王波
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 黄芪鲨烯合酶基因的克隆和序列分析被引量：3
- 2011年
- 参照豆科其他植物的鲨烯合酶基因序列设计了引物,通过逆转录PCR方法,从荚膜黄芪(Astragalus mem-branaceus(fish.)Bge)中克隆了鲨烯合酶基因cDNA序列(GenBank登录号HQ829974)。通过BLAST发现黄芪鲨烯合酶推测的氨基酸序列与大豆鲨烯合酶(BAA22559.1)序列相似性最高,达到了88%。黄芪鲨烯合酶的克隆为以后通过基因转化提高黄芪皂苷含量亦或通过生物工程手段生产黄芪皂苷打下基础。
- 李振秋王晓明金亚明王波
- 关键词：鲨烯合酶分子克隆
- 青蒿法呢醇合酶原核表达、纯化与功能鉴定被引量：1
- 2011年
- 将经RACE方法克隆到的青蒿倍半萜合酶cDNA(AF304444)开放阅读框插入到原核表达载体pET30a(+)的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的重组表达载体pET30SESQ。将pET30SESQ转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG(Isopropyl-beta-D-thiogalactoside)诱导蛋白表达,表达产物经镍琼脂糖柱纯化。纯化蛋白加入酶促反应体系(FPP),GC-MS分析酶促反应体系的正己烷萃取物,结果显示此重组酶可以催化FPP向法呢醇的转化。
- 李振秋金亚明王波
- 关键词：大肠杆菌表达青蒿
- 黄花蒿法呢基焦磷酸合酶、紫穗槐二烯合酶双功能酶基因的构建、原核表达与功能鉴定被引量：1
- 2012年
- 试验将青蒿素生物合成途径中催化两步连续反应的酶(法呢基焦磷酸合酶和紫穗槐二烯合酶)的基因进行融合,经大肠杆菌表达后鉴定其融合蛋白的功能。结果表明:融合蛋白具有了双功能酶活性。双功能酶基因的构建,为进一步将双功能酶基因转入黄花蒿,提高青蒿素含量奠定了基础。
- 李振秋王波高瑞平
- 关键词：双功能酶黄花蒿
