郭利
- 作品数：109 被引量：283H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金农业公益性行业专项“牛羊重大疫病防控技术研究与产业化”公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 水貂志贺氏菌分离鉴定及药物敏感性分析被引量：2
- 2017年
- 试验旨在对吉林省某水貂养殖场送检的3只具有典型腹泻症状的病死水貂的小肠和肠内容物样品进行细菌分离鉴定及耐药情况分析,为临床治疗提供参考。通过细菌分离纯化和PCR方法对分离菌株进行鉴定,对BALB/c小鼠进行菌液注射来检测菌株的致病性。采用K-B药敏法检测菌株对常用药物的敏感性,并通过PCR方法检测其耐药基因和Ⅰ类整合子的携带情况。结果显示,分离得到3株志贺氏菌,致病性检测试验显示分离菌可引起小鼠腹泻。药物敏感性试验结果显示,3株志贺氏菌对氟喹诺酮类药物、头孢类药物、氟苯尼考和多黏菌素较敏感,对氨基糖苷类、四环素、氯霉素、青霉素、氨苄西林耐药。耐药基因检测结果显示,3株志贺氏菌共检测出7种耐药基因blaTEM-1、aadA1、aac(3′)-Ⅱc、aac(6′)-Ⅰb、aph(3′)-Ⅶ、tet(M)、cat2及携带aadA1基因盒的Ⅰ类整合子。结果表明,分离的3株志贺氏菌均具有致病性,可引起小鼠腹泻,主要表现为多重耐药现象,携带的耐药基因呈多样性,为临床治疗带来巨大影响。
- 孙娜陈强杨艳玲郭利冯秋菊孙铭程世鹏
- 关键词：水貂志贺氏菌腹泻药物敏感性
- 貉细小病毒株及其应用、貉细小病毒灭活疫苗及其制备方法
- 貉细小病毒株及其应用、貉细小病毒灭活疫苗及其制备方法，属于疫苗制备技术领域。本发明针对目前貉细小病毒灭活疫苗安全性以及免疫效果差的问题，提供了一种貉细小病毒株，所述病毒株为貉细小病毒RDPV‑HeB17毒株，保藏编号为：...
- 罗国良程悦宁王振军冯二凯易立程世鹏郭利
- 文献传递
- 一种用于胰酶消化贴壁细胞的装置
- 本实用新型提出一种用于胰酶消化贴壁细胞的装置，该装置的半球形腔体A与半球形腔体B形成一个球体，筛网设置于半球形腔体A和半球形腔体B之间通过密封部件密封；进样口设置在半球形腔体A的顶部，进样口设有Y形导入管，两个观察窗分别...
- 冯二凯程悦宁程世鹏罗国良王振军陈立志易立郭利
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒p30基因纳米PCR检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 为了建立准确、敏感的早期快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的分子生物学方法,根据ASFV中p30蛋白在感染机体中早期表达的特点,设计出1对ASFV中p30基因保守序列的特异性引物,应用纳米PCR建立一种适用于早期检测ASFV的方法,并对其敏感性、特异性和临床样品检测进行研究和分析。结果显示:该纳米PCR的最低检出限为2.47×10^(3)copies/μL,而普通PCR的最低检出限为2.47×10^(4)copies/μL,表明纳米PCR的敏感性是普通PCR的10倍;同时,与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒均未发生交叉反应。此外,分别应用所建立的ASFV p30基因纳米PCR和普通PCR对18份临床样品进行检测,纳米PCR的阳性率为33.33%,普通PCR的阳性率为22.22%。上述结果表明,建立的纳米PCR检测方法可以对早期感染ASFV的病猪进行快速临床检测,具有良好的敏感性和特异性,为非洲猪瘟的诊断和防控提供了一定的技术保障。
- 魏宇王海璐孙飞雁王楠孙亮程悦宁郭利
- 关键词：非洲猪瘟病毒P30基因
- 牛传染性鼻气管炎活疫苗安全性和免疫保护效果研究被引量：13
- 2011年
- 本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6～8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6～8月龄牛,接种剂量为1mL(1头份),疫苗接种后28d使用检验用强毒进行攻毒,检验疫苗对攻击用强毒的保护效力。结果表明,不同月龄牛接种疫苗后体温正常,无任何临床可见异常,后备母牛接种疫苗后精神状态及食欲均良好,无流产、死胎及木乃伊胎出现。疫苗接种牛对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达5/5。研究结果表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。
- 冷雪郭利张淑琴武华
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒活疫苗安全性免疫原性
- 布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析
- 目的意义:本研究欲对布鲁氏菌BCSP31的免疫原性进行分析,为利用其作为诊断抗原研制布鲁氏菌病的新型诊断方法提供科学依据。方法:利用原核表达的方法制备了布鲁氏菌BCSP31蛋白的可行性表达产物SUMO-BCSP31,并将...
