丁亚琴
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠未羧化骨钙素融合蛋白的表达纯化及活性鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的研究表达和纯化大鼠未羧化骨钙素融合蛋白并鉴定其活性。方法将大鼠的骨钙素(BGLAP)基因克隆到p Sumo-Mut表达载体中,构建小泛素相关修饰物-骨钙素质粒(p Sumo-BGLAP)并进行质粒酶切及测序鉴定。质粒在大肠杆菌的表达系统中转化后,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),11℃低温诱导方法,表达出小泛素相关修饰物-骨钙素(Sumo-BGLAP)融合蛋白。融合蛋白通过Ni亲和纯化方法被纯化,通过胰岛素分泌实验被鉴定生物活性。结果质粒的酶切及测序结果显示与目的基因的序列和蛋白分子量吻合,表明质粒p Sumo-BGLAP构建成功。经转化、诱导和纯化后较高纯度的Sumo-BGLAP融合蛋白被获得。胰岛素分泌实验结果显示,16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖下,胰岛素分泌为(37.64±3.80)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.03 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(63.91±4.67)μU·L^(-1),16.7 mmol·L^(-1)葡萄糖+0.3 ng·m L^(-1)Sumo-BGLAP融合蛋白作用时,胰岛素分泌为(68.47±5.83)μU·L^(-1)(均P<0.01)。结论大鼠未羧化骨钙素的融合蛋白被成功表达和纯化,并且有生物活性,能用于进一步研究其对葡萄糖代谢的调节作用。
- 高璟英任乐乐丁亚琴钟向琴白涛刘云峰章毅
- 关键词：骨钙素原核表达胰岛素分泌
- 多巴胺对大鼠胰岛素分泌的影响及机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究多巴胺(dopamine,DA)对大鼠胰岛素分泌的影响及可能机制。方法♂SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化、Histopaque 1077梯度离心后得到纯化的胰岛,DispaseⅡ将胰岛消化为单个细胞。应用胰岛素分泌实验来验证DA对胰岛素分泌的作用,通过膜片钳技术和钙成像技术记录β细胞内向性钙电流、动作电位时程和细胞内Ca^(2+)浓度,研究DA对大鼠胰岛素分泌的作用机制。结果在2.8 mmol·L^(-1)的葡萄糖中,DA对胰岛素的分泌没有产生明显的影响;在16.7 mmol·L^(-1)的葡萄糖中,DA呈浓度依赖性抑制胰岛素的分泌。DA干预后,抑制了胰岛β细胞上内向性钙电流,缩短动作电位时程,减少了细胞内Ca^(2+)浓度。结论 DA通过抑制β细胞上内向性钙电流,进而缩短了动作电位的时程,降低细胞内Ca^(2+)浓度,最终抑制胰岛素的分泌。
- 钟向琴丁亚琴任乐乐白涛刘萌萌刘云峰章毅
- 关键词：多巴胺胰岛Β细胞胰岛素分泌动作电位
- 京尼平苷对大鼠胰岛素分泌的影响及机制研究
- 目的： 京尼平苷是栀子的主要药效成分，属于环烯醚萜葡萄糖苷类化合物，具有抗糖尿病、抗炎、抗氧化、利胆保肝等作用，本课题旨在研究在离体大鼠胰岛组织及胰岛β细胞中京尼平苷对胰岛素分泌的调控作用及其潜在机制，为京尼平苷作为糖...
- 丁亚琴
- 关键词：京尼平苷胰岛素分泌离子通道动物模型药效成分
- Efaroxan对胰岛素分泌的调控机制研究
- 2015年
- 目的观察Efaroxan的促胰岛素分泌作用特点,并探讨其相关作用机制。方法应用放免法测定不同条件下Efaroxan对大鼠胰岛素分泌的影响。c AMP放射免疫试剂盒测定胰岛细胞内c AMP含量。结果 Efaroxan促进胰岛素分泌作用具有葡萄糖浓度依赖性,其特点是在高浓度葡萄糖条件下(8.3、11.1 mmol·L-1)增强胰岛素分泌,而在低浓度葡萄糖条件下(0、2.8 mmol·L-1)则没有作用。Efaroxan的拮抗剂KU14R可明显抑制Efaroxan对胰岛素分泌的促进作用,并明显的抑制了forskolin和IBMX对胰岛素分泌的促进作用。胰岛c AMP含量检测发现,forskolin和IBMX明显增加了胰岛细胞c AMP含量,但是Efaroxan和KU14R对胰岛c AMP含量没有影响。结论 Efaroxan促进胰岛素分泌作用与激动c AMP下游信号通路有关,KU14R通过阻断c AMP下游信号转导通路发挥抑制Efaroxan、forskolin和IBMX的促胰岛素分泌作用。
- 章毅刘云峰高璟英丁亚琴
- 关键词：EFAROXAN胰岛素环磷酸腺苷信号转导胰岛功能
- 1-磷酸鞘氨醇促进胰岛素分泌及可能机制研究被引量：3
- 2016年
- 目的研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque 1077梯度离心获得胰岛,Dispase II消化得到胰岛细胞。不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预,观察低糖(2.8 mmol·L^(-1))和高糖(16.7 mmol·L^(-1))条件下胰岛素分泌的变化。膜片钳技术记录β细胞电压依赖性钾通道电流(Kv电流),观察S1P干预后Kv电流的变化。钙成像技术记录β细胞内Ca^(2+)浓度,观察不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预后细胞内的Ca2+浓度变化。结果与低糖组相比,高糖组明显刺激了胰岛素的分泌(P<0.01)。低糖条件下,S1P没有改变胰岛素分泌量(P>0.05)。高糖条件下,S1P浓度依赖性增加了胰岛素分泌量(P<0.01)。与对照组相比,S1P明显抑制了β细胞Kv电流(P<0.01)。高糖条件下,S1P浓度依赖性升高了胰岛细胞内Ca^(2+)浓度(P<0.01)。结论 S1P可能通过抑制β细胞Kv电流、升高细胞内Ca2+浓度,最终促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
