葛鸿飞
- 作品数：3 被引量：37H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 水稻蜡质基因5’上游区中31bp序列增强基因表达的作用被引量：15
- 2000年
- 为研究水稻蜡质基因 (Wx) 5’上游区中一个与胚乳核蛋白结合的 31bp序列在基因表达中的作用 ,将一系列包含或不包含此序列的长度不同的Wx启动区与 β 葡萄糖苷酸酶基因 (GUS)编码区连接 ,构建成嵌合质粒。将这些质粒通过农杆菌介导转化水稻幼胚愈伤组织 ,并分化产生转基因植株。分别测定抗性愈伤组织中与转基因植株未成熟种子胚乳中的GUS酶活性。结果表明含有 31bp序列的比不含此序列的Wx启动区使GUS报告基因的表达水平高出 2～
- 葛鸿飞王宗阳洪孟民
- 关键词：水稻蜡质基因
- 糯性水稻中蜡质基因第1内含子的剪接活性被引量：6
- 2000年
- 以前的研究结果表明 ,非糯性的稻米中直链淀粉的含量与各品种中蜡质基因 (Wx)第 1内含子被剪接的效率有关 ,即剪接效率高的品种直链淀粉含量也高。为弄清糯米中不含直链淀粉是否也与此内含子剪接效率有关系 ,构建了蜡质基因启动子 (来自籼稻品种2 32 )、蜡质基因第 1内含子 [来自籼稻品种 2 32 (高直链淀粉含量的品种 )或粳稻品种寒丰 6 36 6 (中、低直链淀粉含量的品种 ) ]与GUS报告基因组成的两种嵌合基因 ,将含有这两种嵌合基因的质粒分别转化进粳性糯稻品种奉糯 5 93中 ,同时还分别转化进非糯性的籼稻品种特青和粳稻品种中花 11中作为对照 ,测定它们的抗性愈伤组织与转基因植株未成熟种子胚乳中的GUS酶活性。结果表明与在非糯性的籼稻和粳稻中一样 ,这两种嵌合质粒在不合成直链淀粉的糯稻中也有相当水平的表达。从此结果可以推测 ,糯稻品种有从嵌合基因的转录本中剪接蜡质基因第 1内含子的正常能力 。
- 葛鸿飞王宗阳洪孟民
- 关键词：糯稻蜡质基因直链淀粉
- 在转基因水稻植株中蜡质基因第1内含子对基因表达影响的分析被引量：19
- 2001年
- 为阐明水稻Wx基因第 1内含子在整体植株的胚乳发育阶段是否确有增强基因表达的功能 ,以及弄清高和中、低直链淀粉含量的水稻品种Wx基因第 1内含子 112 6个碱基之间有差异的 16个碱基中哪几个碱基影响了该内含子的正常剪接从而降低了基因的表达水平 ,我们分别用高直链淀粉含量品种的Wx基因翻译起始密码子ATG上游 3.1和 2 .1kb片段与GUS基因编码区融合构建成嵌合质粒 ,并在此基础上 ,(1)去除嵌合质粒中Wx基因的第 1内含子 ;(2 )将嵌合质粒Wx基因的第 1内含子中 (3.1kb)与中、低直链淀粉含量的水稻品种Wx基因第 1内含子有差异的 6个碱基以中、低直链淀粉含量的水稻品种的碱基替换。将上述改造过的几种质粒分别转化粳稻品种中花 11,测定转化植株未成熟种子胚乳中的GUS活性。结果表明第 1内含子的缺失或此内含子的 5′端剪接点上的碱基G以T替换均造成GUS活性的急剧下降 ,说明第 1内含子在植株体内的确有增强基因表达的功能 ,而且在中、低直链淀粉含量的水稻品种中Wx基因第 1内含子 5′端剪接点上自然存在的G→T突变是造成这些品种中该内含子剪接不正常。
- 程世军葛鸿飞王宗阳洪孟民
- 关键词：蜡质基因基因表达转基因水稻