- 杨艳玲郭利王建科孙娜温永俊
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒及牛支原体三重Nano-PCR方法的建立与初步应用被引量：1
- 2022年
- 为了同时检测临床上牛常见的三种呼吸道重要病原体,本研究针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛支原体(MB)保守基因进行引物设计,并成功构建标准阳性质粒。使用纳米金颗粒将普通PCR方法优化,建立了三重Nano-PCR检测方法。结果显示,三重Nano-PCR检测方法可同时检测出BVDV、IBRV和MB的阳性质粒(1μL)最低检测分别为1 fg、100 ag、10 fg,灵敏度分别为常规PCR的10、10、100倍。临床结果显示,30份采集于临床呼吸道病牛样品中,BVDV、IBRV和MB的Nano-PCR的检测阳性率分别为33.33%、36.67%、33.33%,而普通PCR的检测阳性率分别为26.67%、30%、20%,提示BVDV和IBRV混合感染最多,阳性率可达26.67%。三重Nano-PCR方法特异性良好,检测其他牛呼吸道相关病原体BCV、BPIV3和BRV时结果均呈阴性。本研究建立的快速灵敏且特异良好的三重Nano-PCR检测方法可广泛应用于临床诊断和流行病学筛查。
- 叶京飞孙飞雁赵立峰薛力刚伞智豪郭利程悦宁
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒牛传染性鼻气管炎病毒牛支原体
- 牛呼吸道疾病综合症综合防控技术开发与应用
- 2022年
- 牛呼吸道疾病综合症(BRDC),是一种由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)等多病原或致病因子引起牛的呼吸道系统性疾病,典型的应激联动反应,多发生在生产运输和早期断奶及气候环境变化等环节.该病临床常见牛隐性或持续感染,而BVDV和IBRV可造成牛免疫抑制,并长期带毒排毒,造成水平和垂直传播.全球每年仅BVD就给养牛业造成经济损失高达数十亿美元.国外一些发达国家20世纪90年代起就对牛呼吸道疾病综合症相关病原,如BVDV、IBRV等开展净化和根除行动.而我国作为牛养殖量世界第三大国,通过前期对吉林、辽宁、安徽、天津、黑龙江、江苏、山东等多省份、直辖市调查研究发现,超87%的牛均感染过BRDC,且缺乏对BRDC的系统性研究和了解,没有成型的综合防控技术和措施,特别是在临床诊断技术开发和预防用生物制品研发方面亟待解决.
- 郭利郭利孙亮张金玉王喜伟罗国良罗国良程世鹏
- 关键词：牛呼吸道合胞体病毒早期断奶致病因子BVDV
- 貉源细小病毒(RDPV)HeB17株的分离鉴定及基因组序列分析
- 2022年
- 为了解我国河北省貉细小病毒(RDPV)生物学特性,通过细胞培养从河北省某貉养殖场发病貉组织样品中分离到1株病毒,经病料样品的PCR鉴定、病毒分离培养及形态学观察、猪红细胞凝集试验、基于VP2基因建立的系统发生树分析、同源性分析、动物回归试验等方法对分离株进行鉴定。结果显示,用特异性引物对病料样品进行PCR鉴定,可扩增得到573 bp特异性条带;分离病毒可在F81细胞中进行培养并产生明显的CPE;电镜下可见25 nm左右细小病毒样病毒粒子;猪红细胞凝集试验(HA)结果显示,分离株对猪红细胞血凝效价可达到1∶1024;VP2基因序列比对及进化分析结果显示,RDPV-HeB16与RPDV-LN10-1处于同一进化分支;同源性分析结果显示,与参考序列VP2基因相似性在98.4%~99.5%之间;将病毒培养物感染健康貉,结果显示感染组的貉均出现典型RDPV临床症状,正常对照组未发病。综上所述,本研究结果表明从发病貉病料样品中分离到1株RDPV,命名为RPDV-HeB17。本研究所获数据将对我国RDPV的流行及该病毒的遗传进化分析、疫苗和诊断制品的研究提供参考。
- 王振军王振军罗国良程悦宁冯二凯郭利郭利朱先鹏邓旭明王建锋
- 关键词：VP2基因
- 牛病毒性腹泻病毒JY株分离鉴定被引量：5
- 2019年
- 为了对疑似含有牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的种公牛精液进行检测并分离病毒,本研究采用细胞培养、免疫荧光及纳米PCR技术,对采自吉林省某牛病毒性腹泻(BVD)发病牛场中使用的种公牛精液进行检测与病毒分离。共采公牛精液8份,接种牛肾细胞系(MDBK)进行分离培养。分离得到阳性毒株为非致细胞病变(NCP)型,测得第4代病毒效价为10^(6.25)TCID_(50)/mL。纳米PCR检测5′-UTR和E2基因,测序后与GenBank上已发表的BVDV流行毒株核酸序列比对和进化分析。结果表明,分离毒株属于BVDV-1型,与BVDVJL株亲缘关系最近,5′-UTR核苷酸同源性为100%,E2基因核苷酸同源性为99.3%,命名为BVDVJY株。研究显示,本次采集的种公牛精液携带BVDV-1型毒株。该牛场BVD的发生疑似与种公牛精液带毒有关,对牛场BVD的防治起到警示作用。
- 刘占悝李健友刘泽余李智杰王超郭利
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒同源性分析
