范围内,符合《中国药典》三部（2010版）规定的标准。将DTa P稀释400倍可排除干扰。13批DTa P凝胶限量试验结果均〈12 EU/剂,其中6批DTa P动态显色法结果均〈2.5 EU/剂,相同6批疫苗两种检测方法的结果趋势一致。结论凝胶限量试验与动态显色法均可用于DTa P细菌内毒素检查,但凝胶限量试验更经济,操作更简便,适用范围更广。
- 刘晓凤唐朝晖邓杰周晓舟张飞伟秦敏
- 关键词：吸附无细胞百白破联合疫苗内毒素
- 无细胞百日咳脱毒PT抗原超滤工艺研究
- 2013年
- 通过超滤去除无细胞百日咳脱毒PT抗原的色素、脱毒剂等小分子,考察了超滤装置、超滤液类型及其pH值、超滤膜孔径对超滤后制品外观、蛋白回收率的影响。结果表明,使用30kD孔径的膜式超滤器,用pH值为7.8的含0.5mol·L-1 NaCl的PB缓冲溶液对无细胞百日咳脱毒PT抗原进行超滤,能有效去除色素、脱毒剂等小分子,超滤后制品物理外观良好,蛋白回收率接近80%。
- 黄锴胡慧琼杨国友张华唐朝晖梁淑芳秦敏
- 关键词：超滤
