赵英华
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:西安交通大学口腔医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 慢病毒介导重组质粒转染兔下颌骨骨髓间充质干细胞被引量:1
- 2014年
- 背景:中枢或周围神经系统损伤是临床中常见的问题,且治疗效果尚不理想。神经生长因子在神经元细胞损伤修复和生长发育方面具有重要作用,但局部应用的神经生长因子存在易于失活、流失的缺点。目的:旨在通过慢病毒载体构建人神经生长因子β重组质粒,转染荧光兔下颌骨骨髓间充质干细胞并研究其生物学活性。方法:采用慢病毒作为载体,经HindⅢ+NotⅠ双酶切法构建含目的基因的pDC316-hNGFβ-mCMV-EGFP质粒。分离和培养兔下颌骨骨髓间充质干细胞,经重组质粒转染后,应用酶联免疫吸附法检测骨髓间充质干细胞分泌人神经生长因子β的情况。结果与结论:成功构建了pDC316-hNGFβ-mCMV-EGFP真核表达载体,经酶切鉴定和测序均证明质粒构建完整、正确。质粒转染后兔下颌骨骨髓间充质干细胞在荧光显微镜下可以发出绿色荧光,且荧光强度不随培养时间延长而衰退。转染后兔下颌骨骨髓间充质干细胞表达的人神经生长因子β可以在第7天仍维持在25μg/L水平,生物学活性显著提升。
- 刘晓昌赵英华杨子桧王磊
- 关键词:干细胞骨髓干细胞下颌骨骨髓间充质干细胞慢病毒基因转染
- 神经生长因子修饰的间充质干细胞促进兔下颌骨牵张成骨时下牙槽神经损伤修复的实验研究被引量:3
- 2016年
- 目的探讨慢病毒介导的人神经生长因子β(h NGFβ)在兔下颌骨牵张成骨模型中促进下牙槽神经损伤修复的作用。方法分离兔下颌骨中的骨髓间充质干细胞(MSC)并通过重组的慢病毒将h NGFβ基因插入到其基因序列中。对20只新西兰白兔进行下颌骨牵张成骨,并在手术时向骨牵张缝隙下牙槽神经周围植入经h NGFβ基因重组质粒转染的MSC或对照MSC(每组10只)。经过牵张,在固定期第14天处死动物并获取下牙槽神经样本进行神经组织学分析和神经组织形态定量分析。结果下牙槽神经组织分析显示,移植h NGFβ基因修饰MSC组与对照组相比较,有更多的再生神经纤维和更少的神经变性。神经组织形态定量分析显示,与对照组相比,移植h NGFβ基因修饰MSC组的有髓纤维密度显著增多,提示移植h NGFβ基因修饰MSC能够显著地加快兔下颌骨牵张成骨过程中的下牙槽神经的修复。结论慢病毒介导h NGFβ基因修饰MSC将有希望为临床减少牵张成骨造成的下牙槽神经损伤提供一种有效的基因治疗方法。
- 赵英华刘晓昌高乐陈李彤杨子桧王磊
- 关键词:神经损伤神经生长因子下颌骨牙槽