朱学武
- 作品数：10 被引量：53H指数：3
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家鲆鲽类产业技术体系建设项目国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 半滑舌鳎食欲素A体外重组表达及活性分析被引量：2
- 2016年
- 为了在蛋白水平上认识半滑舌鳎食欲素A(orexin A)的摄食调控作用及机制,利用原核表达载体pET32a成功构建了重组半滑舌鳎orexin A/pET32a质粒,转化至大肠杆菌BL21后经IPTG诱导获得了N端含6个组氨酸的半滑舌鳎orexinA重组蛋白。获得的重组蛋白大小为24.9 ku,32℃下用1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的52.8%,并主要分泌在上清液中。Western blotting免疫印迹表明,获得的orexin A重组蛋白可被6×His抗体特异性识别。Ni^(2+)-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的半滑舌鳎orexin A重组蛋白。下丘脑离体孵育实验表明,获得的orexin A重组蛋白能显著影响半滑舌鳎下丘脑NPY mRNA,orexin mRNA的表达水平和NPY肽的分泌,表明获得的重组蛋白具有生物活性。研究结果可为探究orexin A在半滑舌鳎摄食代谢中的作用机制及研制高效绿色的促摄食制剂提供基础资料。
- 李斌徐永江柳学周史宝王滨朱学武
- 关键词：半滑舌鳎食欲素原核表达生物活性
- 半滑舌鳎MCH2蛋白及其体外表达制备方法和应用
- 本发明涉及一种半滑舌鳎MCH2蛋白及其体外表达制备方法和应用，所述蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；所述蛋白氨基酸的序列为SEQ ID NO:2。所述半滑舌鳎MCH2蛋白的体外表达制备方法，它包括重组表达载体构建...
- 徐永江柳学周史宝王滨朱学武
- 文献传递
- 半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析被引量：2
- 2016年
- 根据半滑舌鳎黑色素聚集激素(MCH1)的c DNA序列设计特异性引物扩增成熟肽片段,利用原核表达载体p ET-32a成功构建了重组MCH1/p ET32a质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导可产生N端含6个组氨酸的重组蛋白。半滑舌鳎MCH1重组蛋白大小为29.9 ku,32°C条件下以0.2 mmol/L IPTG诱导6 h时目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的49.8%。Western blotting免疫印迹表明,MCH1重组蛋白可被6×His抗体特异性识别。经Ni2+-NTA亲和柱纯化,可获得高纯度的MCH1重组蛋白。采用垂体离体孵育方法测试蛋白活性,MCH1重组蛋白可有效刺激或抑制垂体MCH和MSH肽的分泌,MCH肽水平先上升后下降,在100 nmol/L达到峰值,MSH肽水平显著升高。随着外源MCH1重组蛋白浓度的增加,垂体MCH1和MCH2 m RNA表达都呈现先上升后下降的趋势,POMCa和PACAP m RNA表达都呈现明显下降趋势,而POMC-b、MCHR1、MCHR2、MITF基本没有变化,表明获得的半滑舌鳎MCH1重组蛋白具有调节垂体激素分泌和基因表达的生理功能。本研究可为研制半滑舌鳎无眼侧黑化调控的专用生物制剂提供理论与技术依据。
- 朱学武徐永江柳学周史宝王滨李斌
- 关键词：半滑舌鳎原核表达生物活性
- 池塘和工厂化养殖牙鲆肠道菌群结构的比较分析被引量：38
- 2015年
- 为研究池塘和工厂化养殖条件下牙鲆肠道菌群结构差异及其与饵料、水环境及底质等的关系,采用Mi Seq高通量测序技术和生物信息学分析手段,构建牙鲆肠道、养殖水体、饵料和池塘底泥等7个样品的16S rRNA基因测序文库,分析不同样品中的菌群组成和生物多样性。结果表明:池塘养殖牙鲆肠道(B1)中以厚壁菌门(30.49%)、变形菌门(19.16%)和梭杆菌门(11.11%)为主,其中芽孢杆菌属(27.66%)占绝对优势,弧菌属(0.16%)丰度最小;工厂化养殖牙鲆肠道(B5)中以变形菌门(44.31%)、厚壁菌门(11.57%)和放线菌门(4.79%)为主,其中不动杆菌属(10.37%)丰度最大,弧菌属(4.05%)相对B1丰度较高。牙鲆肠道优势菌群主要与营养代谢调节相关,同时有益微生物和有害微生物也是肠道菌群的重要组成部分。差异性和系统进化分析表明两种养殖条件下牙鲆肠道菌群结构与饵料中菌群关系密切,此外受养殖水环境中菌群影响较大。研究结果为今后牙鲆养殖专用高效微生态制剂的研制和养殖环境微生态调控技术构建提供理论依据。
- 李存玉徐永江柳学周杨洪军史宝史学营朱学武
- 关键词：牙鲆RRNA
- 半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析1
- 半滑舌鳎是一种暖温性近海大型底层鱼类,在中国沿海均有分布,是中国鲆鲽类养殖三大主导养殖种类之一,也是中国重要的资源增殖鱼种.有关半滑舌鳎生长、繁殖等方面的研究已经取得了诸多进展,支撑了中国半滑舌鳎养殖产业的快速发展.但是...
