孙爱君
- 作品数：72 被引量：52H指数：5
- 供职机构：中国科学院南海海洋研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院战略性先导科技专项广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程理学化学工程更多>>
- 一种酯酶BSE00077及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种酯酶BSE00077及其编码基因和应用。本发明从芽孢杆菌(Bacillus？sp.)SCSIO？15121中开发得到新的酯酶基因bse00077，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，全长为741bp...
- 胡云峰黄锦龙梁甲元孙爱君张云
- 文献传递
- 一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Pseudonocardia antitumoralis)SCSIO 01299中克隆得到一个新的脂肪酶基因——脂肪酶基因lipase7，其核苷...
- 胡云峰曹莹莹邓盾孙爱君张云
- 文献传递
- 一种耐多种纯有机溶剂的脂肪酶及其编码基因和在多种高产酯类化合物合成中的应用
- 本发明公开一种耐多种纯有机溶剂的脂肪酶及其编码基因和在多种高产酯类化合物合成中的应用。本发明的脂肪酶SSL1970，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码所述的脂肪酶SSL1970的基因，其核苷酸序列如SEQ I...
- 胡云峰梁甲元张云孙爱君邓盾
- 文献传递
- 一个新颖南极微生物酯酶EST112-2的功能鉴定和在手性叔醇(S)-芳樟醇制备中的应用（英文）被引量：4
- 2018年
- 手性叔醇是合成药物和一些香料产品的非常重要中间体.芳樟醇是叔醇的一种,不同构型的芳樟醇具有不同的香气.因此如何研发合适的制备方法以获得高光学纯度的芳樟醇等叔醇是急需解决的技术问题.生物酶催化合成符合绿色化学的理念,但是由于叔醇化学结构中的空间位阻影响,使用生物酶催化的拆分反应制备高光学纯度的叔醇比较困难.对来自南极微生物的一个新的酯酶EST112-2进行了功能鉴定,并将其作为合成手性芳樟醇的生物催化剂.EST112-2可以通过不对称水解乙酸芳樟酯获得(S)-芳樟醇.对反应的p H、温度、共溶剂、底物浓度、催化剂用量以及反应时间等参数进行优化,EST112-2制备的(S)-芳樟醇的光学纯度大于66%,得率超过72%.EST112-2制备的(S)-芳樟醇的光学纯度要远远高于以往报道.
- 邓盾张云张云孙爱君赛克
- 关键词：生物催化动力学拆分
- 深海来源微生物乙酰酯酶的酶学性质鉴定及拆分制备D-乳酸甲酯被引量：2
- 2018年
- D-乳酸及其酯是重要的手性药物中间体和手性化工产品。从南海深海芽孢杆菌Bacillus sp.SCSIO15029克隆到一个乙酰酯酶基因bae02030,表达并鉴定该酶Bae02030的酶学性质。该酯酶的最适p H和最适温度分别为8.5和35℃,其对多种有机溶剂和表面活性剂具有较好的耐受性。乙酰酯酶Bae02030能够通过水解拆分消旋乳酸甲酯来制备光学纯的D-乳酸甲酯。通过对拆分反应进行优化,添加体积分数为60%的正庚烷能够改善乙酰酯酶Bae02030的光学选择性,所制备的D-乳酸甲酯的对映体过量值(e.e.s)超过99%,转化率(c)为56%。深海微生物来源的乙酰酯酶Bae02030作为生物催化剂在工业上制备手性药物中间体具有较好的应用潜力。
- 黄锦龙张继福胡洁莹关见留张云孙爱君胡云峰
- 关键词：深海微生物生物催化手性拆分
- 基于无机载体的先交联后吸附固定化脂肪酶的方法被引量：2
- 2019年
- 目的:使用双功能环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体固定化海洋脂肪酶,并探究固定化酶的酶学性质.方法:采用先交联后吸附的方法固定化海洋脂肪酶,交联和吸附分别进行单因素与正交实验结合的实验方案,并测定固定化酶的酶活力.结果:确定最佳交联条件:pH5.5,温度35℃,交联剂质量分数0.5%,交联时间2h;最佳吸附条件:温度40℃,载体质量1.5g,吸附时间5h.在此工艺条件下,所制备的固定化脂肪酶活力为1.89μkat,酶活力回收率72.89%.与游离的脂肪酶相比,所制备的固定化脂肪酶具有更好的温度、pH、储存及操作稳定性.结论:基于环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体,进行先交联后吸附固定化海洋脂肪酶的技术具有良好的工业应用前景.
- 林海蛟张云孙爱君黄锦煜胡云峰
- 关键词：硅藻土交联脂肪酶固定化
- 一种酯酶WDEst9及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种酯酶WDEst9及其编码基因和应用。本发明从囊孢菌NRRL18085中克隆到了一个酯酶基因WDEst9，全长为936bp，其编码的酯酶WDEst9共包含311个氨基酸。酯酶WDEst9可用于拆分手性2‑氯...
