艾敏
- 作品数:7 被引量:8H指数:1
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- 融合基因pEGFP-C3-B7.2-hTERT诱导小鼠免疫应答及抑制肝癌移植瘤被引量:1
- 2008年
- 目的:构建融合DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT,观察其诱导小鼠免疫应答的能力和抗小鼠肝癌H22细胞移植成瘤的作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和hTERTcDNA,以pEGFP-C3为载体构建pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒,肌肉注射接种C57BL/6小鼠,间隔7d,共3次,以注射接种pEGFP-C3-B7.2、pEGFP-C3-hTERT、pEGFP-C3和PBS为对照。检测免疫小鼠脾淋巴细胞CTL杀伤活性、脾细胞培养上清IL-2和IFN-γ水平、外周血淋巴细胞亚群变化及血清中抗hTERT抗体水平。将融合基因pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠,观察小鼠成瘤时间、生存时间。结果:琼脂糖凝胶电泳、酶切及序列测定证实,成功构建了融合基因质粒pEGFP-C3-B7.2-hTERT。融合基因免疫小鼠的脾淋巴细胞对B7.2-hTERT阳性靶细胞的杀伤活性明显高于各对照组(P<0.01),每只pEGFP-C3-B7.2-hTERT免疫小鼠都产生了抗体,免疫鼠外周血CD4+、CD8+T细胞和脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平较各对照组明显升高(均P<0.01)。pEGFP-C3-B7.2-hTERT融合基因质粒免疫已负荷肝癌细胞H22/hTERT或H22/B7.2的小鼠后,小鼠60d未成瘤,其他各组22d时所有小鼠均已成瘤,60d时均死亡。结论:DNA疫苗pEGFP-C3-B7.2-hTERT在体内能诱导出明显的B7.2-hTERT特异性的抗肿瘤免疫应答,且能抑制体内已经存在的少量肿瘤细胞的成瘤。
- 艾敏杨胜利姜爱华
- 关键词:DNA疫苗B7.2HTERT免疫应答移植瘤
- pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1融合蛋白诱导特应性抗肿瘤免疫应答的研究
- 2007年
- 目的:构建重组表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,研究人B7.2/MAGE-1基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:通过RT-PCR扩增B7.2和MAGE-1的cDNA,以pEGFP-C3为载体,构建pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1重组载体,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706,外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3天,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL),用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的食管癌细胞EC9706的杀伤活性。结果:CTL对转染pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的肿瘤细胞的杀伤活性大于转染pEGFP-C3和未转染细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:成功构建了真核共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,人B7.2/MAGE-1基因修饰的EC9706肿瘤细胞瘤苗,可诱导出明显的抗EC9706细胞的免疫效应。
- 艾敏赵国强张巧杨胜利
- 关键词:B7.2MAGE-1真核表达载体肿瘤免疫
- 948例泌尿生殖道支原体感染及其药敏分析被引量:1
- 2008年
- 目的了解濮阳地区泌尿生殖道支原体感染对12种抗生素的体外敏感性。方法使用支原体培养、药敏鉴别试剂盒对948例泌尿生殖道支原体阳性标本进行Uu和Mh检测及药敏试验。结果948例支原体培养阳性标本中,Uu阳性率为85.7%,Uu合并Mh感染阳性率为9.7%,Mh阳性率为4.7%。Uu对交沙霉素、环脂红霉素、克拉霉素、阿齐霉素和四环素类抗生素较为敏感,Mh对强力霉素、美满霉素、甲砜霉素较为敏感,Uu合并Mh感染对交沙霉素、强力霉素、美满霉素较为敏感。结论Uu与Mh有不同的耐药谱,Uu和Mh混合感染使抗生素的耐药性普遍增强,单纯Uu感染与混合感染对抗生素敏感性有明显差异。
- 艾敏姜爱华
- 关键词:泌尿生殖道支原体药物敏感性
- B7.2-MAGE-1-hTERT融合基因共表达载体的构建及小鼠抗肿瘤效应的实验性研究
- 刘亚普艾敏张新梅杨胜利
- 真核共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建及表达
- 本文对真核共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建及表达进行了研究。文章成功构建了pGEM-T-B7.2及pGEM-T-MAGE-1原核重组载体,B7.2及MAGE-1基因的测序结果与GenBank公布的...
- 艾敏
- 关键词:黑色素瘤肿瘤免疫基因表达
- 文献传递
- 真核荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达被引量:1
- 2008年
- 目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达。方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达。结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功。该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达。
- 艾敏张巧赵国强杨胜利
- 关键词:B7.2MAGE-1真核表达载体肿瘤免疫
- 急性脑梗死血清IL-1β、TNF-α的变化与意义被引量:5
- 2012年
- 目的探索IL-1β(白介素1β)、TNF-α(肿瘤坏死因子α)在急性脑梗死病程不同时期的浓度变化规律,分析其在疾病发生、发展中的意义,为临床早期诊断及预后提供可靠依据。方法以急性发病症状不超过24h的脑梗死病人为研究对象,连续动态血清中IL-1β、TNF-α、在病程不同时期的浓度变化,结合神经功能缺失程度,探明其在疾病的发生、发展中的意义。结果急性缺血性脑卒中病人血中IL-1β、TNF-α显著高于对照组。最初24h内的IL-1β浓度与第3~5天、7~10天神经功能缺失显著相关。IL-1β进入回归方程。结论 IL-1β浓度与神经功能缺失程度相关,发病后24h内的血清浓度可提示之后的神经功能缺损,可作为监测急性脑梗死预后的标记物。本试验支持血清标记物诊断急性脑梗死,方便神经科医生据此迅速对急性脑梗死病人作出诊断,指导治疗,并对以后的干预治疗设计出更佳的方案。
- 刘卫芳艾敏张俊豪李鸣凤
- 关键词:急性脑梗死IL-1ΒTNF-Α