虞飞 作品数:6 被引量:3 H指数:1 供职机构: 包头医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人肾脏促红细胞生成素cDNA基因的克隆 2017年 目的:克隆促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)c DNA基因,为重组EPO的制备奠定基础。方法:从人肾脏中提取总RNA,采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法扩增EPO c DNA基因后,将其插入到克隆载体p JET 1.2中,DNA测序法鉴定基因序列。结果:对克隆到的EPO c DNA基因进行DNA测序分析鉴定,其结果与Gene Bank中序列完全一致。结论:成功从人肾脏中克隆扩增了EPO c DNA基因,为重组EPO的制备奠定了基础。 王雅楠 嵇雅茹 虞飞 张学明关键词:反转录 聚合酶链式反应 重组人gdnf乳腺特异表达载体转染牛胎儿成纤维细胞的研究 2014年 为了制备重组人GDNF牛乳腺生物反应器,采用组织块贴壁法分离培养雌性牛胎儿成纤维细胞,连续继代培养75d,进行形态观察和染色体分析,在此基础上,转染带有新霉素抗性和红色荧光蛋白双重筛选标记的重组人gdnf乳腺特异表达载体pNR-GDNF,G418筛选阳性抗性克隆,进行PCR法鉴定。结果表明,分离培养的牛胎儿成纤维细胞具有正常的形态、分裂增殖特性和染色体数目;目的基因已整合到转基因细胞的染色体上。 虞飞 李斌 张晶晶 丁海麦 张学明关键词:牛胎儿成纤维细胞 转基因 GDNF 规律成簇的短回文重复序列/Cas9的研究进展 被引量:1 2016年 规律成簇的短回文重复序列(clustered regularly intespaced short palindromic repeats,CRISPR)/Cas系统是最近兴起的一项基因编辑技术,在基因编辑中有着不可或缺的作用。CRISPR是继锌指人工核酸酶(zinc finger nuclease,ZFN)和类转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effectors nuclease,TALEN)之后的第三代人工合成的核酸酶,有着ZFN、TALEN不具备的众多优点,所以CRISPR正在慢慢取代ZFN和TALEN,成为最主要的人工核酸酶并广泛应用在基因编辑中。而CRISPR/Cas9是CRISPR/Cas系统中最为简单的,也是现在基因编辑技术中应用最为广泛的一种。下面从CRISPR/Cas9的工作原理、构建和研究进展等几个方面对其做一个简要综述,为在这一个领域的研究工作者提供一个参考。 虞飞 王亚楠 张学明lncRNA与慢性肾病关系的研究进展 被引量:2 2022年 近年来,慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)的发病率和死亡率逐年升高,越来越引起人们的重视。其发病机制复杂,病情往往持续性进展,最终发展为终末期肾功能衰竭。lncRNA是长链非编码RNA,显示出高度组织特异性,在最近一些研究中暗示了其在疾病中的重要性,lncRNA可能成为人类疾病未来治疗靶点。本文综述lncRNA在慢性肾病中的研究进展,为科学研究和临床应用提供参考。 苑佳奇 沈晓丹 虞飞 张学明关键词:非编码RNA 慢性肾病 微小核糖核酸对肾疾病的影响 2016年 微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,miRNA)是一类保守的,内源性具有调控功能的非编码单链小分子核糖核酸(ribonucleic acid,RNA),长度约20~25个核苷酸(nuleotide,nt),通过介导靶mRNA降解或抑制靶基因翻译来调节靶基因的表达。研究证明,miRNAs参与细胞增殖与凋亡,造血和血管生成等各种生命过程的调节,但目前只有一小部分miRNAs生物学功能得到阐明。近期研究发现,miRNA能够调控多个基因位点, 王雅楠 虞飞 嵇雅茹 张学明关键词:MIRNAS 基因位点 DICER 重组人gdnf在人乳腺肿瘤上皮细胞中表达的研究 2015年 为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子( GDNF ),本研究构建了牛β-casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体,用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap-37细胞中,经G418抗性筛选8~10 d后,分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞,PCR鉴定转基因细胞,用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞,RT-PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明:重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建,转染Bcap-37细胞后,稳定整合到细胞染色体中,转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的 GDNF,为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。 张学明 丁海麦 席海燕 李斌 张晶晶 虞飞关键词:胶质细胞源性神经营养因子