- 赵艳丽丁亚琴王慧章毅杨静刘云峰
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇CA^2+胰岛素分泌电压依赖性钾通道SD大鼠Β细胞
- 染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的调控作用被引量：7
- 2015年
- 我国糖尿病的发病率近年来呈现快速增长的趋势。2型糖尿病以胰岛素分泌相对不足和胰岛素抵抗为主要特征，因此，促进胰岛素分泌是临床治疗2型糖尿病的重要手段。染料木黄酮（genistein）主要来源于豆类植物，大量证据表明染料木黄酮对糖尿病、慢性缺氧、骨质疏松等有一定的预防和治疗作用［1－3］。研究显示，染料木黄酮可改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗［1］，但其对胰岛素分泌的作用及机制尚不明晰。本研究采用放免法测定胰岛素分泌，膜片钳测定胰岛β细胞钾离子通道电流等方法，观察染料木黄酮对大鼠胰岛素分泌的影响，并探讨其作用机制。
- 章毅刘云峰高璟英王慧丁亚琴钟向琴
- 关键词：染料木黄酮胰岛电压依赖性钾通道膜片钳钙离子胰岛素
- 京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌的机制研究
- 2017年
- 目的探讨京尼平苷在大鼠胰岛素分泌中的作用及其机制,为糖尿病的治疗提供依据。方法将胶原酶P经胆总管注入雄性Wistar大鼠的胰腺,消化11 min,histopaque 1077梯度离心得到分离纯化的胰岛。用放射免疫分析法检测胰岛素分泌功能,采用ELISA方法检测环鳞酸腺苷(cAMP)含量,通过膜片钳技术记录电压依赖性钾通道(Kv)电流和Ca^(2+)电流。结果在8.3 mmol/L的葡萄糖下,京尼平苷可促进胰岛素分泌,给予exendin(9-39)、SQ22536和H89,可明显减弱京尼平苷的胰岛素分泌量以及环磷酸腺苷的含量,且在电压依赖性钾电流中也有相同的抑制作用。此外,京尼平苷调控胰岛素分泌作用还受到钙电流的影响。结论京尼平苷通过、c AMP信号通路及其下游受体PKA来发挥调控胰岛素分泌的作用。
- 刘云峰丁亚琴钟向琴任乐乐白涛刘萌萌章毅
- 关键词：京尼平苷胰岛素分泌胰高血糖素样肽-1环磷酸腺苷电压依赖性钾通道
- 电压依赖性钾通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌中的作用
- 2016年
- 目的研究电压依赖性钾（Kv）通道在京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌机制中的作用。方法采用放免法检测大鼠胰岛组织的胰岛素分泌情况,膜片钳技术记录胰岛β细胞Kv电流和动作电位时程（APD）。结果在8.3 mmol/L葡萄糖条件下,京尼平苷（0-100μmol/L）可剂量依赖性地增加胰岛素分泌含量,在10μmol/L时基本达最大促分泌效应,低糖（2.8 mmol/L）情况下则没有作用。膜片钳实验数据表明,京尼平苷剂量依赖性地（0-100μmol/L）降低Kv通道电流密度,并在10μmol/L的浓度下发挥最大抑制作用,并明显延长了动作电位时程。结论京尼平苷在胰岛β细胞中通过抑制Kv、延长APD发挥促胰岛素分泌作用。
- 刘云峰丁亚琴钟向琴任乐乐白涛刘萌萌章毅
- 关键词：京尼平苷胰岛素分泌电压依赖性钾通道动作电位
- 环磷酸腺苷对大鼠胰岛素分泌作用及机制的研究被引量：1
- 2015年
- 目的研究环磷酸腺苷(cAMP)在大鼠胰岛素分泌中发挥的作用及机制,为研究促胰岛素分泌药物提供理论依据。方法雄性SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化,使用Histopaque 1077梯度离心后,分离纯化取得胰岛。用胰岛素分泌实验来验证胰岛活性与功能,并且通过cAMP检测实验、膜片钳技术记录电压依赖性钾通道(KV)电流,研究c AMP促进大鼠胰岛素分泌的作用机制。结果经过分离纯化得到的胰岛在2.8 mmol/L、8.3 mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖情况下胰岛素分泌的标化值分别为(1.00±0.38)μIU/m L、(2.33±0.52)μIU/m L、(5.55±0.12)μIU/m L。在8.3 mmol/L葡萄糖作用的基础上,Forskolin进一步促进了cAMP的生成,胰岛素的分泌,抑制了KV电流,在同样条件下,SQ22536对cAMP的生成、胰岛素分泌、KV电流均没有影响,但是相同条件下,应用Forskolin+SQ22536,则可以减少Forskolin促进cAMP生成的作用、削弱了Forskolin对KV电流的抑制作用。结论采用胶原酶P消化法及Histopaque 1077分离液离心分得的胰岛活性、功能良好。在胰岛β细胞内,cAMP合成增加可促进胰岛素分泌,其机制与抑制KV电流相关。
- 张琬郭庆高璟英丁亚琴王惠钟向琴刘云峰章毅
- 关键词：环磷酸腺苷胰岛素分泌电压依赖性钾通道
