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毕艳红: 作品数：14 被引量：4H指数：1; 供职机构：昆明理工大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金云南省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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云南省猪戊型肝炎病毒全基因组扩增及进化分析被引量：1: 2015年; 目的对猪戊型肝炎病毒全长基因组进行扩增,分析其进化关系,为HEV的感染性克隆研究奠定基础。方法利用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)和RACE技术对猪粪便中HEV样品进行全基因组扩增,利用DNAStar和MEGA4.0软件进行同源性比较和进化树分析。结果 RT-nPCR方法扩增出HEV的5段目的基因序列和RACE技术扩增出HEV的5′和3′端,序列比对结果正确,HEV全长扩增成功。同源性分析显示其与新疆株(GU119961)同源性较高(96.1%)。系统进化树显示该病毒属于基因4型h亚型猪HEV。结论 HEV全基因组序列扩增成功,为深入研究HEV奠定基础。; 杨臣臣龙飞燕毕艳红李云龙王珏禹文海井申荣黄芬; 关键词：猪戊型肝炎病毒

携带EGFP基因的戊型肝炎病毒重组质粒的构建及其感染性的验证被引量：1: 2016年; 为了构建携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)重组质粒,转染人肺癌细胞A549细胞验证其感染性,PCR法分两段扩增HEV全基因组序列和EGFP基因序列,将EGFP报告基因插入到HEV ORF2基因下游,并克隆到体外转录表达载体pGEM-7Zf(+)上。然后利用脂质体转染法将重组质粒转入A549细胞,24h后在荧光显微镜下观察EGFP的表达;转染72h后,利用免疫荧光法检测HEV ORF2蛋白的表达。转染7d后将发生病变的A549细胞收集作为接种物,接种A549细胞验证携带EGFP的HEV-EGFP重组病毒的感染性。结果显示经酶切和测序鉴定携带EGFP的HEV重组表达质粒pGEM-HEV-EGFP构建成功;EGFP基因与HEV在A549细胞中可融合表达;携带EGFP的HEV重组表达质粒转染A549细胞7d后出现病变,并且连续传代3代仍具有感染性。本研究成功构建了携带EGFP的HEV全基因组重组质粒pGEM-HEV-EGFP,并成功感染A549细胞,为进一步研究HEV的复制机制及致病机理奠定基础。; 李云龙龙飞燕杨臣臣禹文海毕艳红王珏姜典财彭福春井申荣黄芬; 关键词：感染性

戊型肝炎病毒感染性克隆的构建及应用进展被引量：1: 2015年; 感染性克隆技术是在分子病毒学研究领域兴起一门新型技术,即在病毒的遗传物质水平研究其复制机制和致病机理,并拯救病毒。构建戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV）感染性克隆是对 HEV 实施反向遗传操作技术的前提和基础,文章综述了 HEV 感染性克隆的构建策略、方法及应用。; 杨臣臣龙飞燕毕艳红李云龙王珏曾韦锟井申荣黄芬; 关键词：戊型肝炎病毒感染性克隆病毒拯救

具有增强蛋白质表达活性序列ER3的筛选及其功能区域的初步鉴定: 2015年; 目的：利用构建的增强子样序列筛选载体,筛选在大肠杆菌中增强外源蛋白质表达的序列,并利用删除突变体初步鉴定其功能区域.方法：以氯霉素乙酰转移酶（CAT）基因序列与人乳头瘤病毒（HPV）主要衣壳蛋白基因 L1 的截短序列L11连接作为报告基因,从采集的样品中筛选增强子样序列,通过蛋白质表达来检测其增强活性,并通过构建删除突变体来初步鉴定其功能区域.结果：成功筛选到一条增强子样序列,可使检测载体氯霉素抗体提高11倍,融合蛋白表达水平提高2.26倍,其功能区域主要集中在1~265bp.结论：从收集的样品中成功筛选出一个增强子序列,能提高外源基因在大肠杆菌中的表达.; 崔成成毕艳红王应明李攀杨思达黄芬曾韦锟井申荣

