王海波
- 作品数：16 被引量：51H指数：4
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
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- 南蛇藤茎提取物对人胶质母细胞瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响及机制被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨南蛇藤茎乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)抗人胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖和凋亡作用,研究COE抗肿瘤的分子机制,为寻找新的治疗胶质母细胞瘤药物提供依据。方法:以人胶质母细胞瘤细胞株U251为研究对象,设空白组和COE组,应用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]比色法观察COE对细胞活力的抑制作用;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxy uridine,Brd U)标记检测COE对U251细胞增殖的影响;Annexin V/碘化丙啶(PI)双标法检测COE对U251细胞凋亡的作用;透射电镜下观察经COE干预后U251细胞超微结构变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测COE对凋亡标志基因B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,COE能够明显抑制U251细胞的增殖(P<0.05);诱导U251细胞的早期凋亡,电镜下可见到凋亡小体,影响并改变U251细胞超微结构;COE能促进Caspase-3,Bax蛋白表达,降低Bcl-2,Bcl-2/Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:COE能有效抑制胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制与调节Bcl-2和Caspase-3表达有关。
- 顾昊王海波冯俊钱亚云金凤陈珏史有阳陆松花徐佩刘延庆
- 关键词：胶质母细胞瘤U251细胞株透射电镜
- 南蛇藤提取物通过调控基质金属蛋白酶组及其抑制因子抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的研究被引量：21
- 2016年
- 目的探讨南蛇藤提取物(COE)对人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和转移的影响及其分子机制。方法 MTT法检测COE对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测COE对SGC-7901细胞侵袭和转移能力的影响。Western blotting检测经COE作用后的SGC-7901细胞中金属基质蛋白酶(MMPs)MMP2、MMP9和金属基质蛋白酶抑制因子(TIMPs)TIMP1、TIMP3的蛋白水平。RT-PCR检测经COE作用后的SGC-7901细胞中MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3的m RNA表达情况。结果 Transwell实验显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞穿膜数明显减少并呈一定的浓度依赖性。Western blotting结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞,MMP2、MMP9蛋白的表达水平明显降低,而TIMP1、TIMP3蛋白表达水平明显上调。RT-PCR结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞中MMP2和MMP9的m RNA水平有轻微升高趋势,而TIMP1和TIMP3的m RNA水平明显大幅上调(P<0.001)。结论 COE能明显抑制人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP2、MMP9蛋白水平直接相关。而其作用的实现,很可能是通过直接上调TIMP1和TIMP3的m RNA转录水平从而提高TIMPs蛋白表达水平实现的。
- 王海波顾昊赵雪煜冯俊钱亚云杨林金凤史有阳陆松花刘延庆
- 关键词：南蛇藤胃癌金属基质蛋白酶
- 金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响被引量：7
- 2018年
- 目的：探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法：体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组（0.1,0.2,0.4,0.8 g·L-1）,空白组和5-氟尿嘧啶（5-FU）组,采用噻唑蓝（MTT）比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率（IC50）;采用细胞侵袭（transwell）小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素（E-cadherin）,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达情况。结果：金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性（P〈0.05）;金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性（P〈0.05）;与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系（P〈0.05）。结论：金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。
