武志鹏
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
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- 蓝光照射致人视网膜色素上皮细胞凋亡的机理探讨
- 目的 探讨蓝光照射致人视网膜色素上皮(RPE)凋亡的细胞机制.方法 根据不同目的,设置不同分组方法.建立体外培养人RPE凋亡模型方法,采用倒置显微镜观察RPE细胞形态;TUNEL法检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI);流式...
- 蔡善君汪利敏武志鹏李海辉宫鑫吕建平王丽丽
- 蓝光致人RPE细胞分泌VEGF及PEDF变化及与Ca2＋-PKC信号通路的关系被引量：8
- 2015年
- 目的 探讨蓝光照射致体外培养人RPE细胞分泌VEGF、色素上皮衍生因子（PEDF）、RPE细胞内三磷酸肌醇（IP3）和二酰甘油（DAG）的浓度变化,分析Ca2＋-蛋白激酶C（PKC）信号通路之间的相互作用.方法 实验研究.将体外培养的第4代人RPE细胞随机分为6个组,A组：无光照组;B组：蓝光光照组;C组：蓝光光照＋PKC激动剂佛波酯（PMA）组;D组：蓝光光照＋PKC抑制剂钙磷酸结合蛋白（Calphostin C）组;E组：蓝光光照＋硝苯地平组;F组：蓝光光照＋钙磷酸结合蛋白组＋硝苯地平组.用（2 000±500）lux蓝光照射体外培养人RPE细胞6h,终止培养24 h,采用ELISA测定各组RPE细胞分泌VEGF、PEDF、RPE细胞内IP3和DAG的浓度,采用流式细胞仪检测A、B及F组细胞的凋亡率.结果 A～E组的VEGF浓度分别为（584.38± 10.66）、（700.70±5.88）、（698.21±6.66）、（623.87±3.12）、（648.30±4.91） ng/L.其中B、C、E组的VEGF浓度高于A组,差异有统计学意义（P=O.002,0.002,0.016）.A～E组的PEDF浓度分别为（75.96±1.70）、（71.82±1.67）、（72.43±0.58）、（86.31＋1.35）、（93.716±1.24） μg/L.其中B、C组PEDF浓度低于A组（P=0.004,0.011）.B组和C组的VEGF/PEDF比值显著高于A组（P=0.008,0.027）,E组和D组的VEGF/PEDF比值低于B组（P=0.016,0.015）.A～E组的IP3浓度分别为（9 108.42±0.74）、（117.23±1.05）、（137.12±2.70）、（139.17±1.39）、（149.60±0.76） μg/L.B、C、D、E组IP3浓度均高于A组（P=0.003,0.007,0.000,0.000）,并且C、D、E组IP3浓度均高于B组（P=0.011,0.000,0.000）.A～E组的DAG浓度分别为（995.47±13.61）、（1070.10±10.07）、（1046.39±7.90）、（1041.12±9.76）、（1273.13±10.89） pmol/L.B、C、D、E组DAG浓度均高于A组（P=0.000,0.000,0.000,0.000）,与B组比较,组DAG的浓度增高（P=0.000）,而C、D组DAG浓度降低（P=0.021,0.007）.A、B和F组的细胞凋亡率分别是（10.26±1.87）％、（25.06±2.66）％和�
- 汪利敏蔡善君武志鹏宫鑫吕建平宿罡王丽丽
- 关键词：光刺激视网膜色素上皮血管内皮生长因子A
- 蓝光对人视网膜色素上皮细胞α1D亚基蛋白表达及分泌VEGF和bFGF的影响被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨蓝光对人RPE细胞α1D亚基蛋白表达及分泌VEGF和bFGF的影响.方法 实验研究.培养的人RPE细胞分为对照组;光照组;光照＋硝苯地平组;光照＋（-）BayK8644组.分别用（2 000 ±500）lx蓝光照射6h,终止细胞培养24 h.采用酶联免疫法测定RPE细胞分泌的VEGF和bFGF;Real Time-PCR检测各组RPE细胞L型钙通道中神经内分泌亚型（α1D或CaV1.3） mRNA的表达;免疫印迹（Western blot）法检测α1D亚基的蛋白表达.各组VEGF和bFGF浓度,α1D亚基mRNA及蛋白表达比较采用方差分析,两两比较采用LSD法.α1D亚基蛋白表达量与分泌VEGF及bFGF浓度之间的关系采用相关性分析.结果 （1）4组VEGF和bFGF浓度的总体均数比较有统计学意义（F=99.441、21.310,P=0.000、0.000）.