- 朱学武徐永江柳学周史宝王滨李斌
- 关键词：半滑舌鳎水产养殖基因重组生物活性
- 养殖鲆鲽类无眼侧黑化调控机制研究
- 本文以我国鲆鲽类主导养殖种类—半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)和牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,运用成熟肽克隆、原核表达、Western blott...
- 朱学武
- 关键词：半滑舌鳎牙鲆原核表达生物活性分子机制
- 半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)黑色素富集激素基因的克隆和表达被引量：4
- 2017年
- 为研究黑色素富集激素基因(MCH)表达调控与半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)无眼侧黑化性状的关系,通过分子克隆获得了半滑舌鳎pMCH2,通过NCBI获得了pMCH1 cDNA序列,分析了pMCH mRNA的组织表达特性,探索了脑垂体和皮肤中的p MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系。结果显示,pMCH1 cDNA序列长476 bp,编码134个氨基酸,与鲽形目、鲤形目和鲈形目鱼类的pMCH1氨基酸聚为1个进化分支。pMCH2 cDNA序列全长为626 bp,编码147个氨基酸,与鲽形目和鲀形目鱼类的pMCH2氨基酸聚为1个进化分支。2种MCH mRNA在垂体中表达量最高,同时,MCH1 mRNA在除肌肉外的其他组织中均可检测到表达;MCH2 mRNA在脑、有眼侧皮肤、无眼侧正常皮肤、性腺和鳃组织中也可检测到较高表达。MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系分析显示,脑垂体和皮肤中MCH1 mRNA表现出相似的表达变化趋势,都是10%黑化组的表达量最高,而后随黑化程度加大显著降低。对于MCH2而言,无眼侧正常鱼和无眼侧50%黑化鱼的脑垂体中都具有较高的MCH2 mRNA表达水平,但在无眼侧10%黑化组和无眼侧80%黑化组,其表达水平显著降低。皮肤中MCH2表现出随黑化程度加大而显著升高的趋势。本研究结果可为认识MCH基因与半滑舌鳎无眼侧黑化性状的表达调控关系提供基础资料。
- 徐永江朱学武柳学周史学营史宝王滨李斌
- 关键词：半滑舌鳎
- 池塘养殖牙鲆(Paralichthysolivaceus)无眼侧体色黑化消褪机理被引量：6
- 2017年
- 针对池塘养殖牙鲆(Paralichthys olivaceus)无眼侧体色黑化消褪的现象,本研究从形态、血清和mRNA水平上对其生理学机制进行了研究。光镜观察显示,无眼侧消褪区域的黑色素细胞数量显著少于有眼侧和无眼侧黑化区域(P<0.05),电镜观察发现,无眼侧消褪区域皮肤中黑色素颗粒模糊,黑色素细胞中色素体存在凋亡现象。无眼侧黑化区域消褪过程中,鳞片类型经历了由栉鳞—弱栉鳞—圆鳞转变的过程,栉鳞上硬棘数量也随之减少。无眼侧黑化消褪的牙鲆血清中的黑色素聚集激素(MCH)肽含量显著高于无眼侧正常和无眼侧黑化的牙鲆(P<0.05),但无眼侧体色黑化的牙鲆血清中的黑色素细胞刺激激素(MSH)肽含量显著高于其他2种类型的牙鲆(P<0.05)。基因表达分析显示,无眼侧黑化消褪鱼垂体MCH mRNA表达水平显著高于无眼侧黑化鱼(P<0.05),而垂体POMC1 mRNA表达水平显著低于无眼侧黑化鱼(P<0.05),但都与无眼侧正常鱼无显著差异。研究结果可为阐释池塘养殖牙鲆无眼侧体色黑化调控机制提供理论支持。
- 朱学武徐永江柳学周史宝王滨
- 关键词：牙鲆色素细胞基因表达
- 半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis)消化道显微与超微结构被引量：2
- 2017年
- 采用解剖学、组织切片、电镜观察和2种染色技术研究了半滑舌鳎(Cynoglossus semilavis)消化道的组织结构特征。半滑舌鳎消化道可分为口咽腔、食道、食道胃、前肠、后肠5部分,观察了各部分消化道的显微和超微结构,测定了消化道各部分的黏膜褶皱数、黏膜褶皱高度、肌肉层(纵肌和环肌)厚度、黏液细胞相对密度等指标。结果显示,半滑舌鳎不具备结构特征明显的胃,摄食后,食道后部与肠道连接部形成一个囊状膨大结构,称之为食道胃;食道前部开始出现杯状黏液细胞,整个食道以Ⅲ型黏液细胞为主,食道胃中黏液细胞以Ⅲ型为主,前肠黏液细胞以Ⅳ型为主,后肠黏液细胞以Ⅱ型为主。研究结果为认识半滑舌鳎消化与吸收生理机制及研制人工养殖用饲料提供参考资料。
- 李斌柳学周徐永江史宝朱学武
- 关键词：半滑舌鳎消化道组织学
- 半滑舌鳎无眼侧黑化性状与黑色素富集激素基因表达调控的关系
- 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为暖温性近海大型底层鱼类,中国近岸海域均有分布,以渤海、黄海为多,是一种理想的增殖放流和人工养殖种类,现已成为中国鲆鲽类三大主导养殖种类之一.近年来,随着养殖业的发...
- 柳学周朱学武徐永江史学营史宝王滨李斌
- 关键词：半滑舌鳎水产养殖基因调控
