目的观察根皮素抑制食管癌细胞系EC-109的作用及其可能作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法观察根皮素对食管癌细胞系EC-109增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测根皮素对食管癌细胞系的凋亡作用的影响;采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测根皮素对食管癌细胞系内B淋巴细胞瘤-2(B-cell leukemia-2,Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)蛋白表达的影响;采用Western blot法检测根皮素对食管癌细胞系细胞内Bax、Bcl-2、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERK)及磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylation of extracelluar signal-regulated kinase,p-ERK)表达的影响。结果根皮素明显抑制食管癌细胞增殖,并且成浓度依赖性。流式细胞仪检测提示根皮素促进食管癌细胞凋亡,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA及Western blot法提示,根皮素增加食管癌细胞内Bax蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot法提示,根皮素抑制细胞内p-ERK蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论根皮素明显抑制食管癌细胞增殖,其可能的机制是通过调节ERK信号通路调节细胞凋亡。
目的:研究黄连素(berberine,BBR)的抗食管癌作用及其机制。方法:给予50,100,200μmol/L BBR处理EC109细胞24 h,检测EC109细胞的活力及迁移能力。Western印迹检测pAkt,蛋白激酶B(protein kinase B,Akt),叉头转录因子O3(forkhead Class box O3,FOXO3),B淋巴细胞瘤-2(B-cel l lymphoma-2,bcl-2)及Bax的表达水平,特别是FOXO3的细胞核转位情况。建立裸鼠皮下肿瘤模型,腹腔注射BBR,明确BBR的抗食管癌作用。结果:BBR处理EC109细胞后,细胞活力下降,划痕实验检测细胞间距增大(P<0.05)。BBR降低了Akt的磷酸化水平,pAkt/总Akt下降;细胞质内的FOXO3下降;细胞核内的FOXO3升高;bcl-2表达水平下降;Bax则显著升高。在体研究发现BBR剂量依赖地抑制了肿瘤生长。结论:BBR能显著抑制食管癌EC109细胞的增殖、迁移以及在体增殖能力,该作用可能是通过抑制Akt磷酸化水平、增加FOXO3细胞核转位进而促进细胞凋亡来实现的。