光照组（3 281.51±251.73、1 346.81±62.27）与光照＋（-）Bay K8644组（3 808.01±94.01、1 485.82±108.97） VEGF、bFGF浓度高于对照组（2 401.09±228.07、1 232.42±65.41）,差异有统计学意义（P=0.000,0.000,0.019,0.000）;光照＋（-）Bay K8644组（3 808.01±94.01、1 485.82±108.97）高于光照组（3 281.51±251.73、1 346.81±62.27） （P=0.000,0.006）;光照＋硝苯地平组（1 927.28±143.11、1 149.39±62.99）低于光照组（3 281.51±251.73、1 346.81±62.27） （P=0.000,0.000）.（2）4组α1D亚基mRNA表达总体均数比较有统计学意义（F=50.320,P=0.000）.光照组（210 ±23）、光照＋硝苯地平组（232±14）、光照＋（-）BayK8644组（478±80）α1D mRNA的表达均高于无光照组（100±20）,差异均有统计学意义（P =0.023、0.006、0.010）;光照＋（-）BayK8644组（478±80）高于光照组（210±23）及光照＋硝苯地平组（232±14） （P =0.032、0.039）.（3）4组α1D亚基蛋白表达总体均数比较有统计学意义（F=1 940.363,P=0.000）.光照组（0.974 2±0.014 7）、光照＋（-）Bay K8644组（0.654 9±0.005 0）α1D亚基/βactin吸光度值均高于对照组（0.503 2±0.007 5）,差异有统计学意
- 李海辉蔡善君宫鑫武志鹏吕建平宿罡谢兵
- 关键词：血管内皮生长因子A成纤维细胞生长因子2
- 特殊类型视神经撕脱伤一例
- 江铭蔡善君武志鹏叶雷
- 蓝光照射致人视网膜色素上皮细胞线粒体凋亡的途径及机制被引量：9
- 2015年
- 背景 研究已证实蓝光照射可导致视网膜色素上皮细胞（RPE）凋亡,但其机制目前尚不完全清楚. 目的 探讨线粒体凋亡通路是否参与蓝光照射诱导体外培养的人RPE细胞凋亡过程.方法 分离新鲜的供体视网膜,对人RPE细胞进行原代培养和传代,用角蛋白单克隆抗体行细胞鉴定.将体外培养的人RPE细胞分为无光照组、单纯光照组、光照＋硝苯地平组、光照＋钙磷酸结合蛋白C（calphostin C）组、光照＋佛波酯（PMA）组.光照组细胞用（2 000±500） lx的蓝光照射人RPE细胞6h,然后继续培养24 h后终止.采用Western blot法比较两个组间RPE细胞中凋亡相关调控因子bax、bcl-2、bcl-xl的相对表达,以评价蓝光照射对RPE细胞凋亡的影响.光照＋硝苯地平组、光照＋calphostin C组、光照＋PMA组细胞在蓝光照射前1h分别在培养基中加入相应药物,然后以（2 000±500） lx的蓝光照射人RPE细胞6h,并继续培养24 h,采用Westernblot法检测5个组细胞中caspase-9蛋白表达量的变化,观察钙通道和蛋白激酶C（PKC）通路对RPE细胞线粒体的影响.结果 培养的细胞生长良好,细胞质内充满色素颗粒,呈铺路石样排列,对角蛋白呈阳性反应.无光照组和单纯光照组均可见bax、bcl-2及bcl-xl蛋白条带,相对分子质量分别为23 000、26 000和30 000.与无光照组比较,单纯光照组bax、bcl-2和bcl-xl蛋白表达相对值（A）下降,差异均有统计学意义（t=-4.409,P=0.012;t=7.575,P=0.002;t=6.068,P=0.004）.与无光照组比较,单纯光照组、光照＋calphostin C组、光照＋PMA组细胞中caspase-9蛋白表达均升高,差异均有统计学意义（P=0.005、0.002、0.000）,而光照＋硝苯地平组与无光照组比较差异无统计学意义（P=0.191）.与单纯光照组比较,光照＋PMA组caspase-9蛋白表达升高,差异有统计学意义（P=0.005）;而光照＋硝苯地平组及光照＋calphostin C组caspase-9蛋白表达差异均无统计学意义�
- 李红吕建平蔡善君宿罡武志鹏宫鑫
- 关键词：光损伤视网膜色素上皮凋亡线粒体半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 蓝光照射致人视网膜色素上皮细胞调亡与Ca2+-PKC信号通路的相关性研究
- 武志鹏蔡善君吕建平李海辉宫鑫宿罡
- 蓝光照射致视网膜色素上皮细胞凋亡途径的研究
- 吕建平蔡善君武志鹏李海辉宫鑫
