徐莉
- 作品数：24 被引量：145H指数：7
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乌索酸对高糖诱导人肾小球系膜细胞增殖肥大及细胞外基质分泌的影响
- 2017年
- 目的探讨乌索酸(UA)对高糖(HG)所致人系膜细胞(RMC)损伤的保护作用,保护机制是否通过抑制系膜细胞增殖、肥大及细胞外基质分泌而完成。方法取对数生长期细胞,分为空白对照组、模型组、对照组、实验A、B、C组。空白对照组予以5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖培养;模型组予以30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖培养;对照组予以5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+24.5 mmol·L^(-1)甘露醇培养;实验A、B、C组分别予以30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.5,1.0,2.0μmol·L^(-1)乌索酸培养。6组均给药48 h。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,用PI单染流式细胞仪检测细胞周期及细胞肥大,用逆转录聚合酶链式反应法及免疫印迹法检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、纤维连接蛋白(FN)mRNA及蛋白表达。结果给药48 h后,空白对照组、模型组、对照组、实验A、B、C组的细胞增殖分别为(3.66±0.32),(4.33±0.23),(3.50±0.22),(3.93±0.11),(3.59±0.06)和(0.67±0.16)。模型组和空白对照组的细胞增殖率比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验B组、实验C组与模型组的细胞增殖率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验A组与空白对照组及对照组的细胞增殖率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);实验C组大部分系膜细胞已经死亡,设定实验B组为后续实验最终实验组。空白对照组、模型组、对照组、实验组的TGF-β_1mRNA分别(24.80±0.90),(29.89±1.06),(23.72±0.87)和(25.06±0.11),FN mRNA分别为(42.03±0.57),(54.55±1.20),(42.72±0.40)和(45.32±0.51),TGF-β_1蛋白分别为(54.92±3.28),(125.93±3.58),(25.11±0.51)和(101.23±7.55),FN蛋白分别为(46.44±7.90),(66.13±13.10),(34.98±5.52)和(28.70±5.70);模型组的上述指标与空白对照组及实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论乌索酸通过抑制系膜细胞增殖、肥大及细胞外基质分泌,从而减轻高糖诱导的系膜细胞损伤。
- 岳媛岳媛范秋灵都姝妍远方徐莉李琳刘楠姜奕
- 关键词：人系膜细胞乌索酸肥大增殖细胞外基质
- 抑制微小RNA-21可减轻高糖诱导的肾小球系膜细胞自噬抑制被引量：4
- 2017年
- 目的探讨高糖是否通过改变肾小球系膜细胞中miRNA-21的表达，调控PTEN和P13uAk/mTOR信号通路，进而调节自噬和糖尿病肾脏损伤，及抑制miRNA-21的作用对该过程的影响。方法大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）应用脂质体2000转染试剂分别转染miRNA．21抑制物和阴性对照，转染稳定后分别在正常糖及高糖条件下培养48h，分为正常糖组（5．5mmol／L葡萄糖）、正常糖阴性对照组（转染阴性对照＋5．5mmol／L葡萄糖）、正常糖miRNA-21抑制物组（转染miRNA-21抑制物＋5．5mmol／L葡萄糖）、高糖组（25．0mmol／L葡萄糖）、高糖阴性对照组（转染阴性对照＋25．0mmol／L葡萄糖）、高糖miRNA-21抑制物组（转染miRNA-21抑制物＋25．0mmol／L葡萄糖）。采用MTT法检测细胞的存活及增殖能力；总蛋白／细胞数评估细胞肥大；Western印迹和实时定量PCR检测miRNA-21、PTEN-P13K／AkffmTOR信号通路活性、I型胶原及自噬标志物（p62和LC3Ⅱ）。透射电镜观察自噬体的形成及数量。结果与正常对照组比较，高糖组系膜细胞明显肥大、增殖，胞内miRNA-21表达上调，PTEN蛋白及mRNA的表达显著下调，P．Akt、p-mTOR、I型胶原、p62表达均增加，LC3Ⅱ表达和自噬体数量降低（均P〈0．01）。与高糖组比较，高糖miRNA-21抑制物组细胞肥大程度和增殖率均降低，p-Akt、p-mTOR、I型胶原、p62的表达均降低，PTEN、LC3II表达和自噬体数量均升高（均P〈0．01）。结论高糖上调系膜细胞内miRNA-21的表达，下调PTEN的表达，激活AkffmTOR通路，抑制自噬。抑制miRNA-21作用可上调PTEN的表达，进而抑制Akt/mTOR信号通路的活化，改善高糖诱导的系膜细胞异常的肥大、增殖，增强自噬，及减少细胞外基质蛋白聚积。
- 卢新星范秋灵徐莉曹旭苏彦张东成王九宁
- 关键词：自噬微RNASPTEN磷酸水解酶肾小球系膜细胞
- 乌索酸通过抑制miR-21靶向的PTEN/Akt/mTOR通路改善糖尿病肾病系膜细胞自噬抑制
- 目的 观察乌索酸治疗对高糖培养的大鼠系膜细胞自噬功能以及miR-21 靶向的PTEN/Akt/mTOR 通路活性的影响.方法 高糖培养大鼠肾小球系膜细胞,予以PI3K 抑制剂LY294002 及乌索酸进行干预,应用MTT...
