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陈振海: 作品数：17 被引量：59H指数：5; 供职机构：中国农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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表达猪脑心肌炎病毒P1和P12A3C基因重组腺病毒的构建及其在小鼠诱导的免疫应答: 为研制脑心肌炎病毒新型活载体疫苗,将病毒核表壳前体多肽P1与P12A2C串联基因分别插入穿梭质粒pDC316中,构建得到重组穿梭质粒pDC316-P1和pDC316-12A3C.将其分别与辅助质粒pBHGloxΔE1,3...; 陈振海杨汉春郭鑫盖新娜贾红陈艳红查振林; 关键词：腺病毒免疫应答猪脑心肌炎病毒基因重组活载体疫苗; 文献传递

猪瘟兔化弱毒疫苗株E0蛋白在杆状病毒表达系统中的表达: 猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,对养猪业危害严重。CSFV的致病性呈现多样性,具有高、中、低毒力毒株和无致病性毒株。加强CSFV重要功能蛋白...; 陈振海王琴宁宜宝范学政夏春; 文献传递

siRNA特异性抑制猪脑心肌炎病毒在BHK-21细胞中的复制: 为探讨siRNA在BHK-21细胞中对猪脑心肌炎病毒(EMCV)的作用,以EMCV BJC3分离株各基因为靶点,设计并合成了8对siRNA,通过脂质体法转染BHK-21细胞,转染后4小时感染500 TCIDEMCVBJC...; 贾红盖新娜陈振海郭鑫杨汉春; 关键词：RNAI SIRNA BHK-21细胞; 文献传递

绿色荧光蛋白基因与猪瘟兔化弱毒疫苗株E2基因在杆状病毒中的融合表达被引量：8: 2005年; 为了研究猪瘟病毒E 2糖蛋白的立体结构及生物学特性,将增强型荧光蛋白基因(EGFP)和猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)E 2基因经PCR扩增后克隆至pB lueB acH is2A质粒,与杆状病毒DNA共转染后经PCR鉴定获得了含有EGFP和HCLV E 2融合基因(GFPTE 2)的重组杆状病毒rBACTE 2-339,并将其感染sf9细胞后在荧光显微镜下观察到了亮绿色荧光,说明融合基因已初步表达。; 范学政王琴陈振海王在时赵耘宁宜宝; 关键词：猪瘟病毒 E2基因杆状病毒

构建表达猪瘟病毒E0基因的重组杆状病毒被引量：4: 2006年; 为了得到可溶性重组猪瘟病毒E0蛋白并便于观察重组蛋白的表达情况，将增强型水母绿色荧光蛋白基因（EGFP）与E0基因相连插入昆虫杆状病毒转移载体中，与线性杆状病毒DNA共转染Sf9细胞后通过噬斑纯化得到纯的重组杆状病毒，将其感染Sf9细胞制备P1种子液，同时用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况，剔除表达效果差的重组杆状病毒。再用P1种子液感染Sf9细胞制备高效价的P2种子液。通过病毒液的梯度稀释和噬斑测定，确定P2种子液的病毒滴度达1．14×10^7pfu／mL。将P2种子液以MOI5～10接种指数期SD细胞．3d后呈现出最强的荧光。重组杆状病毒在Sf9细胞中的初步成功表达为进一步制各重组E0糖蛋白．研究E0蛋白的结构与功能、免疫诊断新方法和猪瘟基因工程疫苗奠定基础。; 陈振海王琴范学政宁宜宝王在时夏春; 关键词：猪瘟病毒重组杆状病毒

猪脑心肌炎病毒P1和P12A3C基因重组腺病毒的构建及其在小鼠体内的免疫应答被引量：4: 2007年; 为研制脑心肌炎病毒（EMCV）新型活载体疫苗，首先将病毒核衣壳前体多肽P1与P12A3C串联基因分别插入穿梭质粒pDC316中，构建得到了重组穿梭质粒pDC316一P1和pDC316-P12A3C。将其分别与辅助质粒pBHGloxAEl、3Cre共转染293细胞，成功包装出重组腺病毒Ad-P1和Ad-P12A3C。免疫过氧化物酶单层试验确证，重组腺病毒可表达目的蛋白。分1次和2次肌肉注射免疫小鼠，然后通过间接ELISA试验和中和试验评价其诱导的特异性体液免疫水平。结果，Ad-P1诱导的VPl特异总抗体IgG水平显著高于Ad-P12A3C，但不能检测到明显的中和抗体（〈1：8）；Ad-P12A3C能诱导产生良好的中和抗体（1：32～1：128），用1×10^8TCID50剂量EMCVBJC3株攻毒，Ad-P12A3C免疫组能获得100％的保护，而Ad-P1免疫组仅能获得部分保护。以上结果表明，Ad-P12A3C可作为良好的EMCV腺病毒活载体疫苗。; 陈振海杨汉春郭鑫盖新娜贾红陈艳红查振林; 关键词：脑心肌炎病毒重组腺病毒免疫应答

猪瘟病毒EO基因的序列分析: 猪瘟病毒(Hog Cholera Virus,HCV)在分类上属于黄病毒科(Fiaviridae)瘟病毒属(Pestivirus)。HCV的RNA是线性单股正链,约12.3Kb,含有单一的开放阅读框架(ORF),编码38...; 玉琴宁宜宝王在时宋立赵耘张广川范学政陈振海秦五明李博丘惠深; 文献传递

猪瘟兔化弱毒株E2基因在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的初步表达: 为了获得猪瘟病毒E2可溶性糖蛋白,本研究用增强烈型荧光蛋白基因(EGFP)作为标签,将猪瘟兔化弱毒(HCLV)E2基因克隆至pCI表达质粒CMV启动了之下,构建了含有EGFP和HCLVE2融合基因(GFPTE2)的真核表...; 范学政陈振海王琴王在时宁宜宝; 关键词：猪瘟病毒 E2基因真核表达; 文献传递

猪瘟病毒E0基因在原核与真核表达系中的表达: 猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E0糖蛋白既是包膜蛋白,又是一种核酸酶,其活性对病毒在宿主体内的持续感染有直接作用.鉴于E0蛋白在病毒感染,诱导机体免疫及与宿主细胞相互关系中的...; 陈振海; 关键词：猪瘟病毒原核表达真核表达; 文献传递

猪瘟病毒E0基因在CHO细胞中的表达: 2005年; 将EGFPE0融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0。将重组质粒转染CHO(dhfr-),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功。通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达。高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础。; 陈振海范学政夏春王琴宋立王在时宁宜宝; 关键词：猪瘟病毒 CHO细胞