李绚
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
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- 苯并[a]芘作用下ADP-核糖基化修饰蛋白分析方法的建立
- 2015年
- 目的建立苯并[a]芘(B[a]P)作用下ADP-核糖基化修饰蛋白分析方法。方法使用免疫共沉淀技术收集可能发生ADP-核糖基化修饰的蛋白,同步使用高效液相色谱技术和双向电泳技术对蛋白进行分离,再进行MALDI-TOF-MS/MS鉴定,比较两种分离方法鉴定蛋白的差异,并将鉴定蛋白的氨基酸序列与文献报道的ADP-核糖基化修饰蛋白的保守序列进行比对。结果通过高效液相色谱分离结合质谱鉴定找出3个蛋白,双向电泳分离结合质谱鉴定找出12个蛋白,双向电泳分离结合质谱鉴定方法存在明显优势;所鉴定蛋白存在与文献报道的ADP-核糖基化修饰蛋白相似的保守序列。结论免疫共沉淀蛋白双向电泳分离结合质谱鉴定方法可用于分析ADP-核糖基化修饰蛋白,并发现ADP-核糖基化蛋白存在相对保守的结合序列。
- 高玮黄海燕蔡剑锋李绚刘银品刘建军庄志雄陈雯
- 关键词：苯并[A]芘免疫共沉淀高效液相色谱双向电泳
- ADP-核糖基化在苯并芘致癌过程中的作用
- 目的从抑制聚-ADP-核糖(PAR)的降解出发,以致癌物苯并芘(BaP)为受试物,分析ADP-核糖基化在BaP致癌过程中的作用。方法选用课题组前期建立的聚-ADP-核糖水解酶(PARG)缺陷的人支气管上皮细胞(16HBE...
- 黄海燕李绚高玮刘银品刘建军庄志雄
- 文献传递
- 苯并芘作用下ADP-核糖基化修饰蛋白分析方法的建立
- 目的：建立苯并芘作用下ADP-核糖基化修饰蛋白分析方法。方法：本研究使用免疫共沉淀技术收集可能发生ADP-核糖基化修饰的蛋白，同步使用高效液相色谱技术和双向电泳对蛋白进行分离，再对分离的样品进行MALDI-TOF-MS/...
- 黄海燕蔡剑锋高玮李绚刘银品刘建军徐新云庄志雄
- 关键词：免疫共沉淀高效液相色谱
- 聚-ADP-核糖基化在六价铬致细胞损害中的作用机制探讨
- 2014年
- 目的 探讨聚-ADP-核糖基化在Cr（Ⅵ）致细胞损害中的作用.方法 选用前期建立的聚-ADP-核糖水解酶（PARG）缺陷的人支气管上皮细胞（16HBE细胞）作为研究对象,选用不同剂量的Cr（Ⅵ）分别染毒,并处理正常16HBE细胞和PARG缺陷细胞24 h,同时设立溶剂对照组,比较两种细胞对Cr（Ⅵ）毒作用的差异;在此基础上,选取5.0 μmol/L的Cr（Ⅵ）作为染毒剂量,染毒处理两种细胞后,提取细胞总蛋白进行双向荧光差异凝胶电泳（2 D-DIGE）分析,计算比较两种细胞染毒前、后的总蛋白表达差异,对差异蛋白点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-MS/MS）鉴定,并进一步使用Western blot验证.结果 Cr（Ⅵ）作用后,PARG缺陷细胞的存活较正常16HBE细胞多,当作用剂量达到5.0 μmoL/L时,16HBE细胞和PARG缺陷细胞的存活率分别为（59.67±6.43）％和（82.00±6.25）％,两者之间的差异有统计学意义（t=-4.32,P＜0.05）;2D-DIGE分析比较正常16HBE细胞与PARG缺陷细胞Cr（Ⅵ）染毒前、后蛋白差异,共筛选且成功鉴定出18个蛋白,这些蛋白的功能涉及维持细胞形态、参与能量代谢、DNA损伤修复以及基因表达调控.Western blot成功验证出差异表达蛋白cofilin-1,其在染毒后的16HBE细胞中表达上调,相对表达量为1.41 ±0.04,对照组表达量为1.00±0.01,差异有统计学意义（t=-18.00,P＜0.05）.在PARG缺陷细胞表达差异无统计学意义（t=-8.61,P＞0.05）.结论 鉴定出的差异蛋白大多与肿瘤发生密切相关,推测聚-ADP-核糖基化反应可通过抑制Cr（Ⅵ）诱导的肿瘤发生从而对抗Cr（Ⅵ）的细胞毒性,这为阐明聚-ADP-核糖基化在Cr（Ⅵ）致细胞损害中的作用机制提供了重要的参考依据.
- 李绚蔡剑锋庄志雄刘建军夏菠胡恭华李习艺黄海燕
- 关键词：铬细胞人支气管上皮细胞
- 三氯乙烯及其代谢物致癌性研究进展被引量：7
- 2015年
- 三氯乙烯（trichloroethylene）是用途广泛的有机溶剂和重要的工业原料，易在制造、使用和弃置过程中释放人环境，因此广泛存在职业和环境暴露人群。国际癌症研究中心（IARC）于2012年根据积累的研究资料将三氯乙烯从人类可能致癌物提高评级到人类致癌物。本文从人群流行病学资料、动物实验证据以及致癌机制等几个方面概述了三氯乙烯及其代谢物的致癌作用。
- 黄培武李绚任晓虎刘建军
- 关键词：三氯乙烯致癌物
- 三氯乙烯非致癌性毒性研究进展被引量：6
- 2015年
- 三氯乙烯是用途广泛的有机溶剂和重要的工业原料。由于生产使用量大，废弃物处理不当，三氯乙烯已成为一种常见的环境污染物，因此有广泛的职业和环境暴露人群。三氯乙烯的职业和环境暴露可对多器官系统产生毒性作用。本文主要从流行病学研究、动物学试验以及毒性机制研究等几个方面对三氯乙烯的免疫毒性、生殖毒性、神经毒性和致畸作用等非致癌性毒性作用进行综述。
- 黄培武李绚刘威刘建军
- 关键词：三氯乙烯毒性作用流行病学研究
