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罗福康: 作品数：26 被引量：122H指数：6; 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选: 2009年; 目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。; 赵振国罗福康安江宏段玉忠孙建国朱波陈正堂; 关键词：AC133 上皮细胞黏附分子流式细胞术

Treg细胞与肿瘤免疫的关系被引量：11: 2016年; 肿瘤免疫逃逸是导致肿瘤发生、进展的核心机制。调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）作为调控机体免疫系统内稳态及人体自身免疫耐受的重机制，也在肿瘤免疫的调控中扮演着重角色，是目前该领域的研究热点。; 李晓英罗福康谢启超; 关键词：调节性T细胞肿瘤免疫免疫调节

趋化因子MIP-3α的克隆与表达被引量：2: 2005年; 目的　克隆人趋化因子MIP 3α基因,表达并初步纯化MIP 3α融合蛋白。方法　从扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增MIP 3α成熟蛋白基因,并在5’和3’分别添加NcoI和EcoRI酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a(+ )载体上,转化E .coli.DH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得MIP 3α天然蛋白表达载体pET3 2a(+ ) /MIP 3α,SDS PAGE分析其表达,Westernblot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP 3α融合蛋白。结果　成功克隆了MIP 3α基因,表达并初步纯化得到MIP 3α融合蛋白。结论　构建的MIP 3α硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达MIP 3α硫氧还蛋白。; 罗福康郑红沈大斌; 关键词：MIP-3Α WESTERN BLOT 蛋白纯化

趋化因子与移植排斥反应被引量：1: 2005年; 趋化因子是由小分子分泌蛋白组成的一个大的细胞因子超家族,近年来,不断有新的趋化因子和受体被发现.趋化因子是能够诱导白细胞做定向运动的细胞因子,在病原体的清除、炎症反应、移植排斥、造血、血管生成、肿瘤发生、HIV感染等过程中也发挥着重要作用.本文概述了与移植排斥相关的趋化因子和受体的研究进展.; 罗福康郑红; 关键词：趋化因子移植排斥反应 HIV感染分泌蛋白肿瘤发生超家族

人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达与初步纯化被引量：1: 2006年; 目的确立人趋化因子SLC在大肠杆菌中的表达条件和初步纯化条件。方法将pET32a(+)/SLC分别转化大肠杆菌AD494(DE3)、BL21trxB(DE3)、BL21trxB(DE3)plusS,选择最佳宿主菌,优化诱导表达的条件,将大量表达的目的蛋白经金属离子亲和层析、除盐、肠激酶酶切、阳离子交换进行初步纯化。结果pET32a(+)/SLC最佳宿主菌为BL21trxB(DE3),优化的表达条件为37℃、1mmol/L IPTG诱导3h,SDS-PAGE分析可见,表达蛋白的大小约为30kd,占菌体总蛋白的50%以上,可溶性蛋白约占50%。用SLC多克隆抗体进行Western blot分析显示,在30kd处出现单一阳性条带,而对照的pET32a(+)/BL21trxB(DE3)诱导菌则无此反应。SLC经一系列纯化步骤得到初步纯化。结论初步建立pET32a(+)/SLC在宿主菌BL21trxB(DE3)中表达和纯化的方法。; 罗福康沈大斌郑红顾涛; 关键词：宿主菌蛋白纯化趋化因子大肠杆菌

肾病综合征患者血清Ig和补体C_3的测定及临床意义探讨被引量：27: 2006年; 目的通过对肾病综合征和其他常见的几类肾脏疾病进行血清免疫球蛋白(Ig)的测定,探讨肾病综合征体液免疫功能的变化。方法采用散射免疫比浊法(nephelometry)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别对肾病综合征(NS)、慢性肾小球肾炎(CN)、慢性肾衰竭(CRF)氮质血症期和尿毒症期及正常对照组进行Ig和补体C3的测定。结果NS患者IgG为(5.92±3.71)g/L,明显低于其他各组(P<0.01),而IgM和IgE水平高于其他肾病组及正常对照组(P<0.05),慢性肾衰竭(CRF)尿毒症期血清补体C3水平低于其他各组(P<0.05)。结论血清Ig测定在肾病综合征的诊断和治疗过程中具有重要的临床意义。; 姚磊向阳康铃蒋栋能罗福康张征; 关键词：补体C3 肾病综合征

