蒋和生 作品数:142 被引量:369 H指数:9 供职机构: 广西大学 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
广西巴马小型猪Lin28基因的克隆与序列分析 据Gene Bank中公布的人、猪等物种的Lin28核苷酸序列设计合成一对引物,以广西巴马小型猪肠道组织总RNA为模板,采用RT-PCR法,扩增出Lin28成熟蛋白编码cDNA序列,将此扩增产物克隆入pMD18-T载体,... 农微 蒋钦扬 郭亚芬 兰干球 蒋和生关键词:广西巴马小型猪 诱导多功能干细胞 文献传递 三个群体罗氏沼虾线粒体COI基因的遗传多样性分析 被引量:22 2006年 运用PCR方法,扩增罗氏沼虾缅甸原种F1代、广西选育群体和江苏养殖群体的线粒体DNA上的细胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase subunit I,COI)基因,在此基础上选用10种限制性内切酶对扩增产物进行限制性片段长度多态(RFLP)分析。三个群体共发现2个多态位点,11种酶切图谱,3种基因型。三群体的多态座位比例、平均杂合度和基因型多样性指数分别为:缅甸原种F122.2%、0.0556、0.0472,广西选育群体22.2%、0.0400、0.0398,江苏养殖群体11.1%、0.0106和0.0083,群体间遗传差异未见显著。根据群体间遗传距离构建UPGMA聚类关系图,显示广西选育群体和江苏养殖群体间的遗传关系较近,而与原种F1群体的遗传关系较远。 杨学明 郭亚芬 蒋钦杨 陈福艳 梁万文 蒋和生关键词:罗氏沼虾 COI基因 生长因子对牛卵母细胞体外成熟、体外受精及其体外发育的影响 1992年 本研究主要检测α-转移生长因子(TGF-α)及其他生长因子的交互作用对卵母细胞体外成熟及其体外受精后体外发育的影响。从屠宰场收集卵巢,并回收卵母细胞,与生长因子共同培养。然后,通过体外受精和受精卵体外发育培养来检验是否生长因子可提高卵母细胞发育的潜力。本研究共检测了4651枚卵母细胞。试验结果表明,α-转移生长因子可增加卵母细胞发育的潜力,这一作用是通过卵丘细胞的传递进行的。此外,α-转移生长因子和类似胰岛素生长因子的交互作用显著性地增强卵母细胞的发育潜力。然而,β-转移生长因子和表皮生长因子对牛卵母细胞的发育无显著性影响。结果表明,牛卵母细胞体外发育不仅需要一般性的化学物质、氨基酸、维生素,而且需要生长因子进行自身调节。 蒋和生 卢克焕关键词:牛卵母细胞 体外发育 体外成熟 体外受精 卵丘细胞 试验结果 鸡DMRT1基因CRISPR/Cas9载体构建及打靶效率的检测 被引量:9 2017年 DMRT1(Double sex and Mab-3 related transcription factor 1)是鸡性腺分化和发育的关键候选基因,其详细的功能和作用途径还未被阐明。为了解明DMRT1在鸡性腺分化和发育过程中的功能,研究首次利用在线sg RNA平台设计4条鸡DMRT1 sg RNA序列,构建了4个sg RNA表达载体:Guide-1、Guide-2、Guide-3和Guide-4。转染鸡DF-1成纤维细胞后,利用T7E1内切酶的方法检测4个表达载体的打靶效率。结果显示,成功构建了4条正确的鸡DMRT1 sg RNA表达载体,并且都能高效地在DF-1细胞中表达,其中Guide-4表达载体能有效地打靶DMRT1基因,打靶效率为24.82%。研究结果为进一步在鸡胚敲除DMRT1基因,研究其功能奠定了基础。 杨秀荣 邓继贤 赵德彪 Mike McGrew Sunil Nandi 蒋和生 Michael Clinton关键词:性腺分化 性别决定 DMRT1 鸡性别分化关键时期性腺细胞拉曼光谱分析 1引言每种组织、细胞所含的蛋白质、核酸、脂类和碳水化合物等生物大分子因其构型、构象不同,使得每种物质都有其特征的拉曼光谱。单细胞光镊拉曼光谱技术可对单个细胞的拉曼光谱图进行分析,其原理是将光学囚禁(opti-cal tr... 杨秀荣 蒋和生 姚辉璐关键词:性别分化 性腺 拉曼光谱 文献传递 澳洲劳莱恩牛MOET育种技术的研究 2008年 研究了澳洲劳莱恩牛的MOET技术.结果表明,PMSG+PGc同情发情处理黄牛的发情率明显高于PGc单独处理(P<0.01);超数排卵处理青年劳莱恩牛也能获得较高的可用胚胎数(6.35±2.12枚/头);劳莱恩牛鲜胚移植受体的受胎率明显高于冻胚(53.33% vs 46.39%),差异极显著(P<0.01). 蒋和生 蒋钦杨 韦英明 韦精卫 涂悦进 罗金松关键词:同期发情 超数排卵 胚胎移植 广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的克隆和序列分析 被引量:9 2005年 从广西巴马小型猪的卵巢中提取总RNA,并以其为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),在合成的特异性引物引导下,扩增得到巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的全序列,长度为1035bp。