贺恒
- 作品数：5 被引量：12H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Hrd1转基因小鼠的构建与验证被引量：1
- 2015年
- 背景 内质网应激在糖尿病视网膜病变（DR）中发挥着重要作用.羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1（Hrd1,又名Syvn1）作为一种内质网相关蛋白降解（ERAD）途径中的核心蛋白,能够减少内质网应激. 目的 构建Hrd1高表达小鼠,为今后研究Hrd1在DR中的作用提供动物模型. 方法 构建Hrd1系统表达重组质粒,酶切、测序后显微注射3 p1到685枚C57BL/6小鼠受精卵中,移植到代孕母鼠,得到Hrd1转基因小鼠.利用鼠尾PCR检测法鉴定F0代小鼠的基因型.得到Hrd1基因检测阳性鼠后,使其分别与野生型鼠杂交,得到F1代Hrd1转基因小鼠,取鼠尾组织,用PCR检测法再次鉴定F1代小鼠基因型. 结果 成功构建了Hrd1重组载体,重组质粒pRP.ExBi-EF1 a-Syvn1-IRES-eGFP的全序列测定结果显示,cDNA序列均正确.接受了Hrd1-pcDNA显微注射的685枚受精卵中成活598枚.将存活的受精卵移植到代孕母鼠后共产子鼠41只,获F0代子鼠8只,生理活动均良好.PCR电泳显示339 bp处阳性条带,该基因型可以传递到子代F1.结论 成功构建了Hrd1转基因小鼠.
- 杨硕刘磊万幸王文丰王娟贺恒雷蕾李斌
- 关键词：内质网应激HYDROXYMETHYLACYLCOENZYMEREDUCTASE
- HRD1在糖尿病小鼠视网膜的表达变化被引量：1
- 2015年
- 目的观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(Hmg Co A reductase degradation 1,HRD1)在糖尿病小鼠视网膜不同时期的表达变化。方法 STZ诱导的糖尿病C57BL/J小鼠,分别于糖尿病成功造模后1个月、3个月、6个月,选取糖尿病小鼠视网膜组织,利用免疫荧光、Western blot、RT-PCR技术检测HRD1在糖尿病不同时期的表达变化。结果免疫荧光观察到HRD1绿色荧光强度在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜随糖尿病进程逐渐减弱。Western blot、RT-PCR检测可见在1个月、3个月、6个月糖尿病小鼠视网膜组织HRD1基因水平和蛋白水平表达较对照组均明显减少(m RNA:P1=0.040 5;P2=0.006 2;P3=0.004 1;蛋白:P1=0.010 9;P2=0.001 3;P3=0.000 3)。结论HRD1可能在糖尿病视网膜病变发生发展过程中起到一定作用。
- 杨硕贺恒马思琪朱颖王文丰雷蕾李斌刘磊
- 关键词：糖尿病视网膜病变内质网应激
- 糖尿病小鼠角膜损害的形态观察被引量：1
- 2014年
- 目的观察糖尿病小鼠角膜形态损害的特点,为后期进行的糖尿病角膜病变保护因子研究提供研究基础。方法 STZ诱导的糖尿病C57BL/J小鼠,分别于糖尿病成功造模后3个月、6个月时,选取糖尿病小鼠和正常对照组小鼠角膜,石蜡包埋后行HE染色观察形态学变化。结果糖尿病成功造模后3个月、6个月,与正常对照组相比,糖尿病小鼠角膜水肿、基质增厚,角膜溃疡区上皮缺损,溃疡区基质增厚、角膜水肿明显高于非溃疡区。结论糖尿病小鼠造模后3个月即可发生角膜基质病变,6个月时角膜基质改变更加严重。
- 杨硕王娟万幸贺恒李斌刘磊