- 胡云峰王依龙徐珊李任强张云孙爱君
- 文献传递
- 聚乙二醇二缩水甘油醚交联氨基载体LX-1000EA固定化脂肪酶被引量：5
- 2020年
- 聚乙二醇二缩水甘油醚(PEGDGE)作为双功能环氧试剂,在实验中被用于交联氨基载体LX-1000EA共价固定化海洋脂肪酶,经过处理后的载体共价固定化脂肪酶具有良好的效果。实验经过单因素初筛和正交试验,得到最佳的交联及固定化条件为0.75%交联剂浓度、交联温度35℃、交联时间3h、载体量1.25g、pH9.0、固定化温度55℃、固定化时间1h。对LX-1000EAPEGDGE固定化酶与游离酶、戊二醛(GA)交联LX-1000HA-GA的固定化酶进行酶学性质的比较,发现LX-1000EA-PEGDGE固定化酶较游离酶最适反应温度未改变,与LX-1000HA-GA相同的是最适反应pH都由7.0提高为8.0。在最适条件中所测LX-1000EA-PEGDGE酶活达到78.84U/g,固定化改变了游离酶的酸碱耐受性,热稳定性和操作稳定性较游离酶和LX-1000HA-GA固定化酶均有提高。LX-1000EA-PEGDGE的热稳定表现优异,在60℃孵育3h后保留90%酶活;使用5次后仍能残余50%酶活;保存30天酶活仍保留60%。首次使用新型双环氧交联剂PEGDGE交联有机氨基载体共价结合固定化脂肪酶,为更有效的固定化方法提供了技术支持,同时也发现交联剂对固定化酶的性质存在较大影响。
- 朱衡张继福张云孙爱君胡云峰
- 关键词：脂肪酶固定化酶学性质
- 一种酯酶EstC11及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种酯酶EstC11及其编码基因和应用。本发明从嗜热芽孢杆菌Bacillus sp.CX01中克隆得到酯酶基因EstC11，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，全长为717bp，其编码的酯酶EstC11...
- 胡云峰公颜慧马三梅王永飞张继福张云孙爱君
- 文献传递
- 一个具有相反光学选择性的新颖海洋GDSL脂肪酶MT6用于(S)-1-苯基乙醇制备（英文）被引量：4
- 2016年
- 1-苯乙醇是一种重要的手性药物中间体,并且(S)-1-苯乙醇和(R)-1-苯乙醇均具有应用价值.怎样获得光学醇的1-苯乙醇是药物合成中的重要问题.传统的化学合成手段不仅反应过程复杂,而且反应条件剧烈,对环境污染严重,因此生物催化方法越来越受到重视.脂肪酶和酯酶以其出色的立体选择性和温和的反应条件而被广泛用于手性药物的拆分制备.但是之前的一些研究发现脂肪酶和酯酶大都对(R)-1-苯乙醇及其衍生物有选择性,而我们发现并鉴定的脂肪酶MT6的立体选择性则与这些脂肪酶/酯酶完全相反,具体体现在以下两个方面:(1)MT6能够特异地催化(S)-1-苯乙醇和乙酸异丙烯酯的转酯反应,生成(R)-1-苯乙醇;(2)MT6能够选择性地水解(S)-乙酸苏合香酯,生成(S)-1-苯乙醇.可见,利用MT6催化的转酯反应和水解反应可以巧妙地进行(S)-1-苯乙醇和(R)-1-苯乙醇的制备.MT6来源于深海放线菌Marinactinospora thermotolerans SCSIO 00652,属于GDSL家族脂肪酶第II类群,这一类群的脂肪酶绝大多数来自微生物.有关GDSL家族脂肪酶在手性拆分中的应用研究非常少.我们之前报道了MT6的克隆、表达、纯化及转酯拆分反应,本文重点考察了MT6通过水解反应制备(S)-1-苯乙醇的条件,优化了酶促水解拆分反应温度、有机共溶剂、pH、离子强度、酶用量、底物浓度、反应时间以及底物侧链长度等参数.研究发现,在反应体系中加入一定量的有机共溶剂能够大大提高产物(S)-1-苯乙醇的光学纯度,其中添加二氯甲烷获得的结果最为理想,可以将产物光学纯度从43%提高到89%,E值从2.84提高至22.82.经过优化,最佳反应温度为40°C,共溶剂二氯甲烷浓度为5%(体积分数),反应缓冲液为0.1 mol/L Tris-HCl(p H=7.0),酶用量为150 mg/m L,底物为15 mmol/L乙酸苏合香酯,反应时间控制在12 h.在此条件下,制备的(S)-1-苯乙醇的光学纯度可达97%,转化率可达28.5%,E�
- 邓盾张云孙爱君胡云峰
- 关键词：生物催化动力学拆分
