董坚 作品数:148 被引量:520 H指数:10 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省社会发展科技计划 云南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 农业科学 更多>>
实体肿瘤靶向药物疗效评价标准的现状和展望 被引量:30 2015年 近几年抗肿瘤靶向药物的研究取得了突破性的进展,基于基因水平的肿瘤分子诊断技术的发展及特异性靶向药物的应用,推动了癌症治疗进入精准医学新时代。传统的肿瘤治疗评价体系如WHO或RECIST标准不能准确地对靶向药物治疗进行疗效评价,无法准确地反映患者的生存获益,因此,探索并建立适用于肿瘤靶向药物的疗效评价标准迫在眉睫。本文将回顾抗肿瘤药物疗效评价标准发展历史,介绍针对各类肿瘤的不同靶向药物疗效评价标准的发展及演化历程,并重点介绍结合免疫指标评价的新标准,对该新标准的具体定义、指导原则和临床应用进行详细阐述。有理由相信,随着肿瘤靶向药物疗效评价体系的不断完善,会给个体化肿瘤治疗带来新的进展。 董坚关键词:实体肿瘤 分子靶向药物 肿瘤免疫治疗 疗效评价标准 核因子κB在乳腺癌中的研究进展 2016年 乳腺癌是引起女性肿瘤相关性死亡的主要原因,基因表型分析提示乳腺癌是一种异质性的疾病。根据雌激素受体(ER)、孕激素受体及人表皮生长因子受体2(HER2)的表达情况,可将乳腺癌分为不同亚型。核因子κB(NF-κB)信号通路通过与ER及HER2相互作用,促进乳腺癌干细胞自我更新,在乳腺癌的发生、发展中发挥重要作用。因此,NF-κB信号通路可能是乳腺癌治疗中的一个潜在靶点。 聂俊 董坚关键词:乳腺癌 核因子KB 雌激素受体 人表皮生长因子受体2 肿瘤干细胞 pcDNA3-hNGFb真核表达载体的构建及其表达 2008年 目的构建人神经生长因子β(NGF-β)基因真核表达载体并观察其在L929细胞内的表达。方法以RT-PCR从人脑组织总RNA中扩增NGF-βcDNA,将其克隆到真核表达载体pcD-NA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以Lipofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和western blot鉴定NGF-β在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为750bp的特异片段,重组质粒pcDNA3-hNGFb酶切后产生750bp和5.2kb的片段,DNA测序证实750bp片段的碱基序列与人NGF-βcDNA完全一致。将其转染L929细胞后,免疫细胞化学、western blot结果表明NGF-β及其前体proNGF-β能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒pcDNA3-hNGFb,为后续的研究奠定基础。 邓兴力 杨智勇 董坚 王廷华 徐丹 冯忠堂关键词:神经生长因子 真核表达 重组质粒 转染 纤维蛋白原β启动子区单倍型对特发型下肢深静脉血栓的影响 被引量:1 2015年 目的 观察纤维蛋白原β(FGB)启动子区单倍型对特发型下肢深静脉血栓(IDVT)的影响.方法 IDVT组及健康对照组各120例.采用启动子区完整测序技术及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)双重检测纤维蛋白原β链基因启动子区-1 420G/A、-993 C/T、-854G/A、-455 G/A、-249C/T和-148C/T单核苷酸多态性(SNP)及基因型,对上述SNP连锁不平衡分析并构建单倍型模型.