该扩增片段经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增。经序列分析结果表明,本研究中克隆的猪卵泡抑素cDNA序列与GeneBank中已报道的家猪卵泡抑素同源性高达99.4%,与奶牛、家鼠、挪威鼠和马等其他物种的卵泡抑素cDNA序列间同源性也大于89%。 莫毅 郭亚芬 兰干球 窦璋琴 兰虹丞 蒋钦杨 杨秀荣 蒋和生 李柏关键词:卵泡抑素 巴马小型猪 反转录PCR 克隆 柞蚕核型多角体病毒载体在培养细胞和休眠蛹中的基因表达效果 被引量:5 2008年 柞蚕核型多角体病毒(AnpeNPV)作为基因表达载体在柞蚕培养细胞(AnPe细胞)和柞蚕蛹中已经成功地表达出了外来基因,并生产出了大量蛋白质。比较了AnpeNPV与苜蓿尺蠖核型多角体病毒(AcMNPV)、家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和美国白蛾核型多角体病毒(HycuNPV)基因表达载体在培养细胞和昆虫活体组织内的β-半乳糖苷酶基因表达效果。结果显示,5×105个细胞中β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是AnpeNPV在AnPe细胞为40.9units/ml(TC-100培养液,FBS10%)和59.9units/ml(SF-900Ⅱ培养液),AcMNPV在Sf9细胞为72.4units/ml(TC-100,FBS10%)和66.4units/ml(SF-900Ⅱ)、在High5细胞为326units/ml(EX-CELL405培养液),BmNPV在Bm4细胞为15.1units/ml(TC-100,FBS10%),HycuNPV在SpIm细胞为68.6units/ml(SF-900Ⅱ)。活体组织内β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是柞蚕雌蛹为14.3units/g、雄蛹为11.7units/g,家蚕幼虫是10.1units/g。实验证明AnpeNPV/AnPe的外来基因表达水平与AcMNPV/Sf9和HycuNPV/SpIm相似、比BmNPV/Bm4高、不及AcMNPV/High5;AnpeNPV/柞蚕蛹,其雌蛹比BmNPV/家蚕5龄幼虫的外来基因表达效果好、雄蛹与之无明显差异,说明AnpeNPV基因表达载体无论是在培养细胞还是昆虫活体组织中均可与其他NPV基因表达载体相媲美。柞蚕蛹由于可以机械化、大规模地操作,对于大量生产蛋白质具有更好的应用前景。 黄元姣 王先裕 王学英 臧宁 蒋和生 小林淳关键词:核型多角体病毒 柞蚕 基因表达 长×巴F_2代杂交猪黑素皮质激素受体Ⅰ基因克隆与多态性分析 被引量:1 2015年 【目的】探讨猪黑素皮质激素受体Ⅰ基因(MC1R)碱基突变与其毛色分离的相关性,为研究猪的毛色遗传分子机制及遗传育种奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的猪MC1R基因同源序列(AF326520)设计引物,以70头不同毛色的长白猪×巴马小型猪杂交F2代(长×巴F2代)猪血液总DNA为模板,PCR扩增MC1R基因序列,并利用PCR-SSCP对长×巴F2代杂交猪的MC1R基因进行单核苷酸多态性(SNP)分析。【结果】长×巴F2代杂交猪MC1R基因编码区序列约963 bp,与参考序列(AF326520)的同源性为99.37%,共有6处碱基发生突变,其中两处(284G→A和306T→C)为错义突变,284G→A导致95Val→Met,306T→C导致102Leu→Pro;其余4处均为同义突变,分别为6C→T、51G→A、364T→C和730G→A。PCR-SSCP检测结果显示,长×巴F2代杂交猪的MC1R基因均未表现出多态性。【结论】长×巴F2杂交猪的MC1R基因存在碱基突变,其基因型为ED1,但在不同毛色的长×巴F2代杂交猪群体中并未发现MC1R基因呈多态性,即猪毛色多样性不能简单以MC1R基因的多态性进行分析。 敖秋桅 严雪瑜 蒋钦杨 唐家梁 兰干球 郭亚芬 蒋和生关键词:毛色 碱基突变 PCR-SSCP 水牛胚胎移植技术在其繁殖生产中的应用 被引量:2 2010年 为了加快良种水牛的扩繁和奶业的发展,试验对广西水牛进行活体采卵—体外胚胎生产—胚胎移植技术,同时选择2批杂交水牛群作为受体,进行同期发情试验,发情后第6天进行胚胎移植。结果表明:进行同期发情组的水牛发情率为63.64%、利用率为71.43%、妊娠率为60%,说明将水牛活体采卵—体外胚胎生产—胚胎移植技术应用于水牛生产中是切实可行的,也是加快良种水牛扩繁的有效途径。 覃广胜 陈明棠 杨炳壮 黄加祥 庞春英 张秀芳 梁贤威 谭正准 李辉 蒋和生关键词:活体采卵 体外胚胎生产 胚胎移植 水牛