孙博
- 作品数：25 被引量：43H指数：3
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- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技重大专项吉林省高等教育教学研究课题更多>>
- 相关领域：生物学文化科学医药卫生农业科学更多>>
- 水痘-带状疱疹病毒高效价中和抗体的制备及应用
- 2023年
- 目的制备水痘-带状疱疹病毒(varicella-herpes zoster virus,VZV)高效价特异性免疫血清,用于水痘减毒活疫苗及带状疱疹减毒活疫苗质量控制。方法将高纯度重组gE糖蛋白分别与弗氏佐剂、氢氧化铝佐剂及MF59佐剂组合,免疫雄性家兔,每组2只,免疫后第56天,每只最大量采血(心脏或颈动脉)制备血清,与VZV混合进行中和反应后,接种至长满单层MRC-5株人二倍体细胞的6孔板中,孵育7 d,计数空斑数,检测免疫血清的中和效价和中和病毒能力;选择高中和效价和高中和病毒能力血清进行水痘减毒活疫苗及带状疱疹减毒活疫苗VZV(Oka株)工作种子批毒种鉴别试验和外源病毒因子检查。结果重组gE糖蛋白的多种组合免疫家兔后制备的免疫血清均具有中和活性,其中重组gE糖蛋白与弗氏佐剂组合免疫后制备的血清中和效价最高,为1:512,中和病毒能力可达240000 PFU/mL;制备的免疫血清用于VZV(Oka株)工作种子批毒种鉴别试验和外源病毒因子检查,结果均符合要求。结论重组gE糖蛋白可用于VZV高效价中和抗体制备,制备的高效价中和抗体适用于水痘减毒活疫苗及带状疱疹减毒活疫苗质量控制。
- 邵宏秋魏巍黄晓娜李景新魏国良张芸畅修华谦刘婷婷王宇迪孙博卢井才石亮
- 关键词：水痘-带状疱疹病毒水痘减毒活疫苗中和抗体
- 生命科学楼污水处理系统的设计与安装
- 2014年
- 通过分析吉林大学生命科学楼排放的废水的主要组成成分以及所含可能对环境造成影响的成分,根据相关要求,设计建造了吉林大学生命科学楼污水处理系统,并制定了相应的环保管理制度,确保污水污染物全面达标排放。
- 谷铁军孙博石玉华赵兴红孟祥玉张喜珍
- 关键词：废水一体化污水处理二氧化氯
- 从自然语言向SPARQL语言映射的歧义消解算法
- 2016年
- 针对计算机各语言间的无岐义映射问题,提出一种从自然语言向SPARQL语言映射过程中的歧义消解算法.该算法基于自然语言的特征,拟合知识丰富程度和文本相似度消解实体映射过程中的歧义性,拟合语义权重度和文本相似度消解关系映射过程中的歧义性.实验结果表明,该算法效果较好.
- 董立岩张高祥孙博郎一宁
- 关键词：歧义消解文本相似度
- 抗人PD-L1单克隆抗体的瞬转表达被引量：2
- 2018年
- 利用HEK293 6E细胞瞬转表达抗人PD-L1单克隆抗体.将HEK293 6E细胞无血清悬浮培养,筛选最佳生长培养基;考察HEK293 6E细胞的筛选表达培养基、DNA和PEI质量比及转染时细胞密度等转染条件,并对收获的抗体进行SDS-PAGE和ELISA鉴定.结果表明:在A无血清表达培养基中,以2×106个/mL的细胞密度和m(DNA)∶m(PEI)=1的条件转染,第4天收获抗体的产量最高,为170.9μg/mL;收获PD-L1抗体的重链分子量约为50 000,轻链分子量约为25 000.