- 范秋灵卢新星徐莉李琳王力宁
- 乌索酸改善高糖诱导系膜细胞损伤的机制被引量：30
- 2015年
- 目的 探讨乌索酸能否通过抑制高糖状态下系膜细胞内miRNA-21的过表达,上调其靶基因PTEN的表达,抑制磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-Akt-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的激活,诱导自噬,减少细胞外基质堆积,发挥其肾脏保护作用.方法 高糖培养大鼠肾小球系膜细胞,以PI3K抑制剂LY294002以及不同剂量乌索酸进行干预,应用甲基噻唑基四唑（MTT）法观察细胞增殖能力,总蛋白/总细胞数测定细胞肥大,Western印迹和实时定量PCR检测PTEN-PI3K-Akt-mTOR信号通路活性、Ⅰ型胶原及自噬标志物.透射电镜观察自噬体的形成.结果 与正常对照组相比,高糖培养的系膜细胞出现显著的肥大、增殖,细胞内miRNA-21表达明显上调,PTEN蛋白及mRNA的表达明显下调,p85PI3K、磷酸化（p）-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62/SQSTMI表达明显增加,LC3 II表达明显降低,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）.与高糖组相比,乌索酸干预组及LY294002组细胞肥大、增殖程度均明显降低,p85PI3K、p-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62/SQSTMI的表达均明显降低,LC3 II表达明显升高,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）;但LY294002组细胞内miRNA-21和PTEN的表达与高糖组差异无统计学意义,而乌索酸干预组细胞内miRNA-21的表达明显下调,PTEN的表达明显上调,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）.结论 乌索酸可能通过抑制高糖培养系膜细胞内miRNA-21的过表达,上调PTEN表达,抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路异常活化,增强自噬从而减少细胞外基质堆积,减轻细胞的肥大、增殖.
- 卢新星范秋灵徐莉李琳徐艳艳张东成王力宁
- 关键词：糖尿病肾病自噬系膜细胞乌索酸MIRNA-21MIRNA-21
- 抗β2糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮患者中的表达及与实验室指标的关系被引量：2
- 2019年
- 目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清抗β2糖蛋白I(anti-β2 Glycoprotein I,anti-β2GPI)抗体的表达及与实验室指标的关系。方法选取2018年1月至2018年8月中国医科大学附属第一医院风湿免疫科收治的SLE患者119例为SLE组,选取同期类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者43例为对照组。检测两组患者血清抗β2GPI抗体,比较该抗体阳性率和表达水平的差异,分析该抗体与SLE患者其他实验室指标的关系。结果两组患者抗β2GPI抗体阳性率的差异无统计学意义(P>0.05),SLE组患者该抗体的表达水平高于对照组RA患者[(10.77±13.80)U/mL比(7.10±5.37)U/mL,P<0.05]。抗β2GPI抗体阳性的SLE患者中出现补体C3降低、免疫球蛋白G升高、抗核小体抗体阳性的情况多于抗β2GPI抗体阴性的SLE患者(29/39比44/80,21/39比27/80,22/39比21/80,P值均<0.05)。结论部分SLE患者血清抗β2GPI抗体水平升高,该抗体阳性与患者补体C3降低、免疫球蛋白G升高、抗核小体抗体阳性等检测结果有关。
- 殷丽丽王心怡徐莉
- 关键词：系统性红斑狼疮血清学检测抗Β2糖蛋白I抗体
