郑宁
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 树突状细胞在抗肿瘤免疫治疗中的应用被引量：3
- 2001年
- 树突状细胞 (DC)是人体内抗原递呈能力最强的细胞 ,也是当前抗肿瘤免疫治疗研究的热点之一。本文对DC的表面标志、其在抗肿瘤免疫治疗中的主要作用机制以及将其应用于肿瘤免疫治疗的主要方案作了介绍。
- 郑宁叶胜龙
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫疗法过继免疫疗法
- 肝癌患者A-LAK细胞与苯乙酸协同抗瘤的观察被引量：5
- 2001年
- 目的 :简化粘附性LAK(A LAK)细胞的制备方法并观察其与苯乙酸 (PA)的协同抗瘤作用。方法 :采用苯丙氨酸甲酯(PME)处理肝癌患者外周血单个核细胞 (PBMC)而制备A LAK细胞 ;观察人肝癌SMMC772 1细胞株经PA处理后增殖能力的变化 ;并用经PA预处理的SMMC772 1培养上清液作用于A LAK细胞 ,观察A LAK增殖能力与杀伤活性的变化。结果 :采用PME制备的A LAK细胞 ,其增殖能力显著高于非粘附性LAK细胞 (NA LAK)和常规LAK细胞 ;肿瘤细胞经PA作用后 ,生长明显受到抑制 ;肿瘤细胞的培养上清液可明显抑制A LAK的增殖与杀伤活性 ,而经苯乙酸预处理的上清液则抑制作用减弱。结论 :采用PME可简便快速地制备A LAK ,而苯乙酸可与A LAK协同发挥抗瘤作用。
- 郑宁叶胜龙孙瑞霞赵燕汤钊猷
- 关键词：肝细胞癌苯乙酸
- 原发性肝癌免疫与基因治疗的实验及应用研究
- 叶胜龙汤钊猷贺平刘彬彬邱双健郑宁廖勇干育红孙瑞霞冯学胜陈敏葛宁灵赵燕柴晓杰吴伟忠
- 该项目依靠课题组多年来在肝癌的基础与临床研究方面的积累与特色，在细胞因子的多途径应用、免疫活性细胞的制备及改进、双功能抗体的构建及应用、新型免疫攻击靶点的探索、甲胎蛋白转录调控、细胞因子基因及融合基因治疗的应用、反义核酸...
- 关键词：
- 关键词：原发性肝癌免疫治疗基因治疗
- 小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的 构建含小鼠次级淋巴组织趋化因子 (SLC)cDNA的重组腺相关病毒载体。 方法 以C5 7BL 6J小鼠的淋巴组织为材料抽提总RNA ,用RT PCR方法克隆小鼠SLC的成熟肽基因。PCR产物回收后经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切 ,插入pAAV IRES hrGFP质粒 ,用磷酸钙法 ,与pAAV RC和pHelper三者共同转染HEK2 93细胞 ,包装成重组的病毒颗粒 ,并通过绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因荧光检测及抽提病毒DNA ,进行PCR扩增等进一步证实重组病毒的形成。 结果 约 5 0 0bp的小鼠SLC成熟肽基因被成功克隆 ,序列分析表明 ,所克隆的SLC基因与基因库注册的相同 ,重组载体的酶切及测序鉴定表明SLC基因被定向插入。重组载体转染HEK2 93细胞 ,经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测 ,证实已完成对重组病毒的包装 ,并表达GFP。 结论 成功构建了SLC成熟肽基因重组腺相关病毒载体。
- 梁春敏钟翠平郑宁吴欣孙瑞霞刘银坤叶胜龙
- 关键词：小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因腺相关病毒
- 受体介导的基因导入系统对家兔肝肾功能的影响
- 2001年
- 郑宁邱双健叶胜龙樊嘉田培坤韩俊松薛琼陈军高冬梅汤钊猷
- 关键词：基因治疗表皮生长因子受体基因导入系统家兔