- 史晶莹郭晶李雪董雪孙博吴丛梅殷玉和
- 关键词：抗体转染
- 貉细小病毒的原核表达及病毒样颗粒的制备被引量：2
- 2020年
- 为了利用大肠杆菌系统可溶性表达貉细小病毒(Raccoon dog parvovirus,RDPV)的衣壳蛋白VP2,获得RDPV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),试验首先通过密码子优化并合成RDPV VP2基因,构建重组表达质粒pET30a-VP2,转化至E.coli ER2566感受态细胞中;SDS-PAGE电泳检测目的蛋白RDPV VP2的表达形式;将重组表达质粒pET30a-VP2与分子伴侣质粒pTf16共同转入E.coli ER2566感受态细胞中,并优化最佳诱导表达条件;采用Western-blot技术鉴定目的蛋白的可溶性;经硫酸铵初级纯化后,电镜观察VLPs的形态,并采用血凝试验检测其免疫活性。结果表明:目的蛋白RDPV VP2得到了大量表达,并且大部分以可溶性形式表达,最佳诱导条件为30℃、0.1 mmol/L IPTG和2.0 g/L L-阿拉伯糖;犬细小单克隆抗体可以特异性识别目的蛋白RDPV VP2;30%硫酸铵沉淀初级纯化后,电镜观察可见到均一的、大小为24 nm左右的RDPV VLPs,其形态学结构与天然RDPV VLPs形态相似,血凝效价为2^23。说明分子伴侣可有效提高目的蛋白RDPV VP2的可溶性表达量,并成功制备出RDPV VLPs。
- 雷欢李希辰孙博吴丛梅殷玉和
- 关键词：原核表达分子伴侣病毒样颗粒可溶性表达
- 国家工程实验室疫苗工程技术平台建设与管理被引量：1
- 2018年
- 国家工程实验室主要任务是重点产业核心技术的攻关和关键工艺的实验研究以及研究产业技术标准、培养工程技术创新人才、促进重大科技成果应用等。良好的工程技术平台为实现上述任务提供了机制保障。通过对艾滋病疫苗国家工程实验室的工程技术平台建设思路与运行情况总结分析,从基础设施建设、技术平台与功能实验室的建设、关键技术创新与成果转化、管理运行机制等方面,阐述了国家工程实验室对疫苗工程技术平台建设与管理方面在关键核心技术攻关及在本领域促进协同创新方面的辐射和带动作用。
- 孙博谷铁军谷铁军
- 人腺病毒疫苗的研究进展
- 2021年
- 人腺病毒(human adenovirus,HAdV)是一种无包膜的双链DNA病毒,可经多种途径感染,引发多种疾病,目前尚无有效治疗药物。全球仅美国有市售HAdV疫苗,国内暂无该类产品上市,且在研究方面仍处于初步阶段。本文对HAdV疫苗的研发和应用作一综述。
- 席华龙顾韩雪(综述)孙博谷铁军
- 关键词：疫苗
- 人乳头瘤病毒52型病毒样颗粒制备及其生物活性被引量：1
- 2019年
- [目的]利用大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白,并获得HPV52病毒样颗粒(VLPs)。[方法]优化并合成HPV52L1基因,构建p ET-30a-52L1表达载体粒,转化大肠杆菌E. coli BL21 StarTM(DE3)。经IPTG诱导表达,阳离子交换层析纯化,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定,BALB/c小鼠免疫2次,初次后4w检测免疫血清中HPV52中和抗体滴度。[结果]获得纯度90%的HPV52L1蛋白,将获得的HPV52L1蛋白进行解组装和重组装形成VLPs,动态光散射观察到粒径约为70nm,透射电镜观察到50～60nm的均一VLPs,中和抗体滴度达25600。[结论]大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白,并经过一步柱层析纯化获得纯度达90%的L1蛋白,经解组装重组装获得粒径大小为50～60nm的VLPs,具有良好免疫原性。
- 郭晶刘伟董雪孙博吴丛梅殷玉和
- 关键词：L1蛋白可溶性表达
- 人乳头瘤病毒6型L1蛋白的原核表达及免疫原性评价被引量：1
- 2022年
- 目的确定原核表达系统中人类乳头瘤病毒6型(human papillomavirus 6,HPV6)L1蛋白的最佳表达条件,并对HPV6 L1 VLP免疫小鼠后产生的中和抗体水平进行评价。方法将密码子优化的HPV6 L1基因片段与原核表达载体pET30a(+)连接,构建重组表达质粒pET30a-6L1,在大肠埃希菌中表达HPV6 L1蛋白,并通过添加分子伴侣(TF、GroES-GroEL、DnaK-DnaJ-GrpE)筛选能够增加目的蛋白表达的最佳条件。将表达的HPV6 L1蛋白经密度梯度离心、阳离子交换层析后获得纯化蛋白,对其形态进行表征。将纯化的HPV6 L1 VLP免疫BALB/c小鼠,采用假病毒中和试验检测小鼠血清中和抗体水平。结果质粒pET30a-6L1经双酶切鉴定证明构建正确;添加TF分子伴侣时HPV6 L1蛋白表达量最高;HPV6 L1 VLP是呈均一的、直径45~65 nm的球状结构,与HPV6天然病毒颗粒的形态、大小相似;HPV6 L1 VLP初次免疫小鼠第8周,血清抗体水平达到峰值,为105以上。结论分子伴侣TF促进了HPV6 L1蛋白的可溶性表达,纯化后的目的蛋白免疫原性良好。本研究为后续各型别HPV L1蛋白表达工艺的探索提供了思路,也为下一步的中试扩大培养奠定了基础。
- 贺蕾包小华李相梅周晶莹褚彦飞孙博谷铁军
- 关键词：人乳头瘤病毒6型L1蛋白原核表达分子伴侣中和抗体
- CAN报文填充位长度仿真研究被引量：1
- 2017年
- 本文建立了CAN网络标准报文和扩展报文的报文填充位长度仿真模型,并通过该模型获得了CAN网络标准报文和扩展报文的填充位长度的分布律和数学期望。经对比分析得知:当报文长度相同时,CAN扩展报文的填充位长度大于CAN标准报文的填充位长度。该研究成果已成功应用于多款车型的CAN网络设计,用于预测各CAN网段的总线负载率,应用结果表明该仿真模型偏差<+/-0.5,仿真准确度较高,有效地提高了CAN网络开发的工作效率。
- 孙博张丽波
