毕胜利 作品数:42 被引量:104 H指数:6 供职机构: 北华大学 更多>> 发文基金: 吉林省教育厅科研项目 国家自然科学基金 吉林省科技厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 轻工技术与工程 水利工程 更多>>
中老年肝细胞癌患者乙型肝炎病毒X基因检测与分析 2007年 目的检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染后肝细胞癌(HCC)患者血清HBVX基因,并与慢性乙型肝炎、肝硬化患者HBVX基因检出率对比分析。方法在微孔板上包被HBVX基因片段的捕获探针;PCR扩增被检标本中目的片段,其引物用Bio-Ⅱ-dUTP修饰,在微孔板上杂交后用链霉亲和素碱性磷酸酶系统显色。结果该方法检测HBVX基因灵敏,特异;乙型肝炎后HCC患者HBVX基因检出率明显高于慢性乙型肝炎组和肝硬化组。结论检测HBVX基因对HCC具有辅助诊断价值。 宋玉国 张吉林 黄建文 熊英 毕胜利关键词:乙型肝炎病毒 X基因 肝细胞癌 胶体金免疫层析技术同步检测甲、戊型肝炎病毒IgM抗体的研究 被引量:7 2002年 目的:建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgM抗体的方法。方法:采用胶体金标记鼠抗人IgM单克隆抗体,制成免疫层析测试条,血清中甲、戊型肝炎的特异性抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移植与膜上固相包被的抗原(HAAg,HEAg),抗体(羊抗鼠IgM)结合形成肉眼可见的红色线条。结果:自制的GIA测试条与EIA对比检测血清标本188份,各单项指标抗-HAV IgM,抗-HEV IgM两法总符合率依次为97.9%,98.4%,检测灵敏度可达2μg/L,结论:用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性抗体的GICA测试条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强,灵敏度高,操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备。 曲萌 毕胜利 董志恒关键词:胶体金 免疫层析 新型检测方法的研究-流式细胞术检测PBMCs内2-5AS方法的建立及其临床应用价值的研究 毕胜利 宋玉国 黄建文 张吉林 李迎 夏凤国 石宏 靳云霞 熊英 王艳双 王玉辉 佟玉华 卢尔夫 庞伟 技术说明:利用基因工程技术表达、纯化抗原多肽并制备其单克隆抗体,将制备的抗体用荧光素进行标记,通过流式细胞仪检测PBMCs中细胞内2′,5′-寡腺苷酸合成酶(2-5AS)。应用前景:病毒感染性疾病,如乙肝、丙肝、流感等,...关键词:关键词:病毒感染性疾病 干扰素治疗 流式细胞仪 HIV-1感染者CD4^+T细胞受体基因多样性特点及其与病毒载量的相关性 被引量:1 2011年 目的分析HIV-1感染者CD4^+T细胞受体(TCR)基因的多样性特征及其与病毒载量的相关性。方法应用抗CD4单克隆抗体从25份HIV-1感染者和10份HIV-1阴性对照样本外周血单个核细胞(PBMC)中分离CD4^+T细胞,提取细胞总RNA,然后通过逆转录及巢式多聚酶链反应(nested-PCR)对TCR22个vβ基因家族的互补决定区3(CDR3)进行扩增,利用AB13700测序仪对扩增的PCR产物进行扫描,定量分析HIV-1感染者TCRCDR3区多样性变化特征及其与病毒载量的相关性。结果HIV-1感染者CIM^+T细胞TCRCDR3区平均D(distance)值显著高于正常对照组(P〈0.05),TCR Vβ基因各家族CDR3长度谱型成寡克隆分布,TCRCDR3区的紊乱与病毒载量呈正相关(r=0.494,P〈0.05);HIV-l感染引起TCR多样性的改变不仅表现在不同vβ基因家族上,而且也表现在CDR3长度上,其中感染者VB8、V1322、Vβ23基因家族的变化与正常人差异有统计学意义。结论HIV-1感染能引起CD4^+T细胞TCR基因多样性的减少及高斯(Gaussian)分布的破坏,TCRCDR3区的紊乱与病毒载量呈正相关。 高占 任国良 宋玉国 贾明明 郑扬 赵全壁 邵一鸣 毕胜利 洪坤学关键词:CD4^+T淋巴细胞 T细胞受体 互补决定区3 胃黏膜细胞DNA倍体分析及细胞膜Fas表达研究进展 被引量:1 2003年 Fas是主要存在于细胞膜上的一种能诱导细胞凋亡的糖蛋白.而DNA倍体分析可反映细胞增殖状态.检测DNA倍体和Fas抗原有望在胃癌的早期诊断、治疗、预后、监测、复发等方面发挥重要作用. 