- 李丹金凤陶丽倪腾洋王海波冯俊朱光钱亚云丁岩冰Masataka Sunagawa刘延庆
- 关键词：金龙胶囊迁移基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- 南蛇藤提取物对人食管鳞癌TE-8细胞凋亡的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨南蛇藤提取物对人食管鳞癌TE-8细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:MTT法检测不同质量浓度的南蛇藤提取物作用于TE-8细胞24、48h后细胞的增殖情况。南蛇藤提取物作用TE-8细胞24h后,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;JC-1试剂盒检测线粒体膜电位的损伤;TUNEL法检测DNA损伤情况;Western blot法检测丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白的表达情况。结果:南蛇藤提取物能明显抑制人食管鳞癌TE-8细胞的增殖,呈时间及浓度依赖;南蛇藤提取物能促进细胞凋亡,降低线粒体膜电位,诱导细胞内DNA损伤,阻断MAPK信号通路的表达,呈浓度依赖。结论:南蛇藤提取物能够抑制TE-8细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与南蛇藤提取物抑制MAPK信号通路的表达有关。
- 金凤刘延庆钱亚云陈珏顾昊戴小军王萱怡王海波史有阳陆松花李丹
- 关键词：南蛇藤提取物食管鳞癌凋亡MAPK信号通路
- 南蛇藤中萜类化合物雷酚萜促进胃癌细胞的凋亡研究
- 2023年
- 目的探究抗肿瘤中药南蛇藤中的二萜类化合物雷酚萜(Triptonoterpene)对胃癌细胞凋亡的影响。方法细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测雷酚萜对胃癌细胞增殖的影响;观察雷酚萜对胃癌细胞形态变化的影响;凋亡实验评估雷酚萜促进胃癌细胞凋亡的情况;线粒体膜电位检测实验(JC-1)检测雷酚萜对胃癌细胞膜电位的影响;流式细胞仪检测雷酚萜对胃癌细胞内活性氧的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)用来检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)家族重要蛋白的表达以及细胞色素C(Cytochrome C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达。结果雷酚萜干预BGC-823细胞24 h和48 h后,细胞的增殖明显减慢;与对照组比较,雷酚萜高浓度组细胞内出现大量空泡,且呈蜂窝状;雷酚萜组胃癌细胞的凋亡率显著增加而且被PI染色的数量明显增多;同时雷酚萜组细胞中表示JC-1聚集的红色荧光减弱,表示JC-1单体的绿色荧光增强;另外雷酚萜组细胞内ROS的荧光强度显著增高;与对照组比较,雷酚萜干预胃癌细胞后,胞浆中Cytochrome C的表达增高,细胞中Bcl-2和B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)蛋白的表达降低,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3和cleaved Caspase-3蛋白的表达升高。结论雷酚萜对胃癌细胞具有显著的促凋亡作用,很可能是南蛇藤中抗肿瘤有效成分的重要组成成分之一。
- 欧诗雅于彦威罗园园胡文杰李沈忱何正飞戴小军王海波王海波
- 关键词：萜类化合物南蛇藤胃癌凋亡
- 膜联蛋白A5在肿瘤中的作用及以其为靶点的基础研究被引量：3
- 2017年
- 膜联蛋白A5作为关键蛋白参与了肿瘤细胞的侵袭转移、免疫耐受等过程的多个环节，并且其对肿瘤同时兼具促瘤和抑瘤作用，因此以膜联蛋白A5作为分子靶点的基础研究颇受关注。膜联蛋白A5对磷脂酰丝氨酸具有高度亲和力，其有望成为新的肿瘤诊疗标志物及抗肿瘤靶点。
- 倪腾洋王海波刘延庆
- 关键词：膜联蛋白A5肿瘤侵润肿瘤转移信号传导免疫耐受
- 中药联合西药致不良反应情况分析
- 2013年
- 目的:探讨不合理应用中药联合西药致不良反应的原因。方法:自2012年2月至2012年8月,我院接诊(笔者记录)中药联合西药用药不当患者37例,统计并归纳患者的用药途径及不良反应类型,同时分析不良反应发生的原因。结果:引发中药联合西药不良反应的用药途径主要是自选用药和不按医嘱用药,均为17例。究其原因,主要是药源性疾病等。结论:合理选择中药联合西药进行临床治疗,具有重要的理论和实践意义。
- 王海波花佳楠王彪
- 关键词：联合用药药物不良反应
- 茯苓酸通过Smads调控MMP/TIMP平衡抑制肾癌细胞侵袭转移的机制被引量：3
- 2023年