结果-993 C/T与-455 G/A、-993 C/T与-148C/T、-455 G/A与-148C/T之间存在较强的连锁不平衡关系(r2分别为0.699、0.509和0.556);构建出8种单倍型模型:单倍型H3、H6在病例组中的频率高于对照组[比值比(OR)分别为32.085和1.896,P<0.05];单倍型H1、H4、H5和H7在对照组中的频率高于病例组(OR值分别为0.025、0.119、0.644和0.383,P <0.05);其余单倍型(H2和H8)在两组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 单倍型H3、H6可能是下肢深静脉血栓(DVT)的危险因素;单倍型H1、H4、H5和H7可能是DVT的保护因素. 韩胜斌 董坚 金辉 杨斌 王友礼关键词:单倍型 单核苷酸多态性 下肢深静脉血栓形成 DNA甲基化在结直肠癌中的研究进展 被引量:3 2019年 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是使结肠上皮细胞转变为侵袭性的恶性腺瘤,其过程主要由多基因组学累积和表观遗传学改变导致的。表观遗传学是指研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,使基因表达的程度发生变化,囊括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑及RNA干扰等。其中DNA甲基化是最重要的一种表观遗传修饰,亦然是当前研究最深入的领域。有研究发现,表观遗传学的改变在结直肠癌中发挥着重要的作用,在癌变的过程中,以上一系列表观遗传学的改变通常会使癌基因获得功能或抑癌基因丢失功能。本文就最近几年结直肠癌DNA甲基化相关性研究的进展进行综述。 郭玺 董坚关键词:DNA甲基化 结直肠癌 CPG岛 羊膜间充质干细胞对异体外周血淋巴细胞转化的影响 被引量:5 2010年 [目的]研究羊膜间充质干细胞(MSCs)对成人外周血淋巴细胞的免疫调节作用。[方法]采用组织块培养法从羊膜分离、培养MSCs,通过细胞形态的均一性和流式细胞术检测细胞表面标志以鉴定其纯度。将分离培养的羊膜MSCs按不同浓度接种于96孔板中,72h待其贴壁后,用丝裂霉素处理。将外周血淋巴细胞接种于羊膜MSCs上,加入植物凝集素(PHA)以刺激淋巴细胞转化。以单纯淋巴细胞(不含MSCs)经PHA刺激转化者为对照组,设单纯淋巴细胞(不加PHA)作空白对照。各组细胞培养72h后,收集各孔悬浮细胞,用CCK-8法测定细胞增殖率,观察羊膜MSCs对异体外周血淋巴细胞转化的影响。[结果]羊膜MSCs的形态和骨髓MSCs类似,具有和骨髓MSCs相似的细胞表型,可以显著抑制异体外周血淋巴细胞转化。羊膜MSCs浓度为2×106/ml、1×106/ml、5×105/ml、2.5×105/ml、1.25×105/ml时的平均转化抑制率分别为88.92%、83.38%、62.10%、32.22%、17.35%。[结论]从羊膜中可以成功分离、培养出MSCs,为MSCs提供了新的来源。羊膜MSCs可以抑制PHA诱导的异体外周血淋巴细胞转化,对同种异体免疫反应具有负调节作用,且该作用具有剂量依赖性。 钱永海 李维佳 史明霞 董坚 梁波 魏彩霞关键词:间充质干细胞 羊膜 淋巴细胞 免疫调节 人胎盘间充质干细胞凝胶促进SD大鼠放射性皮肤损伤的愈合 被引量:4 2021年 背景:放射性皮肤损伤一直是困扰肿瘤临床放射治疗的难题。大量实验研究显示,人胎盘间充质干细胞具有表皮细胞分化潜能,可促进受损皮肤的愈合。目的:评价局部外用人胎盘间充质干细胞凝胶对大鼠放射性皮肤损伤愈合的影响。方法:取23只SD大鼠,随机分为阴性对照组、空白凝胶组、间充质干细胞凝胶组,其中阴性对照组3只,其余每组10只。各组接受臀背部皮肤照射(采用6 meV电子线,总剂量50 Gy,照射野3 cm×3 cm,单次剂量率500 cGy/min),照射后第23天开始,间充质干细胞治疗组创面均匀涂抹人胎盘间充质干细胞凝胶,空白凝胶对照组创面均匀涂抹空白凝胶,1次/d,连用6次,阴性对照组不进行任何治疗。