诸葛福艳
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表达hCD4和hCCR5基因的骨髓间充质干细胞模型的建立被引量：1
- 2017年
- 目的研制一种能够表达hCD4和hCCR5基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)模型,以应用于Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)研究。方法构建PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR慢病毒载体,按最佳感染复数转染MSCs,荧光定量PCR检测hCD4和hCCR5的mRNA的表达,免疫印迹法检测MSCs中hCD4和hCCR5蛋白的表达,免疫荧光法检测hCD4和hCCR5荧光的表达;将建立的MSCs细胞进行HIV-1感染后,PCR检测HIV RNA的表达。结果 MSCs经转染慢病毒载体后,hCD4和CCR5mRNA凝胶电泳可见193bp和75bp的阳性条带,mRNA的qRT-PCR检测可见其表达升高(P<0.01);Western blot检测可见55.0×10~3(hCD4)和40.6×10~3(hCCR5)的阳性条带;免疫荧光成像可见存在CD4和CCR5的荧光表达,而空载慢病毒载体呈阴性。转染后MSCs细胞感染HIV-1后在培养细胞与上清液中HIV-1RNA均显著升高(P<0.05)。结论成功建立了高效表达hCD4/CCR5蛋白的骨髓间充质干细胞模型,具备对HIV-1易感的特性,可应用于HIV的发病机制、抗病毒、疫苗开发等研究。
- 李雅婧李雅婧诸葛福艳梁娟何金洋谭宁
- 关键词：骨髓间充质干细胞HIV-1细胞模型基因表达
- 表达hCD4和hCCR5基因的慢病毒载体的构建
- 2016年
- 目的:构建一种高效转染h CD4和h CCR5基因的慢病毒载体。方法:应用Gateway技术构建可表达h CD4和h CCR5的质粒载体PLA.Ex Bi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5,并进行酶切和测序鉴定,进行慢病毒包装,用q RT-PCR方法检测293T细胞中h CD4/CCR5的m RNA表达。将本慢病毒载体转染于小鼠白血病细胞L615,应用q RT-PCR检测细胞内h CD4/CCR5 m RNA的表达及对HIV-1的易感性。结果:成功构建PLA.Ex Bi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5质粒表达载体,包装成的慢病毒载体在293T细胞中具有h CD4/CCR5 m RNA水平的高表达(P<0.05);转染于L615细胞亦表现出h CD4/CCR5 m RNA水平的高表达(P<0.05),并具备了HIV-1入胞感染的特点。结论:成功建立h CD4和h CCR5基因双启动的慢病毒载体,可使目的细胞高效表达h CD4及h CCR5分子,对HIV-1宿主细胞的制备、HIV/AIDS的发病机制和抗病毒研究具有积极的意义。
- 李雅婧诸葛福艳梁娟何金洋谭宁曾常春
- 关键词：慢病毒载体HCCR5质粒
- p27在荔枝核总黄酮抑制人肝星状细胞LX2增殖过程中的表达及其意义被引量：5
- 2015年
- 目的:研究荔枝核总黄酮(total flavonoids of litchi,TFL)对人肝星状细胞LX2增殖的影响及其相关作用机制.方法:使用不同浓度(7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/m L)TFL处理LX2.采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,通过流式细胞仪分析各组细胞周期的分布,使用RT-PCR和Western blot技术测定细胞中p27基因m RNA和蛋白的表达.结果:TFL作用48、72 h可抑制LX2细胞增殖,且随着时间延长,抑制效果更加明显.T F L处理72 h后可测得L X2细胞被阻滞在S期,且明显上调p27基因的m RNA和蛋白的表达.结论:TFL抑制人肝星状细胞增殖并将其阻滞在S期,该作用机制可能与p27表达上调相关.
- 徐伶俐罗伟生谭宁徐庆徐宾诸葛福艳
- 关键词：荔枝核总黄酮人肝星状细胞增殖S期P27
- 基于慢病毒载体表达hCD4/CCR5分子的HIV易感细胞模型的研究
- 获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)主要是由于人体感染Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus typeⅠ，HIV-...
- 诸葛福艳
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征HIV-1病毒
- 氨基葡萄糖对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:研究氨基葡萄糖对人肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制。方法:CCK-8法检测人肝癌Hep G2细胞的增殖情况。流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。Western blot检测ERK及P-ERK蛋白的表达水平。结果:氨基葡萄糖可以抑制人肝癌Hep G2细胞的增殖,且该作用随着药物浓度的增加而逐渐增强。1.0mmol/L氨基葡萄糖作用72h可以使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。同时,2.0mmol/L及4.0mmol/L氨基葡萄糖处理72h可以使人肝癌Hep G2细胞发生凋亡。另外,随着药物浓度的增加,人肝癌Hep G2细胞中ERK蛋白的磷酸化水平逐渐降低。结论:氨基葡萄糖可能是通过降低ERK1/2蛋白的磷酸化水平影响细胞周期,从而抑制人肝癌Hep G2细胞的增殖并诱导其发生凋亡。
- 吴伟刚刘威龙诸葛福艳田圆刘琢冰陈心春周伯平
- 关键词：氨基葡萄糖肝癌细胞HEPG2增殖凋亡
- 一种骨髓间充质干细胞及其建立方法和用途
- 本发明涉及一种骨髓间充质干细胞，该细胞携带HIV-1受体及HIV-1协同受体。当HIV-1感染该BMSCs时，HIV-1上的囊膜蛋白gp120与HIV-1受体结合，使得HIV-1上的gp41暴露出来，暴露后的gp41与H...
- 曾常春聂广诸葛福艳李丽君
- 文献传递
- 一种骨髓间充质干细胞及其用途
- 本发明涉及一种骨髓间充质干细胞，该细胞携带HIV‑1受体及HIV‑1协同受体。当HIV‑1感染该BMSCs时，HIV‑1上的囊膜蛋白gp120与HIV‑1受体结合，使得HIV‑1上的gp41暴露出来，暴露后的gp41与H...
- 曾常春聂广诸葛福艳李丽君
- 文献传递