应用基因芯片检测系统诊断结核分枝杆菌感染及耐药基因突变的临床研究被引量：9: 2017年; 目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、穿刺脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,并进一步对结核分枝杆菌(MTB)阳性标本进行耐药性分析。同时采用抗酸染色检测标本,比较两种方法检出率。采用MTB感染T细胞IFN-γ释放试验(TB-IGRA)技术对部分患者进行结核感染检测。结果 4 402例患者标本中检出分枝杆菌148例,检出率为3.36%(148/4 402)。其中MTB复合群137例,非结核分枝杆菌(NTM)11例,NTM占分枝杆菌总检出例数的7.4%(11/148)。检出率较高的标本为穿刺脓液、肺泡灌洗液和组织。进一步对137例MTB阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼katG、inhA基因检测,共有22例检测到了突变的耐药基因;基因芯片法检测痰液、脑脊液和胸腹水分枝杆菌检出率明显高于抗酸染色法(P<0.05)。基因芯片检测结核感染的检出率明显低于TB-IGRA(P<0.05)。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,尤其适用于痰液、胸腹水和脑脊液。该方法简便快速,灵敏度较高,特异性好。; 陈国会冯大山王秀丽罗福康吴军; 关键词：基因芯片结核分枝杆菌非结核分枝杆菌多重耐药

人趋化因子受体CCR6的克隆、表达及其功能分析: 2006年; 目的构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DNA片段,并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;将该质粒pcDNA3.1(+)-CCR6转染HEK293细胞,用流式细胞术检测转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞;采用体外趋化实验、钙流实验,验证转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性。结果经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DNA片段,构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;转染HEK293细胞,经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实,表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性。结论重组人趋化因子受体CCR6克隆成功,并在HEK293细胞中获得了表达,为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础。; 沈大斌龚小云顾涛罗福康郑红; 关键词：PCDNA3.1(+)克隆

免疫散射比浊法测定CRP被引量：4: 2005年; 目的本文对比浊法测定血清CRP(C反应蛋白)进行方法学评价。方法采用免疫散射比浊法检测100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同时与乳胶凝集法结果对比。结果批内、批间变异系数分别为1.41%和4.66%,定量检测具有满意的线性响应(r=0.987),免疫比浊法阳性率为35%,乳胶法为18%,比浊法阳性率明显高于乳胶法。结论本方法的重复性、准确性、稳定性、特异性均较好,脂血、黄疸无明显影响,具有较高的临床推广价值。; 罗福康姚磊; 关键词：散射比浊法乳胶凝集法 C-反应蛋白

冠心病患者外周血单个核细胞HCMV-DNA的荧光定量PCR检测被引量：2: 2011年; 目的了解冠心病（CHD）患者外周血单个核细胞（PBMCs）人巨细胞病毒（HCMV）-DNA存在情况并探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR（real time FQ-PCR）方法,对62例CHD患者,29例其他心血管疾病患者和30例健康体检者的PBMCs内HCMV-DNA进行定量检测。结果 CHD患者PBMCs的HCMV-DNA检出率41.9%,其他心血管疾病组10.3%,正常对照组10.0%,差异有统计学意义（P〈0.05）。CHD组HCMV-DNA载量介于103~105拷贝/ml者为12例,占阳性例数的46.1%（12/26）,介于105~106拷贝/ml者为8例,占阳性例数的30.7%（8/26）。结论 CHD患者PBMCs的HCMV感染可能在其致动脉粥样硬化性发病过程中发挥重要作用。; 姚磊晏玲罗福康董解菊何作云; 关键词：冠心病单个核细胞 HCMV-DNA 实时荧光定量PCR

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