从第1次用开始每4 d观察1次创面愈合情况,治疗第28天取材,观察人胎盘间充质干细胞凝胶对炎性细胞、创面微血管密度和创面胶原纤维的影响。结果与结论:①阴性对照组照射区皮肤红肿、溃烂;空白凝胶组照射区皮肤僵硬皱缩,观察期内创面均未愈合;间充质干细胞凝胶组照射区长出新生上皮组织,观察期内创面愈合完全;②与阴性对照组和空白凝胶组比较,在治疗后第16,20,24,28天间充质干细胞凝胶组创面愈合速度明显加快(P <0.05),创面面积明显缩小(P <0.05),炎性细胞计数明显减少(P <0.05),微血管计数CD31细胞阳性率明显增多(P <0.05),胶原纤维排列较整齐;③结果表明,局部外用人胎盘间充质干细胞凝胶可促进大鼠放射性皮肤损伤愈合。 徐晓明 陈艳 宋倩 袁露 顾加明 张丽娟 耿洁 董坚关键词:干细胞 放射性皮肤损伤 血管化 愈合 胶原纤维 经AEC条件培养基培养的AMSC在NOD/SCID小鼠体内的造血支持作用 目的 我们的前期研究证实,人羊膜间充质干细胞(amniotic mesenchymal stem cells,AMSC)可分泌多种重要的造血细胞因子,体外具有造血支持作用。经羊膜上皮细胞(amniotic epithel... 依香为 史明霞 张递思 帅华洲 曾云 董坚 李少遊 洪敏 杨策尧 杜明钰关键词:羊膜间充质干细胞 羊膜上皮细胞 造血重建 热休克蛋白70肿瘤多肽复合物抗胶质瘤免疫效应的研究 2006年 目的探讨从小鼠胶质瘤组织中提取的热休克蛋白70肿瘤肽复合物(HSP70-PC)及其抗胶质瘤免疫保护效应.方法自小鼠胶质母细胞瘤G422肿瘤组织提取HSP70-PC,小鼠分别以HSP70-PC(10μg/只)、细胞裂解液(10μg/只)免疫后分别在其颅内和皮下接种肿瘤,比较颅内荷瘤组与未免疫组的成瘤率及生存时间;皮下荷瘤组与未免疫组的成瘤率、肿瘤重量,并应用流式细胞仪技术测定小鼠心腔血中淋巴细胞百分比、CD3+CD8+和CD3+CD4+T淋巴细胞的百分比.结果颅内荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、83.3%,平均生存期为(16.00±0.58)d、(18.70±1.33)d、(25.33±1.86)d;皮下荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、33.3%,肿瘤重量为(6.00±1.67)g,(2.30±1.23)g,(0.12±0.20)g,流式细胞仪检测小鼠淋巴细胞群为(32.65±9.06)%、(51.30±7.72)%、(67.42±6)%;CD3+CD8+T淋巴细胞为(4.30±1.97)%、(7.06±2.20)%、(11.75±3.57)%;CD3+CD4+T淋巴细胞为(14.28±6.75)%、(17.17±5.04)%、(22.5±5.18)%.结论热休克蛋白70肿瘤肽复合物可诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,延长小鼠生存期,具有明显的抗胶质瘤免疫保护作用. 余化霖 史进 马以骝 赵德萍 贾伟 董坚关键词:HSP70-PC 主动免疫 胶质母细胞瘤 伯氏疏螺旋体膜蛋白BmpA研究进展 被引量:5 2012年 莱姆病是一种人兽共患病,已严重威胁人类健康,成全球公共卫生问题,引起全球关注.伯氏疏螺旋体是莱姆病病原体,通过蜱叮咬传播而引起莱姆病,其表面存在的膜蛋白具有免疫性和致病性.BmpA(Borreliaburgdorferi membrance protein A)是伯氏疏螺旋体的主要抗原之一,为层粘连蛋白结合蛋白,是莱姆关节炎的重要致病因子,对蛋白功能、诊断应用和莱姆关节炎致病机理三方面的研究进展进行概述. 宝福凯 赖名耀 张云波 董坚 赵桂萍 陈明清 柳爱华关键词:伯氏疏螺旋体 莱姆病