- 白细胞介素-12基因再修饰基因瘤苗免疫小鼠的脾细胞过继治疗肝癌被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨白细胞介素 (IL) 2和B7 1双免疫基因转染肝癌细胞瘤苗免疫小鼠后获得的脾淋巴细胞经mIL 12基因修饰后治疗小鼠肝癌的可行性和疗效。方法 用 2 0 0PFU 细胞滴度的重组腺病毒载体 (Adv)将人IL 2和B7 1基因共同转染小鼠肝癌Hepal 6细胞株 ,经 80mg L丝裂霉素 (MMC)处理制备成肝癌细胞瘤苗 ,免疫同系小鼠后分离其脾淋巴细胞 (SLC) ,转染mIL 12基因 (Adv滴度 2 0 0PFU 细胞 )后注射入直径 1cm的小鼠皮下移植肝癌内 ,观察抗瘤效果。结果 转mIL 12基因SLC治疗组小鼠瘤体增加值最小 ( 0 .0 8± 0 .0 5 )cm3,与各对照组比差异有显著性 [(转染BGFP基因SLC、未转染SLC和生理盐水注射组分别为 ( 3 .46± 0 .15 ) ,( 3 .5 6± 0 .2 3)和( 8.12± 0 .5 4)cm3,P <0 .0 5 ]。结论 IL 2和B7 1双基因修饰肝癌瘤苗诱导小鼠产生的免疫脾淋巴细胞可能成为一种新的过继免疫治疗效应细胞及携带IL 12基因的载体细胞 ;基因治疗、特异性主动免疫和过继性细胞免疫治疗结合将有更优越的抗瘤效果。
- 葛宁灵叶胜龙刘银坤郑宁孙瑞霞汤钊猷
- 关键词：白细胞介素-12免疫治疗过继性细胞免疫治疗
- SLC基因修饰树突状细胞及不同免疫方式抗肿瘤作用探讨被引量：4
- 2006年
- 目的:应用次级淋巴组织趋化因子(SLC)成熟肽基因/重组腺相关病毒(rAAVSLC)转染树突状细胞(DC),探讨一种基因修饰DC的新方法及其抗肿瘤的生物学活性。方法:体外构建rAAVSLC,按MOI为10、50、100与腺病毒(Ad2)协同转染小鼠骨髓来源成熟和未成熟DC,GFP作为成功转染的示踪蛋白。RTPCR在mRNA水平、ELISA在蛋白水平检测SLC表达,Transwell检测转染DC的培养上清对T细胞的趋化作用。瘤苗的在体效应通过C57BL/6J小鼠肿瘤模型验证。皮下接种Hepal6肿瘤细胞后成瘤小鼠分成3组:①生理盐水对照组,瘤内或足垫注射NS;②单纯DC对照组,瘤内或足垫注射未修饰DC;③SLC基因修饰DC组,瘤内或足垫注射SLC基因修饰的DC。每隔7天注射1次,观察各组小鼠肿瘤的生长情况。4周后分离瘤体,用荧光免疫组化检测瘤体内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润情况。结果:rAAVSLC在MOI为100时能成功转染DC,未成熟DC的转染效率显著高于成熟DC,并产生对T细胞有明显趋化生物学活性的SLC。动物实验表明,瘤内注射SLC修饰后DC,肿瘤大小与对照组有明显差异,免疫组化显示瘤体内有较多的CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润。足垫注射SLC修饰的DC与对照组相比,抗肿瘤作用无显著差异。结论:rAAVSLC在Ad2的辅助下能有效转染未成熟DC并能表达具有趋化生物学活性的SLC。SLC基因修饰的树突状细胞瘤内注射以其对CD4+T细胞、CD8+T细胞的吸引作用而发挥了明显的抗肿瘤作用,同时也进一步证实用树突状细胞进行肿瘤生物免疫治疗时,不同免疫方式对疗效有明显影响。
- 梁春敏钟翠平郑宁刘彬彬孙瑞霞吴欣刘银坤叶胜龙
- 关键词：重组腺相关病毒骨髓来源树突状细胞次级淋巴组织趋化因子
- 冷冻保存对肝癌患者粘附性LAK细胞生物学特性的影响
- 2002年
- 为了观察冷冻保存对肝癌患者粘附性LAK (A LAK )细胞生物学特性的影响。我们采用苯丙氨酸甲酯 (PME )处理肝癌患者外周血单个核细胞 (PBMC )以制备A LAK细胞 ,并观察冷冻保存后A LAK细胞增殖能力、杀伤活性及细胞表型的变化。实验结果显示 ,A LAK细胞在冷冻复苏后的短时间内 ,增殖能力、杀伤活性均受到损伤 ,但随着IL 2的刺激而迅速恢复。至复苏后第 5天 ,冻存的A LAK细胞的杀伤活性明显高于未经冻存的新鲜A LAK细胞。而A LAK细胞的表面标志则在冷冻前后无显著性改变。因此 ,冷冻保存可促进肝癌患者A
- 郑宁叶胜龙孙瑞霞赵燕汤钊猷
- 关键词：冷冻保存肝癌生物学特性
