孙易
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
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- CCM3调控醋酸铅诱导人脐静脉内皮细胞迁移能力下降机制
- 2017年
- 目的观察脑海绵状血管瘤(CCM)致病基因CCM3基因敲除对醋酸铅诱导的永生化人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移能力的影响,并探讨可能的内质网应激(ERS)机制。方法以野生型CCM3(CCM3-WT)和基因敲除CCM3(CCM3-KO)HUVECs为实验细胞。(1)分别以浓度为0、10、50、200μmol/L醋酸铅处理2种基因型细胞24 h后,通过划痕实验观察细胞迁移情况。(2)取2种基因型细胞分别采用不同浓度(0、10、50、200μmol/L)醋酸铅处理24 h和以浓度为50μmol/L醋酸铅处理0、6、12、24、48 h后,以实时荧光定量聚合酶链式反应检测未折叠蛋白反应通路相关基因的mRNA相对表达水平,以蛋白免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)相对表达水平。(3)取2种基因型细胞分为铅染毒组和牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组,前者仅予浓度为50μmol/L醋酸铅处理24 h,后者在采用相同浓度的醋酸铅染毒前予内质网应激抑制剂TUDCA预处理细胞,通过划痕实验观察细胞迁移功能。结果 (1)CCM3-WT和CCM3-KO细胞的迁移率均呈随着醋酸铅染毒浓度的增加而下降的剂量-效应关系(P<0.05)。(2)除10μmol/L组CCM3-KO细胞GRP78外,10、50和200μmol/L组CCM3-KO细胞GRP78、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、转录激活因子4(ATF4)和CCAAT区/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的mRNA相对表达水平均分别高于同剂量组CCM3-WT细胞(P<0.05),且CCM3-KO细胞PERK和CHOP的mRNA相对表达水平呈随着醋酸铅染毒剂量的增加而增加的时间-效应关系(P<0.05);48 h组CCM3-KO细胞上述4种基因的mRNA相对表达水平均高于同时间点CCM3-WT细胞(P<0.05)。在醋酸铅染毒剂量为50μmol/L时,CCM3-KO细胞GRP78蛋白相对表达水平高于CCM3-WT细胞(P<0.05),且CCM3-KO细胞的GRP78蛋白相对表达水平呈随着铅染毒时间的增加而增加的时间-效应关系(P<0.05)。(3)TUDCA组细胞迁移率低于铅染毒组(P<0.05)。结论醋酸铅可能通过激活PERK-ATF4-CHOP信号通路启动ERS,从而降低HUVECs
- 陈静莉邢秀梅赵志强孙易高艳芳何云
- 关键词：铅细胞迁移脑海绵状血管瘤内质网应激人脐静脉内皮细胞
- 低铅暴露经线粒体途径促进CCM3基因缺陷诱导的血管异常增生
- 孙易何云
- 关键词：血管发育线粒体
- CCM3基因与低浓度铅暴露交互作用对小鼠胚胎成纤维细胞毒性的影响
- 由于铅的使用越来越广泛,对环境和人群健康的危害越来越大,所以铅污染依然是重大的公共卫生问题。CCM3基因是一种多功能基因,对细胞增殖、分化和凋亡均有重要影响,尤其对维持血脑屏障的正常功能具有重要作用。胚胎发育时期,低浓度...
- 苏晓琳邢秀梅赵志强陆垚孙易高艳芳何云
- 关键词：铅暴露胚胎成纤维细胞
- 文献传递
- 以线粒体DNA作为血管损伤生物标志物的研究进展被引量：2
- 2016年
- 线粒体DNA（mtDNA）拷贝数与很多人类疾病风险相关,比如糖尿病、癌症、神经退行性疾病、衰老、肾和肝脏疾病以及自身免疫疾病等。在多种人类病理条件下,mtDNA拷贝数降低可引起ATP生成降低并出现糖酵解增加,扰乱线粒体膜电位,引起线粒体功能失调。
- 孙易何云顾红艳刘耘
- 关键词：线粒体DNA生物标志物血管损伤DNA拷贝数自身免疫疾病线粒体膜电位
- 铅暴露工人外周血淋巴细胞遗传损伤与端粒长度的改变被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨铅暴露工人外周血淋巴细胞遗传损伤情况与端粒长度改变之间的关系。方法:以珠三角某蓄电池厂的21名铅暴露工人为铅暴露组,26名无铅接触史的工人作为对照组。针对工人开展问卷调查并采集肝素抗凝外周血。检测工人外周血中血铅浓度、淋巴细胞的彗星试验指标、胞质分裂阻滞微核试验指标以及相对端粒长度改变情况。结果:铅暴露工人的血铅浓度为(3.08±1.86)mg/mL,与对照人群(0.26±0.25)mg/mL相比明显升高(P<0.05)。彗星试验中,铅暴露组工人的慧星尾长高于对照组(P<0.05);胞质分裂阻滞微核试验中,暴露组工人双核微核率和微核细胞率均高于对照组(P<0.05);铅暴露工人的外周血相对端粒长度较对照人群缩短(P<0.05)。相关分析结果显示,胞质阻滞微核试验的指标中双核微核率、微核细胞率、核桥率与工龄呈正相关(rs分别为0.447、0.432、0.351,P均<0.05)。外周血相对端粒长度与工人工龄、血铅水平均呈负相关(r_s分别为-0.306、-0.394,(P均<0.05)。结论:铅暴露可致工人外周血淋巴细胞的遗传损伤以及相对端粒长度的缩短。
