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王志永
作品数:
25
被引量:135
H指数:8
供职机构:
北京协和医院
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相关领域:
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刘彤华
北京协和医院
崔全才
北京协和医院
陈杰
北京协和医院
张雷
北京协和医院
李和伟
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1篇
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3篇
1997
5篇
1996
8篇
1995
6篇
1994
1篇
1993
共
25
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肺癌中Ki-ras癌基因突变的检测及其临床意义
被引量:3
1996年
肺癌中Ki-ras癌基因突变的检测及其临床意义张雷刘鸿瑞王志永张淑华我们用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测肺癌及邻近正常肺组织中Ki-ras基因第12密码子突变,以探讨Ki-ras基因突变在肺癌发生中的作用及其临...
张雷
刘鸿瑞
王志永
张淑华
关键词:
肺肿瘤
癌基因
基因突变
表达反义c-myc RNA的重组逆转录病毒载体对人胰腺癌细胞恶性表型的逆转作用
被引量:3
1996年
为研究表达反义c-myc RNA的逆转录病毒载体抑制靶基因的表达和翻译,使胰腺癌细胞恶性表型逆转的机理,利用pXT1逆转录病毒载体构建了一个能表达反义c-mycRNA的质粒,经病毒包装细胞PA317包装后,使之成为具有感染力的重组病毒。用该病毒感染人胰腺癌细胞系PC-2细胞,经G418筛选得到稳定的转化细胞系。Northern
李和伟
刘彤华
王志永
陈杰
崔全才
高洁
关键词:
反义RNA
逆转录病毒载体
一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法
被引量:2
1995年
一种提高重组逆转录病毒滴度的收集法李和伟,王志永,刘彤华(北京协和医院病理科北京100730) 为提高逆转录病毒介导的基因转移效率,高滴度的重组病毒是必要条件之一。影响包装细胞分泌产生重组病毒的因素很多,本文就提高病毒滴度方面进行了研究。培养基IMD...
李和伟
王志永
刘彤华
关键词:
逆转录病毒
滴度
实验室
重组病毒
用于PCR检测的病理标本处理方法
被引量:8
1994年
用于PCR检测的病理标本处理方法王志永,张雷,张淑华,刘彤华(北京协和医院病理科100730)目前在国内,聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术已逐步应用于病理诊断和辅助诊断中,并显示出良好的应用前景。病理标本中核...
王志永
张雷
张淑华
刘彤华
关键词:
病理标本
PCR
石蜡包埋组织DNA的提取
被引量:4
1993年
多年存档的常规福尔马林固定石蜡包埋的病理标本,可用聚合酶链反应(PCR)技术进行回顾性研究或检测,但模板DNA的质量直接影响PCR的效果。
李德春
王志永
刘彤华
王德田
关键词:
DNA
胰腺肿瘤和正常胰腺组织中c-Ki-ras第12密码子点突变
被引量:5
1994年
对2例正常人胰腺组织、7例人胰腺内分泌肿瘤、5例胰腺癌手术标本、3例胰腺癌细胞系、7例胰腺癌裸鼠移植瘤标本的DNA进行PCR扩增后,分别用斑点杂交和单链构象多态性技术对c-Ki-ras第12密码子.点突变进行检测。结果发现,仅胰腺癌标本存在高频率的c-Ki-ras第12密码子的突变(斑点杂交阳性率11/15,单链构象多态性为12/15)。单链构象多态性技术与斑点杂交技术相比具有方便快速的特点。
崔全才
王志永
陈杰
王德田
刘彤华
关键词:
胰腺肿瘤
癌基因
点突变
斑点杂交
用原位杂交技术检测舍格伦综合征唇涎腺组织内EB病毒DAN
被引量:3
1994年
应用原位杂交技术对石蜡包埋的28例舍格伦综合征和7例对照病例的唇涎腺组织中EB病毒的DNA进行了检测。EB病毒基因W片段核酸探针由同位素掺入的聚合酶链反应扩增产生。原位杂交结果发现,17例舍格伦综合征及2例对照的唇涎腺腺泡上皮内均有EB病毒DNA存在,而且舍格伦综合征病例唇涎腺的导管上皮及浸润的淋巴细胞内亦能检出EB病毒DNA。本研究结果进一步证明,EB病毒在舍格伦综合征的发病机理中起着重要作用。
王志永
李德春
王德田
刘彤华
关键词:
E-B病毒
原位杂交
干燥综合征
EB病毒感染及感染拷贝数与肺癌的关系
被引量:15
1995年
EB病毒与鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤等恶性肿瘤的发生密切相关,但与肺癌的关系目前仍不清楚。我们收集87例外科手术切除,同时含有肺癌及癌旁正常肺的石蜡包埋组织,用多聚酶链反应及斑点杂交技术对其中的EB病毒感染情况及感染的拷贝数进行检测。PCR检测结果:肺癌52例,对应癌旁肺组织39例EB病毒阳性,统计学上无显著差异;斑点杂交结果:肺癌38例,相应癌旁肺组织7例有EB病毒高拷贝感染,两者在统计学上存有非常显著的差异。结果提示:EB病毒在肺及肺癌组织中有较高的感染率,但肺癌组织中EB病毒感染拷贝数明显高于癌旁肺组织并有非常显著的差异;高拷贝数的EB病毒感染在肺组织细胞的恶性转化过程中可能起一定的作用。
张雷
刘鸿瑞
王志永
张淑华
王德田
关键词:
肺肿瘤
病因
一种改进的质粒DNA提取及回收方法
被引量:9
1995年
一种改进的质粒DNA提取及回收方法李和伟,王志永,刘彤华(北京协和医院病理科,北京100730)目前已有多种方法从细菌中提取质粒DNA ̄[1],其中最常用的是碱裂解法 ̄[2],该方法操作简便,所提取质粒DNA产量和纯度均较满意。我们在该方法基础上进行...
李和伟
王志永
刘彤华
关键词:
质粒
脱氧核糖核酸
单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因对人胰腺癌细胞的杀伤作用
被引量:3
1995年
构建了能表达单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(herpessimplexvirusthymidinekinase,HSV-TK)的逆转录病毒质粒pNTK,经病毒包装细胞PA317包装后成为具有感染力的重组病毒,用该病毒感染人胰腺癌细胞系PC-2细胞,经G418筛选得到稳定的转化细胞系。Northernblot杂交证实转化PA317细胞及转化的PC-2细胞中均有重组病毒的表达。pNTK转化的PC-2细胞能使无毒性前身药物acyclovir(无环鸟苷,ACV)或ganciclovir(GCV)具有明显的细胞毒性,细胞杀伤率>90%,而对照组PC-2细胞杀伤率<10%。同时还观察到“旁观者效应”现象。
李和伟
刘彤华
王志永
陈杰
崔全才
高洁
关键词:
胰腺肿瘤
单纯疱疹病毒
杀伤作用
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