黄河 宋玉国 毕胜利关键词:FAS DNA倍体 DNA指数 胃黏膜细胞 2′,5′-寡腺苷酸合成酶的表达及其单克隆抗体的制备与应用 2008年 目的用基因工程技术表达2′,5′腺苷酸酶(2-5AS)蛋白为抗原制备单克隆抗体,供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用。方法将2-5AS基因片段插入到带有His.Tag的pET-30a(+)质粒,并转化到宿主菌E.coli.BL21(DE3),ITPG诱导表达,Ni柱纯化,获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体。结果插入片段酶切测序证实,插入的片段与目的片段序列相符;Ni柱纯化过程中可见目的蛋白的洗脱峰;经Tricine-SDS-PAGE电泳,Western Blotting鉴定,得到表达蛋白;用该蛋白制备了2-5AS单克隆抗体。结论基因工程技术表达2-5AS获得成功,制备了单克隆抗体,为进一步应用流式细胞术检测细胞内2-5AS提供保证。 宋玉国 谭冲 黄建文 毕胜利关键词:基因表达 单克隆抗体 CD45RA/CD45RO研究进展 被引量:11 2007年 目的CD45RA和CD45RO是白细胞共同抗原的两种异型。CD45RA+和CD45RO+T淋巴细胞在表型、功能等各方面均不同,了解其亚群的变化可能有助于了解许多疾病的发病机制、临床状态及预后。 毕胜利关键词:CD45RA CD45RO 记忆T细胞 白细胞 抗原 乙肝疫苗无应答者CD4^+T细胞TCR Vβ基因克隆化特征的研究 被引量:9 2011年 目的:研究乙肝疫苗接种者CD4+T细胞TCR Vβ基因克隆化特征,分析乙肝疫苗有应答者和无应答者TCR Vβ基因单克隆改变的差异性。方法:采用多引物PCR技术扩增80例乙肝疫苗接种者CD4+T细胞TCR Vβ基因22个家族的CDR3区基因片段,对PCR产物分别应用琼脂糖凝胶电泳和基因扫描两种方法检测。结果:80例乙肝疫苗接种者中有58例产生抗体,有22例未产生抗体。TCR Vβ基因单克隆改变主要集中在Vβ2、Vβ8、Vβ9、Vβ11和Vβ17五个家族上,乙肝疫苗无应答组这五个Vβ基因单克隆改变频率明显低于乙肝疫苗有应答组(P<0.01或P<0.05)。结论:CD4+T细胞TCR Vβ基因克隆化改变是影响机体对乙肝疫苗免疫应答效果的重要因素之一。 宋玉国 熊英 宋宇 毕胜利关键词:乙肝疫苗 T细胞抗原受体 银耳多糖对小鼠移植性肝癌治疗作用及机制的实验研究 被引量:4 2006年 目的研究银耳多糖(Trem ella Polysaccharide,TP)对荷HAC小鼠T细胞表面分化抗原、细胞因子、体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的影响。方法用环磷酰胺和TP分别作用于荷HAC肝癌小鼠,采用免疫荧光法、流式细胞仪及酶标仪观察各组免疫功能的变化及细胞因子的表达,并分离其脾细胞,将诱导的细胞毒性T细胞(CTL细胞)分别作用于体外培养的3H-TdR标记的肿瘤细胞P815、HAC和B16,4 h后用γ-闪烁记数仪进行检测,并记算杀伤程度。检测各组肿瘤重量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变。结果TP实验组总T细胞、T杀伤细胞及肿瘤坏死因子(TNF)分别为(62.3±1.06)、(25.6±0.87)及(87.5±0.5),高于对照组,其中对总T细胞及TNF上调明显。在对HAC、P815、B16肿瘤细胞的杀伤作用中,TP实验组的杀伤活性明显高于对照组,分别为23.85%、20.81%、25.43%(P<0.01),其中对B16杀伤作用最强,HAC次之,P815最弱。环磷酰胺+TP实验组上述指标与TP实验组相比有所下降,但与对照组相比则明显增高(P<0.05)。治疗组肝肿瘤重量、体积均低于模型组。组织学上肿瘤坏死程度重且范围广,淋巴细胞、巨噬细胞浸润明显,纤维组织增生显著。环磷酰胺组较实验组表现的更为明显。TP实验组除脾脏外,其他主要脏器无明显形态学变化。结论TP具有激活和提高特异性和非特异性杀伤细胞的抗肿瘤作用。 曲萌 董志恒 盖晓东 毕胜利 王冰梅关键词:TP 移植性肝癌 生物治疗 坚持科学的发展观 重视高等医学教育质量保障工作 被引量:3 2004年 就高等教育大众化给高等医学教育带来的质量问题 ,对如何用科学发展观保证高等医学教育质量的稳步提高 ,高等医学教育教学质重保障体系的建立等问题进行了初步探讨 ,认为在教育规模扩大的同时 ,实现数量与质量相统一、质量优先的原则 ,是科学发展高等医学教育事业的前提。 毕胜利 何欣关键词:高等医学教育 教育质量 科学发展观