- 目的:探讨茯苓中的三萜类化合物茯苓酸(PA),对肾癌侵袭转移的作用及机制。方法:采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)试剂盒检测PA(0、20、40、80、160μmol·L^(-1))对细胞存活率的影响,并筛选PA浓度用于后续实验。采用克隆形成实验评估PA(0、20、40、80μmol·L^(-1))对细胞增殖的作用。细胞黏附实验用来观察PA(0、20、40、80μmol·L^(-1))对细胞黏附能力的效果。划痕实验和Transwell侵袭实验用来检测PA(0、20、40、80μmol·L^(-1))对细胞侵袭转移的影响。高内涵成像技术进一步动态观察和验证PA(0、20、40、80μmol·L^(-1))对细胞运动的抑制作用。PA(0、20、40、80μmol·L^(-1))对细胞中侵袭转移相关蛋白基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制因子(MMP/TIMP)和相关通路关键蛋白Smads表达的影响通过蛋白免疫印迹法(Western blot)来检测。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,PA组细胞存活率显著降低(P<0.01),24 h时PA对ACHN细胞的半数抑制浓度(IC50)为70.42μmol·L^(-1)。克隆形成实验显示,与空白组比较,PA组细胞克隆群数目显著减少(P<0.01)。细胞黏附实验显示,与空白组比较,PA组细胞的黏附数量显著减少(P<0.01)。划痕实验表明,与空白组比较,PA组细胞的划痕愈合率降低(P<0.05,P<0.01)。Transwell侵袭实验显示,与空白组比较,PA组细胞的穿膜数量减少(P<0.01)。高内涵成像技术表明,与空白组比较,PA组细胞累计迁移距离更短(P<0.01)。Western blot结果表明,与空白组比较,PA组MMP-2、MMP-9蛋白的表达降低(P<0.01),TIMP-1蛋白的表达升高(P<0.01)。此外,与空白组比较,PA组Smad2、Smad3蛋白的表达降低(P<0.01)。结论:PA可抑制肾癌细胞的增殖、侵袭转移,其机制可能是通过Smad2/3调控MMP/TIMP的稳态平衡。
- 罗园园冯心怡褚泽文朱虹刘延庆王海波
- 关键词：茯苓酸SMAD2/3
- 交叉对话信号的分子绝缘——对创新药物设计的思考被引量：1
- 2017年
- 生物信号通路的交叉对话(cross-talk)是指众多信号通路共享同一关键组分,形成一种蝴蝶领结(bow-tie)样的网络拓扑结构。交叉对话对终末基因的调节表现出功能冗余、协同及拮抗,同时又要避免通路之间互相串扰带来的信号噪音或信号溢出,进化出一套维持细胞对不同外界应激产生特异性应答的绝缘(insulation)机制,对维持细胞内稳态有着非常重要的生物学意义。交叉对话及其分子绝缘机制提示:对话分子对细胞命运调控的两重性,要求实现靶向对治疗有利的对话分子而避开对治疗不利的对话分子;对话分子以大分子复合物为功能载体,在信号绝缘中对话分子互作界面构象的高度可塑性,设计开展药物结合与药理活性关联性研究。因此,以信号通路的交叉对话及其分子绝缘机制指导创新药物设计,对解决当前药物研发的瓶颈和临床困境具有重大的指导意义。
- 陶丽金凤王海波钱亚云孙云陆茵刘延庆
- 关键词：信号转导药物设计
- 南蛇藤提取物通过破坏线粒体结构促进胃癌AGS细胞凋亡的机制被引量：2
- 2022年
- 目的观察南蛇藤提取物(COE)对胃癌细胞的抑制作用,探讨COE通过影响线粒体结构和功能促进胃癌凋亡的一种全新的作用机制,为南蛇藤的进一步开发和临床应用提供实验依据。方法5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)染色联合流式细胞实验用来检测不同质量浓度COE(20、40、80 mg·L^(-1))对胃癌细胞增殖的影响。通过膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)染色实验联合流式细胞术检测COE对胃癌细胞凋亡的影响,用JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测COE对胃癌细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,用透射电镜检测COE处理后的胃癌细胞线粒体微观结构的变化,包括线粒体膜完整性和内部嵴的变化。COE处理后,Western blot检测胃癌细胞线粒体标志蛋白超氧化物歧化酶1(SOD1)、电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)、抗增殖蛋白1(PHB1)和热休克蛋白60(HSP60)水平的变化。结果Brdu染色显示,与空白组比较,COE组(40、80 mg·L^(-1))胃癌细胞的增殖比例明显下降(P<0.05)。AnnexinV-FITC染色显示,与空白组比较,COE组(40、80 mg·L^(-1))胃癌细胞的凋亡数量明显增加(P<0.05)。JC-1线粒体膜电位检测显示,COE处理后组胃癌细胞的线粒体膜电位水平明显降低。Western blot结果显示,与空白组比较,COE组(20、40、80 mg·L^(-1))促进胃癌凋亡的相关蛋白Bax和Caspase-3表达明显增加(P<0.05,P<0.01),COE组(40、80 mg·L^(-1))胃癌细胞凋亡抵抗相关蛋白Bcl-2和Bcl-xL表达显著降低(P<0.01)。透射电镜结果显示,与空白组比较,COE组胃癌细胞的微观结构发生了明显变化,细胞膜内出现了很多空泡,线粒体结构出现破坏,线粒体内出现空泡。Western blot结果显示,与空白组比较,COE组(20、40、80 mg·L^(-1))胃癌细胞中与应激反应有关的蛋�
- 王海波罗园园冯心怡倪腾洋褚泽文朱淼刘延庆
- 关键词：南蛇藤提取物线粒体胃癌凋亡