- miRNA-148b靶向AMPKα1通过氧化应激介导高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡被引量：15
- 2019年
- 目的探讨微小RNA-148b(miRNA-148b)在高糖诱导肾小管损伤中表达变化及其作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组,培养48 h后,实时定量PCR法检测miRNA-148b表达;采用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)在荧光显微镜下检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western印迹检测HK-2细胞腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)、NOX2、NOX4、Bcl-2、cleaved-caspase3的蛋白表达。结果培养48 h后,与正常糖组相比,高糖组、高渗组HK-2细胞内miRNA-148b表达上调(P<0.01),ROS产生增多(P<0.01),NOX2、NOX4蛋白表达增多(均P<0.01),AMPKα1蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达减少(均P<0.01),线粒体凋亡通路相关蛋白cleaved-caspase3蛋白表达增加(P<0.01),差异均有统计学意义。结论高糖上调体外培养HK-2细胞miRNA-148b的表达,靶向抑制AMPKα1的表达,促进NOX2、NOX4表达,活性氧产生增多,活化线粒体凋亡途径,激活caspase酶,诱导HK-2细胞凋亡。高糖的肾小管毒性部分是渗透压的影响。miRNA-148b可能参与了糖尿病肾病病理损伤的发生,有望成为糖尿病肾病新的治疗靶点。
- 杨莹范秋灵李露露汪旭文思徐莉
- 关键词：肾小管上皮细胞
- 2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清微小RNA-148b-3p的水平变化及意义被引量：20
- 2018年
- 目的分析2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清微小RNA-148b-3p（miR-148b-3p）的水平变化及其与临床和病理指标的相关性。方法入组人群分为3组，（1）糖尿病肾病组：。肾活检病理诊断明确为糖尿病肾病的患者（n=25，男14例，女11例）；（2）2型糖尿病组：尿微量白蛋F1／尿肌酐正常的2型糖尿病患者（n=10，男4例，女6例）；（3）正常对照组：健康体检者（n=9，男3例，女6例）。临床指标包括性别、年龄、24h尿蛋白量、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血肌酐（Scr）、尿素氮（Urea）、胱抑素C（Cys—C）、血白蛋白（ALB）、尿微量白蛋白（UMA）、三酰甘油（TG）、胆同醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、血尿酸（UA）、空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、尿微量白蛋白／尿肌酐（UACR）和利用CKD—EPI公式计算的估算肾小球滤过率（eGFR）。实时定量PCR法测定入组人群的血清miR-148b-3p水平，分析血清miR-148b-3p水平与人组人群临床参数的关系。结果糖尿病肾病组、2型糖尿病组血清miR-148b-3p水平分别是正常对照组的1．82倍和1．73倍（均P〈0．05）。血清miR-148b-3p水平与HDL—C（r=-0．374，P=0．013）、UMA（r=0．426，P=O．004）、FBG（r=0．330，P=0．046）及TG（r=0．423，P=0．005）有明显相关性。多元线性回归分析显示UMA与血清miR-148b-3p独立相关（β=0．338，P=0．044）。血清miR-148b-3p在诊断2型糖尿病及糖尿病肾病的受试者丁作特征曲线（ROC）下面积分别为0．835和0．665。结论2型糖尿病和糖尿病肾病患者血清中miR．148b-3p水平显著升高。UMA与血清miR-148b-3p水平独立相关。血清miR-148b-3p有望作为糖尿病肾病诊断的潜在生物标志物。
