张晶波
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:徐州医学院研究生学院更多>>
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- 茶多酚对卵巢癌细胞黏附能力影响及其机制探讨被引量:5
- 2015年
- 目的探讨茶多酚对人卵巢癌SKOV3和3AO细胞黏附能力及对上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)表达的影响。方法体外培养人卵巢癌SKOV3和3AO细胞,采用MTT法检测0、5、10、20、40、80和160μg/mL不同浓度茶多酚处理24h后,SKOV3和3AO细胞体外增殖情况,选取后续实验茶多酚的给药浓度。分别选取5、10及20μg/mL茶多酚处理SKOV3细胞24h,10、20及40μg/mL茶多酚处理3AO细胞24h,各自对照组为不含茶多酚的培养液培养24h,采用细胞分离实验观察细胞-细胞间黏附能力的变化;采用细胞黏附实验观察细胞-基质间黏附能力的变化;利用Real-time PCR和蛋白质印迹法检测E-cadherin和N-cadherin在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果 MTT实验结果显示,SKOV3(χ2=18.96,P=0.004)和3AO(χ2=16.98,P=0.009)卵巢癌细胞组内增殖抑制率随浓度增高而增强。细胞分离实验结果显示,随着茶多酚给药浓度的增加,SKOV3和3AO细胞在10和20min的分离率逐渐降低,差异均有统计学意义,P值均<0.05。细胞黏附率的比较,SKOV3细胞对照组、5、10和20μg/mL组的黏附率分别为100.00%、93.89%、82.50%和67.32%,各组间差异有统计学意义,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞对照组、10、20和40μg/mL组黏附率分别为100.00%、92.65%、86.90%和76.71%,差异有统计学意义,χ2=10.532,P=0.015。Real-time PCR结果显示,SKOV3细胞各实验组的E-cadherin mRNA表达水平增加,χ2=10.532,P=0.015,N-cadherin mRNA表达水平减少,χ2=9.583,P=0.022;3AO细胞中各组N-cadherin mRNA表达水平明显减少,χ2=10.532,P=0.015,但E-cadherin mRNA表达水平无明显变化,χ2=4.499,P=0.212。蛋白质印迹法结果显示,SKOV3细胞中各实验组的E-cadherin蛋白表达水平增加,χ2=10.116,P=0.018,N-cadherin蛋白表达水平减少,χ2=9.804,P=0.02;3AO细胞中实验组与对照比较N-cadherin蛋白表达水平明显减少,χ2=8.868,P=0.031,但E-cadherin蛋白表达水平差异无统计
- 刘桐张蓓朱春波张晶波鲍莺歌
- 关键词:茶多酚卵巢肿瘤细胞黏附上皮型钙黏蛋白
- 二甲双胍对雌激素诱导的子宫内膜癌细胞增殖及ER表达的影响被引量:3
- 2014年
- 目的 探讨二甲双胍对雌激素诱导的子宫内膜癌细胞增殖及ER表达的影响.方法 不同浓度(分别为0.5、1、5、10、15、20、25、30 mmol/L)二甲双胍作用于子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞不同时间(分别为24、48、72 h)后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖情况.17β雌二醇(1×10-6mol/L)单独及联合二甲双胍(5 mmol/L)分别作用Ishikawa和HEC-1A细胞24 h后,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法检测Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖情况;不同浓度(分别为1、5、15 mmol/L)二甲双胍作用24 h后,实时荧光定量PCR技术检测Ishikawa和HEC-1A细胞中原癌基因c-fos和c-myc mRNA的表达水平,蛋白印迹法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中ERα和ERβ蛋白的表达水平.结果 MTT比色法检测显示,与对照(仅加入培养基)细胞比较,上述不同浓度的二甲双胍作用不同时间后,Ishikawa和HEC-1A细胞增殖的抑制率均明显增加(P<0.05),且随着二甲双胍浓度的增加及作用时间的延长,其抑制作用呈明显的剂量及时间依赖性(P<0.05).BrdU标记法检测显示,17β雌二醇联合二甲双胍作用后Ishikawa、HEC-1A细胞的增殖率分别为(62±7)%、(72±6)%,分别与17β雌二醇单独作用后的Ishikawa、HEC-1A细胞的增殖率[分别为(124±16)%、(109±5)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).实时荧光定量PCR技术检测显示,不同浓度(分别为1、5、15 mmol/L)二甲双胍作用后,Ishikawa、HEC-1A细胞中c-fos和c-myc mRNA表达水平均逐渐降低,除HEC-1A细胞中1 mmol/L的二甲双胍作用后c-myc mRNA表达水平与相应对照(即二甲双胍浓度为0)细胞比较差异无统计学意义(P=0.074)外,其余浓度分别与相应对照比较差异均有统计学意义(P<0.05);蛋白印迹法检测显示,随着二甲双胍浓度的增加,Ishikawa、HEC-1A细胞中ERα蛋白的表达水平逐渐下降,而ERβ蛋
- 张晶波张蓓印泽远陈凤刘桐徐慧刘玉清周雪妍
- 关键词:子宫内膜肿瘤二甲双胍雌二醇细胞增殖