- 关键词：糖尿病角膜病变HE染色
- 卵磷脂络合碘片辅助雷珠单抗联合激光光凝治疗黄斑水肿临床观察被引量：9
- 2016年
- 目的观察卵磷脂络合碘片辅助雷珠单抗联合激光光凝治疗黄斑水肿的临床疗效。方法前瞻性随机对照研究。对2014年1月至2015年1月在华中科技大学附属同济医院眼科就诊的62例（62只眼）不同原因引起的黄斑水肿病人应用数字表法随机分为两组：卵磷脂络合碘组31例（31只眼），雷珠单抗玻璃体腔注射联合视网膜激光光凝后辅以卵磷脂络合碘片口服治疗，每次3mg，每日3次，共4周；对照组31例（31只眼），雷珠单抗玻璃体腔注射联合视网膜激光光凝，但不接受碘剂；在治疗后1周、2周、4周观察最佳矫正视力（BCVA）、黄斑中心区视网膜厚度（CMT）和黄斑区硬性渗出分级的变化情况。结果卵磷脂络合碘组和对照组在治疗1周（Z=1．275，P=0．202）和2周（Z=0．984，P=0．325）时最佳矫正视力BCVA（LogMAR）相比较，差异无统计学意义，4周时卵磷脂络合碘组BCVA平均值为（0．52±0．24）logMAR，对照组为（0．69±0．33）logMAR，差异有统计学意义（Z=2．082，P=0．037）。黄斑中心区视网膜厚度（CMT）两组在1周时相比较差异无统计学意义（Z=0．901，P=0．368）；2周时卵磷脂络合碘组CMT平均值为（304．94±101．06）μm，对照组为（378．60±133．69）μm，差异有统计学意义（Z 2．035，P=0．042）；4周时卵磷脂络合碘组为（213．03±68．33）μm，对照组为（254．74±74．37）μm，差异有统计学意义（Z=2．239，P=0.025）。1周（Х^2=0．350，P=0．554）和2周（Х^2=1．958，P=0．162）时卯磷脂络合碘组和对照组在硬性渗出减少的发生率方面差异无统计学意义；4周时卵磷脂络合碘组和对照组两组硬性渗出减少发生率分别为32．26％和9．68％，差异有统计学意义（Х^2=4．769，P=0．029）。结论卵磷脂络合碘对于不同原因引起的黄斑水肿具有改善视力、减轻水肿程度和促进硬性渗出吸收的作用，可作�
- 裴晗郑一晨张新法石慧贺恒马思琪李斌
- 关键词：卵磷脂络合碘黄斑水肿
- 磷酸肌酸钠治疗Leber遗传性视神经病变的初步临床观察
- 2017年
- 目的观察磷酸肌酸钠治疗Leber遗传性视神经病变(LHON)的有效性。设计回顾性病例系列。研究对象2014年1月至2016年1月武汉同济医院眼科确诊的LHON患者19例。根据患者是否同意住院治疗分为两组,10例住院者为治疗组,9例门诊观察未做治疗者为对照组。方法对治疗组的10例LHON患者进行磷酸肌酸钠治疗,每日2次,每次1 g,加入250 ml生理盐水中静脉滴注,共7天。观察患者治疗前后的视力、视野变化。对照组的9例患者未治疗。19例患者随访观察1年。主要指标视力、视野。结果与治疗前视力相比,治疗7天后,治疗组患者中3例患者(1号右眼,6号右眼,7号左眼)视力提高,分别提高0.3 LogMAR、0.4 LogMAR、0.7 LogMAR。随访1年后,1号右眼视力下降,6号和7号视力无变化。3例患者中14484位点突变的有2例(6号和7号),11778位点突变的有1例(1号);另外7例视力无显著改变。10例患者的视野(VFI和MD)治疗前后无显著差异(P=0.167,0.20)。未经治疗的9例患者随访观察1年,视力无变化。结论磷酸肌酸钠治疗Leber遗传性视神经病变或许对14484位点突变患者的视力提高或稳定有一定的疗效。
- 元佳佳马思琪贺恒宋寅伟周耕兴黄伶俐李斌
- 关键词：LEBER遗传性视神经病变磷酸肌酸钠