- 李鑫范秋灵汪旭常圆圆马天魁陈桐杨莹李露露徐莉王海龙
- 关键词：糖尿病肾病糖尿病微小RNA生物标志物
- miRNA、内质网应激在糖尿病肾病中的作用被引量：4
- 2016年
- 据国际糖尿病联盟最新的统计数据报告,2014年全世界有3.87亿糖尿病患者,并预计在2035年将有53%的增长,其中中国占很大一部分。研究发现,有52.0%的糖尿病患者至少患有一种慢性并发症,21.4%的患者患有两种以上并发症。而糖尿病肾病（DN）则是糖尿病最常见的微血管并发症,其中有近40%的糖尿病患者均伴有DN。
- 赵雪范秋灵徐莉曹旭刘佳
- 关键词：微小RNA糖尿病肾病内质网应激
- 乌索酸及其同分异构体齐墩果酸治疗2型糖尿病及相关并发症机制的研究进展被引量：4
- 2019年
- 乌索酸及其同分异构体齐墩果酸是一种广泛存在于植物中的五环三萜类化合物。近来的研究逐渐揭示乌索酸和齐墩果酸对各种疾病的治疗作用,而在防治2型糖尿病及相关并发症中的疗效尤为显著,例如非酒精性脂肪性肝炎、肾病、视网膜病变、动脉粥样硬化等,并且随着研究的深入,乌索酸和齐墩果酸对疾病治疗作用的相关分子机制也逐渐得到揭示。随着全世界范围内2型糖尿病发病率的急速增加,2型糖尿病已经成为人们主要关注的疾病之一。靶向治疗2型糖尿病中改变的信号通路可以有效地防治糖尿病及其并发症,天然及衍生型的乌索酸和齐墩果酸是改善这些通路的潜在治疗药物。该研究从有关这些化合物的体内外试验中揭示以下发现:(1)改善胰岛素信号,减少高血糖症;(2)通过上调抗氧化剂减少氧化应激;(3)通过抑制促炎性因子减少炎症反应。该文通过讨论这些治疗作用的分子机制,为应用乌索酸和齐墩果酸防治2型糖尿病及相关并发症提供理论依据。
- 徐莉范秋灵
- 关键词：乌索酸炎症反应
- 短暂高糖通过组蛋白甲基化修饰诱导肾小球系膜细胞持续炎性反应
- 2017年
- 目的探讨短暂高糖培养后再恢复正常糖环境的大鼠肾小球系膜细胞是否持续释放炎性因子，及该过程是否与组蛋白甲基化修饰有关。方法大鼠肾小球系膜细胞株（HBZY-1）分为高糖组（25．0mmol／L葡萄糖）、高渗对照组（19．5mmol／L甘露醇＋5．5mmol／L葡萄糖）和正常对照组（5．5mmol／L葡萄糖）进行24h培养；随后各组更换正常糖培养基（5．5mmol／L葡萄糖）培养0、24、48、72h。分别提取各组细胞的蛋白、上清液以及总RNA。采用Western印迹检测组蛋白H3四号位赖氨酸单甲基化（H3K4mel）表达水平，实时荧光定量PCR检测核因子κB（NF—κB）的p65亚基、组蛋白甲基化转移酶set7／9的mRNA表达，ELISA检测上清中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、血管细胞黏附分子1（VCAM-1）的表达。结果（1）与正常对照组比较，高糖处理大鼠系膜细胞24h后set7／9mRNA表达和H3K4mel蛋白表达均上调（均P〉0．05）；恢复正常糖培养24、48、72h高糖组set7／9mRNA表达和H3K4mel蛋白表达逐渐降低（与0h高糖组比较，均P〈0．05）；恢复正常糖培养72h高糖组set7／9和H3K4mel的表达与正常对照组差异均无统计学意义（均P〉0．05）。（2）未恢复正常糖培养（0h）时高糖组大鼠系膜细胞NF-κBp65mRNA、MCP-1、VCAM-1的表达均高于正常对照组（均P〉0．05）；恢复正常糖培养24、48h和72h高糖组NF—κBp65mRNA、MCP-1、VCAM-1的表达均保持高表达，与0h高糖组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。以上各指标高渗组与正常对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论短暂高糖培养可诱导。肾小球系膜细胞组蛋白甲基化转移酶set7／9和组蛋白H3K4单甲基化的表达上调，并且在恢复正常糖环境后仍持续48h。同时短暂高糖培养促进肾小球系膜细胞NF—κBp65，炎性因子MCP-1、VCAM-1的表达持续高表达。提示高糖代谢记忆可能�
- 邓云蕾范秋灵汪旭曹旭徐莉刘佳赵雪王力宁
- 关键词：血管细胞黏附分子1趋化因子CCL2代谢记忆
