甘愉
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
- 供职机构：复旦大学公共卫生学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多重逆转录聚合酶链反应检测主要上呼吸道病毒被引量：8
- 2003年
- 目的 建立用多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒以及呼吸道合胞病毒 (RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法 ,以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、流行情况调查。方法 采用经MDCK细胞接种培养的甲 3型、乙型流感病毒和Hep - 2细胞接种培养的RSVA型、B型标准毒株病毒液 ,以及甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒和RSVA型、B型混合毒株病毒液 ,使用 5组引物 ,分别为HA1- 5a1和HAl- 3a1(甲 1型流感病毒 )、HA3 - 5a1和HA3 - 3a1(甲 3型流感病毒 )、NP- 5b1和NP - 3b1(乙型流感病毒 )、RSVAF和RSVAR(RSVA型 )、RSVBF和RSVBR(RSVB型 ) ,经mRT -PCR ,琼脂糖凝胶电泳 ,于紫外灯下观察上述病毒特异核苷酸条带。结果 甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒 ,RSVA型、B型分别在 43 1,2 10 ,3 90 ,3 3 4,183bp处出现清晰的 5条DNA条带。 结论 应用 5组引物 ,mRT -PCR可用于快速检测临床上呼吸道感染标本中的流感病毒和RSV ,并可对其进行分型 。
- 居丽雯蒋露芳甘愉周联娣姜庆五谈兆麟
- 关键词：多重逆转录聚合酶链反应流感病毒呼吸道合胞病毒
- 甲3型、乙型流感病毒在MHL混合细胞中增殖的研究被引量：5
- 2003年
- 〔目的〕建立MHL混合细胞瓶分离培养流感病毒的方法 ,为进行流感监测及临床快速诊断打下基础。〔方法〕采用MDCK、HEP -2、LLC混合细胞培养瓶和MDCK单一细胞培养瓶 ,同时分别接种甲 3型和乙型流感病毒标准毒株 ,并设立阴性细胞对照组 ,观察甲 3型和乙型流感病毒毒株在混合细胞瓶和MDCCK细胞瓶中的细胞病变效应 (CPE)、血凝滴度和单克隆抗体荧光染色情况。〔结果〕病毒血凝滴度分别均为 1:160 ,经 1:5稀释的甲 3型和乙型流感病毒接种MHL混合细胞瓶和MDCK细胞瓶经 3 7℃、48h培养后 ,感染甲 3型病毒细胞出现细胞拉网、团聚病变现象 ,感染乙型流感病毒细胞则出现明显细胞固缩、脱落现象 ,MDCK单一细胞培养瓶CPE强于混合细胞培养瓶 :3 7℃、72h培养后 ,检测血凝滴度 ,感染甲 3型流感病毒的MDCK细胞和混合细胞均为l:40。感染乙型流感病毒的MDCK细胞为 1:12 0 ,MHL混合细胞为 1:2 0 ;单克隆荧光抗体检测 ,感染甲 3型和乙型流感病毒的MDCK细胞和混合细胞均呈阳性。〔结论〕应用MDCK、HEP-2 ,LLC混合细胞瓶分离、培养 ,不仅可对甲型流感爆发进行流行病学监测 ,同时还可分离鉴定其它呼吸道病毒 ,利于临床诊断、治疗和预防。
- 姜庆五居丽雯甘愉蒋露芳周联娣陆嘉良谈兆麟
- 关键词：甲3型乙型流感病毒细胞病变效应血凝滴度