病毒包涵体在病毒感染细胞中的作用: 2015年; 病毒包涵体(viral inclusion bodies,IBs)是病毒蛋白在胞质或核内的聚集体,许多病毒能够形成病毒包涵体。早期研究认为,病毒包涵体只是病毒复制及组装的重要起始位点,然而最近研究发现,一些病毒形成的病毒包涵体在宿主细胞抗病毒免疫反应中具有一定作用。本文主要就病毒包涵体在病毒感染细胞中的作用进行综述。; 崔成成毕艳红井申荣

戊型肝炎病毒感染孕妇的致病机制研究被引量：1: 2015年; 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是引起急性肝炎的主要原因之一。戊型肝炎通常是一种自限型疾病,但对孕妇和胎儿存在十分严重的危害,妊娠晚期孕妇感染HEV后死亡率高达25%,并极易造成胎儿早产、流产或死胎。目前HEV感染导致孕妇较高死亡率的原因还不清楚,本文将对HEV感染孕妇的流行病学及可能的致病机制作一综述。; 毕艳红杨臣臣崔成成井申荣黄芬; 关键词：戊型肝炎病毒孕妇胎儿高死亡率

人星状病毒非结构蛋白基因nsP1a/1真核表达载体构建及其在293T细胞中的表达: 2015年; 目的将人星状病毒非结构蛋白ns P1a/1基因连接到真核表达载体上,转染人胚肾上皮细胞48 h后检测其表达。方法设计特异性引物PCR扩增人星状病毒非结构蛋白ns P1a/1片段,分别插入真核表达载体pc DNA3.1(+)和p EGFP-N2载体,构建重组表达质粒pc DNA3.1(+)-ns P1a/1-His和p EGFP-N2-ns P1a/1。在转染试剂PEI的介导下将重组表达质粒分别转染293T细胞,转染48 h后分别在荧光显微镜下观察EGFP的表达以及通过Western blot检测ns P1a/1基因的表达。结果重组表达质粒pc DNA3.1(+)-ns P1a/1-His和p EGFP-N2-ns P1a/1构建成功;转染p EGFP-N2-ns P1a/1后48 h能够在荧光显微镜蓝色激发光下观察到较强的黄绿色荧光;转染pc DNA3.1(+)-ns P1a/1-His后48 h收集细胞进行Western blot检测,能够检测到ns P1a/1-His融合报告基因的表达。结论成功构建了人星状病毒非结构蛋白ns P1a/1基因真核表达质粒,并在人胚肾上皮细胞293T细胞获得表达,为进一步深入研究ns P1a/1在人星状病毒抵御宿主细胞抗病毒天然免疫中是否发挥作用奠定了基础。; 毕艳红崔成成黄芬井申荣; 关键词：293T细胞

锌指抗病毒蛋白ZAP对病毒的作用: 2015年; 锌指抗病毒蛋白（zinc finger antiviral protein，ZAP）是一种具有抗病毒活性的宿主细胞限制因子．ZAP能通过介导病毒mRNA的降解以及抑制翻译，从而抑制病毒的复制。ZAP能够抑制鼠白血病病毒、人类免疫缺陷病毒、埃博拉病毒、马尔堡病毒、辛德比斯病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒的复制。本文主要就ZAP的抗病毒作用作一综述。; 龙飞燕杨臣臣禹文海冯云毕艳红李云龙王珏井申荣黄芬; 关键词：抗病毒 MRNA降解

一种培养戊型肝炎病毒的方法: 本发明公开了一种戊型肝炎病毒在体外培养的方法；该方法通过对细胞转染miRNA-A6？24h后接种病毒，能够使病毒大量复制，利用Real-Time？qPCR和Western？Blot分析揭示了转染miRNA-A6可促进HE...; 黄芬杨臣臣姜典财毕艳红龙飞燕王珏李云龙井申荣; 文献传递

一种培养戊型肝炎病毒的方法: 本发明公开了一种戊型肝炎病毒在体外培养的方法，该方法通过添加孕晚期血清对流行病学调查分离到的HEV毒株在体外进行培养，能够使病毒大量复制，利用免疫荧光和Western？Blot分析揭示了孕晚期血清可促进HEV子代病毒大量...; 黄芬毕艳红杨臣臣赵显晨马天武井申荣; 文献传递