- 陆垚刘新霞邢秀梅赵志强欧晓燕苏晓琳孙易陈静莉申碧羚蒋骏何云
- 关键词：端粒长度铅暴露彗星试验
- 小鼠胎盘周细胞的原代培养及其在胎盘血管毒物筛查中的初步应用被引量：1
- 2016年
- 目的：建立小鼠胎盘周细胞的分离、培养方法并应用于胎盘血管毒物筛查研究。方法：将C57小鼠雌雄合笼受孕后,在小鼠妊娠的第18.5天,取胎盘,通过机械分离和组织消化法分离、培养小鼠胎盘周细胞;采用免疫荧光法鉴定细胞来源与纯度;采用MTS比色法检测胎盘周细胞的生长曲线。将胎盘周细胞分别暴露于0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00μmol/L的醋酸铅24 h后,用MTS法检测染毒后的细胞活力。结果：利用机械分离和组织消化法分离、培养后,小鼠胎盘周细胞可贴壁生长,呈多边形,表达特异性标志α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）。在暴露于6.25~100.00μmol/L醋酸铅24 h后,随着染毒剂量的增加,细胞的存活率逐渐下降,且各个剂量组之间的差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用机械分离和组织块消化法可以简单、快捷地获得高纯度的小鼠胎盘周细胞,并可以应用于铅等胎盘血管毒物的检测。
- 蒋骏孙易陆垚赵志强陈静莉赵和平吴赛高艳芳邢秀梅何云
- 关键词：原代培养Α-平滑肌肌动蛋白
- 微量全血彗星试验检测电子制造业不同工种人群DNA损伤被引量：2
- 2015年
- 目的:研究电子行业不同工种职业人群的DNA损伤情况,为确定健康危害预防重点提供依据。方法:选择珠三角某电子厂在职工人563名作为职业接触组,其中铅暴露组(n=167),异丙醇组(n=287),噪声组(n=39),铅+高温组(n=34),异丙醇+高温组(n=36);选取就业前体检工人作为对照组(n=90)。采集人体微量外周血进行彗星试验,运用倒置荧光显微镜拍摄彗星图片,并通过CASP彗星分析软件对彗星图片进行分析。结果:铅+高温组工人外周血的核DNA含量低于对照组(P<0.05),尾DNA含量、尾长和尾矩高于对照组(P<0.05);异丙醇+高温组工人外周血的核DNA含量低于对照组(P<0.05),尾DNA含量、尾长、彗星全长、尾惯量和尾矩高于对照组(P<0.05)。结论:本研究所选取的电子行业各工种工人均有明显的DNA损伤情况,尤以异丙醇+高温组工种最为严重,其次是铅+高温组工种,应引起职业病防治管理机构和厂方的特别关注。
- 欧晓燕刘新霞蒋骏陆垚赵志强冯简青孙易杨亚蕊崔栋陈静莉申碧羚邢秀梅何云
- 关键词：彗星试验血液DNA损伤
- CCM3基因缺陷对铅所致小鼠胚胎成纤维细胞遗传毒性影响的体外研究
- 2015年
- 目的探讨CCM3基因缺陷对醋酸铅所致小鼠胚胎成纤维细胞遗传毒性的影响。方法将C57雌鼠与CCM3基因敲除小鼠杂合雄鼠合笼后，取孕13．5d的胎鼠，原代分离培养胚胎成纤维细胞。基因分型后，野生型和CCM3基因缺陷型细胞分别给予6．25、12．50、25．00、50．00、100．00、200．00μmol／L醋酸铅处理，用MTS法检测细胞活性，并根据实验结果，选择6．25、25．00、100．00μmo]／L醋酸铅染毒，用双核阻滞法检测遗传毒性，用Westernblot法检测相关基因的蛋白表达情况。结果小鼠胚胎成纤维细胞经醋酸铅处理24h后，野生型细胞100．00μmol／L醋酸铅处理组（69．16±1．36）与对照组（100．00±2．33）相比，细胞活性下降了30％，杂合型细胞100．00μmo]／L醋酸铅处理组（87．16±5．50）与对照组（100±2．06）相比，细胞活性下降了13％，差异有统计学意义（F野生型=98．59，F杂合型=82．63，P值均〈0．001）。经醋酸铅处理48h后，野生型细胞100．00μmol／L醋酸铅处理组（51．99±5．62）与对照组（100．00±3．11）相比，细胞活性下降了50％，杂合型细胞100．00μmol／L醋酸铅处理组（66．33±4．06）与对照组（100．00±5．72）相比，细胞活性下降了35％，差异均有统计学意义（F野生型=82．63，F杂合型=36．86，P值均〈0．001）。双核微核实验结果显示．随着染毒剂量增加，两种基因型细胞的核分裂指数逐渐下降，双核细胞微核率呈逐渐升高趋势，野生型细胞对照组、6．25、25．00、100．00μmol／L剂量组的双核微核细胞率分别为29．6±2．2、47．3±6．6、55．5±9．1、66．8±3．5（／1000）；杂合型细胞的双核微核细胞率则分别为35．3±5．6、50．0±8．3、57．0±8．5、58．8±2．1（／1000）。Westernblot结果显示，野生型细胞100．00μmol／L醋酸铅处理组（0．70±0．03）的CCM3表达量是对照组（0．53±0．07�
- 苏晓琳邢秀梅赖关朝孙易赵志强陈静莉申碧羚刘新霞何云
- 关键词：铅小鼠胚胎成纤维细胞
