李建农
- 作品数：3 被引量：82H指数：3
- 供职机构：安徽省肺科医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市科学技术委员会科研基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌链霉素耐药性的噬菌体检测技术研究被引量：7
- 2005年
- 目的建立结核分枝杆菌(结核菌)链霉素耐药性的噬菌体快速检测技术,并探讨其临床应用价值。方法应用分枝杆菌噬菌体感染结核菌建立链霉素耐药性的噬菌体检测技术,并对最佳测定条件进行探讨;将所建立的方法用于38株世界卫生组织药敏质控株和372株临床分离株链霉素耐药性测定,并与绝对浓度法和Bactec960药敏结果比较,对不符合菌株进行最低抑菌浓度(MIC)和rpsL耐药基因检测。结果链霉素终浓度5μg/ml作用24h、噬菌体108噬菌体形成单位/ml感染60min、杀毒剂5%室温作用5min为选择的检测条件。噬菌体法检测38株药敏质控株结果完全符合。372株临床分离株链霉素耐药性检测结果表明,如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.4%、特异性为91.0%、阳性预测值为81.7%、阴性预测值为98.9%、准确性为92.9%;如以Bactec960药敏结果为判断标准,则本法敏感性为97.2%、特异性为97.1%、阳性预测值为94.6%、阴性预测值为98.5%、准确性为97.1%。有22株噬菌体法药敏结果与常规药敏试验结果不符,其中的11株噬菌体法检测结果与MIC和rpsL耐药基因检测结果相同。结论噬菌体法检测链霉素耐药性快速、简便,具有很高的敏感性和特异性,可作为结核菌链霉素耐药性的快速检测方法。
- 胡忠义李建农靳安佳张莹蓉王洁崔振玲翁心华
- 关键词：噬菌体结核分枝杆菌耐药性测定噬菌体法链霉素BACTEC
- 噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌方法学研究被引量：65
- 2004年
- 目的 建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法 ,探讨最佳检测条件。方法 应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌 ,比较各种检测条件对测定结果的影响 ,并将所建方法用于痰标本检测 ,结果与BIOTECLab公司产品比较。结果 1× 10 9噬菌斑形成单位 (PFU) /ml的噬菌体 ,37℃感染 6 0min可检出 2 0 0～ 5 0 0条 /ml结核分枝杆菌。杀毒剂 10 0mmol/ml,室温作用 5min可完全灭活受试噬菌体。指示细胞浓度在 1× 10 8条 /ml时 ,形成的噬菌斑清晰 ,便于计数。加热灭活的细菌和指示细胞不被噬菌体感染。H3 7Rv、H3 7Ra和牛分枝杆菌参考菌株检测结果均为阳性 ,7种非分枝杆菌和 16种常见非结核分枝杆菌检测结果为阴性 ,4种非结核分枝杆菌 (偶然、胞内、金色、草分枝杆菌 )在高浓度时 (>1× 10 5条 /ml)检测结果为阳性。重复试验结果表明 ,本法批间和批内变异系数均<15 %。痰标本氢氧化钠 半胱氨酸液化方式的阳性检出率为 94 % (49/ 5 2 ) ,显著高于氢氧化钠液化结果的 6 2 % (32 / 5 2 ,χ2 =15 0 6 ,P <0 0 1) ;预培养 1d的阳性检出率为 6 5 % (5 1/ 78) ,显著高于未预培养结果的 4 0 % (31/ 78,χ2 =18 0 5 ,P <0 0 1)。临床标本检测结果表明 ,我们的试剂与进口试剂检测结果基本相同。结论 噬菌体?
- 胡忠义倪莲娣靳安佳董惠贤钟敏李建农翁心华
- 关键词：非结核分枝杆菌噬菌体痰标本阳性
- 吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌的噬菌体检测技术研究被引量：17
- 2006年
- 目的建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定吡嗪酰胺耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法应用建立的 PhaB 测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性,并与绝对浓度法的药敏结果进行比较,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和序列测定分析。结果 PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的最佳测定条件为 pH 值5.5、药物浓度200μg/ml、37℃作用48 h。用绝对浓度法检测108株结核分枝杆菌临床分离株,其中吡嗪酰胺敏感33株、耐药75株;用 PhaB 检测该108株结核分枝杆菌临床分离株,若以噬菌斑减少95%为判断标准,则吡嗪酰胺敏感32株,耐药76株。2种方法检测均为敏感的为28株,均为耐药的为71株,符合率为91.7%;2种方法检测结果不符的为9株,其中5株的 PhaB 结果与 MIC 结果相符,4株的结果不符,测序结果表明9株中有7株的 PhaB 结果与测序结果相符。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的敏感性为94.7%,特异性为84.8%,阳性预测值为93.4%,阴性预测值为87.5%,准确性为91.7%。结论 PhaB 测定吡嗪酰胺耐药性简便、快速,3 d 即可获得药敏结果,可作为吡嗪酰胺耐药性的快速筛选方法。
- 敖军平陈季武胡忠义李建农王洁王庆崔振玲张文宏翁心华
- 关键词：微生物敏感性试验分枝杆菌噬菌体吡嗪酰胺
