李长福
- 作品数:53 被引量:86H指数:5
- 供职机构:遵义医学院更多>>
- 发文基金:贵州省社会发展科技攻关计划项目国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 阻断Hedgehog信号通路对HepG2.2.15细胞增殖的影响
- 2015年
- 目的探讨环耙明阻断Hedgehog信号通路对肝癌细胞HepG2.2.15增殖的影响。方法培养肝癌细胞HepG2.2.15,用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h,采用MTT检测环耙明对细胞活力的影响;EDU法检测细胞DNA合成情况;Real-timePCR法检测细胞Gli1的表达情况。结果用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h后,MTT检测结果显示细胞活力降低,较空白组差异明显(P<0.05);EDU法检测结果显示25μmol/L的环耙明作用于细胞不同时间后,HepG2.2.15细胞的DNA合成率下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.01);Real-time PCR法实验结果显示5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理组与对照组相比,Gli1表达水平明显降低(P<0.05)。结论不同浓度环耙明能抑制HepG2.2.15细胞的增殖,减少HepG2.2.15细胞的DNA合成率;其作用机制可能与HepG2.2.15细胞中Gli1、mRNA的表达水平下降有关。
- 沈璇黄继锦张雪范芳李长福
- 关键词:HEDGEHOG信号通路肝癌增殖
- c-mycASODN对半乳糖诱导的晶体上皮细胞中两种抗氧化酶活性的影响
- 2003年
- 目的 探讨ASODN对半乳糖性白内障晶体上皮细胞 (LEC)中抗氧化系统活力的影响。方法 采用组织培养方法 ,以半乳糖诱发兔晶状体形成白内障 ,以不同浓度c mycASODN导入LEC后检测LEC中GSH Px、SOD活性。结果 在半乳糖性白内障形成过程中 ,LEC中GSH Px、SOD活性明显降低 ,导入不同浓度c mycASODN后 ,LEC中GSH Px、SOD活性明显增加。结论 在半乳糖性白内障形成过程中 ,导入c mycASODN后能改善LEC的抗氧化能力。
- 范芳葛正龙曾小平李海祥李长福
- 关键词:反义C-MYC寡核苷酸半乳糖抗氧化系统上皮细胞抗氧化酶
- HBx与肝癌转移浸润的相关性
- 2012年
- HBV的感染增加了患肝癌的风险HBx作为HBV的功能基因又与肝癌的发生、发展相关.HBx蛋白能参与细胞内外的很多信号转导通路,促进肝癌的浸润转移,使得肝癌成为世界上多发、难治的肿瘤之一。
- 庄海李长福
- 关键词:HBX肝癌信号通路
- 反义bcl-2寡核苷酸对半乳糖诱导的晶体上皮细胞的抑制作用被引量:4
- 2004年
- 目的 :探讨反义bcl 2寡核苷酸 (bcl 2ASODN)对半乳糖诱导的兔晶体上皮细胞 (LEC)生长的影响 .方法 :人工合成与bcl 2基因翻译起始区序列互补的寡核苷酸 ,用半乳糖和反义寡核苷酸处理培养的晶体上皮细胞 ,应用细胞计数法和MTT法观察反义bcl 2寡核苷酸对半乳糖诱导的晶体上皮细胞增殖的影响 .结果 :2 .5~ 1 0 .0 μmol/L反义bcl 2寡核苷酸能抑制半乳糖诱导的晶体上皮细胞的增殖 ,1 0 .0μmol/L时作用较显著 .结论 :反义bcl
- 李长福范芳葛正龙李海祥曾小平
- 关键词:反义寡核苷酸半乳糖晶体上皮细胞
- 野木瓜果实总皂苷对BEL-7402/5 FU细胞多药耐药性的逆转作用被引量:3
- 2017年
- 目的研究野木瓜果实总皂苷对人肝癌耐药细胞BEL-7402/5FU多药耐药(MDR)的逆转作用,并初步探讨其耐药逆转机制。方法采用MTT法测定5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)和野木瓜果实总皂苷对BEL-7402细胞、BEL-7402/5FU细胞的毒性及野木瓜果实总皂苷逆转MDR的效果;利用蛋白质印迹法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达情况。结果BEL-7402/5FU细胞对5-FU、ADM、MMC的耐药指数分别为21.71,2.73,2.11;野木瓜果实总皂苷能有效抑制BEL-7402/5FU细胞增殖,无细胞毒性剂量为5,10μg/mL,逆转耐药倍数分别为1.36、1.93;野木瓜果实总皂苷联合5-FU作用BEL-7402/5FU细胞,可降低P-gp蛋白表达。结论野木瓜果实总皂苷能部分逆转BEL-7402/5FU细胞MDR,其机制可能是通过下调P-gp的表达而实现的。
- 祝小波李宇婷朱欣婷李大玉刘云范芳李长福
- 关键词:野木瓜总皂苷多药耐药耐药逆转
- 壳聚糖-磺酸甜菜碱对人肝癌HepG-2细胞的siRNA递送实验研究
- 2017年
- 目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行结构表征;CCK-8检测材料的细胞相容性;荧光显微镜观察siRNA的转染效率;Real-time PCR检测转染siRNA后对Bcl-2 mRNA的沉默效率。结果核磁共振氢谱数据表明:DMAAPS已成功枝接到CS上。荧光显微镜观察结果显示:质量比(m0/mt:CS-DMAAPS/siRNA)为32、16、8、4、2的复合颗粒分别转染人肝癌HepG-2细胞24 h后,转染率分别为33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR检测结果显示:质量比为4的CS-DMAAPS/siRNA复合颗粒转染人肝癌HepG-2细胞48 h后,对人肝癌HepG-2细胞的Bcl-2基因沉默效率为26.8%。结论壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物能实现siRNA对人肝癌HepG-2细胞的转染,且细胞相容性良好,能实现目标基因的部分沉默。
- 董伟李大玉惠景范芳李长福姜念刘云朱欣婷
- 关键词:壳聚糖人肝癌HEPG-2细胞SIRNA
- 沉默DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu凋亡的影响被引量:2
- 2018年
- 目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组。采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况。结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P<0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P<0.01)。结论siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平。
- 李大玉余春波朱欣婷刘喜平范芳李长福
- 关键词:药物耐受性
- 天麻抗真菌蛋白基因转化辣椒的研究被引量:4
- 2010年
- 为获取辣椒的抗真菌种质资源,运用RT-PCR技术扩增出GAFP的cDNA序列,通过基因工程技术构建植物表达载体pBI121-GAFP,并导入遵椒1号辣椒。转化后再生的植株经PCR检测,初步证实GAFP基因已经整合到辣椒基因组中,得到了GAFP基因转化遵椒1号辣椒植株。
- 张守鸿李长福葛正龙范芳冯雪松
- 关键词:天麻抗真菌蛋白辣椒抗真菌植物表达载体
- 重组质粒pαACP-HSP70对半乳糖诱导大鼠晶状体Smac基因表达的影响
- 2019年
- 目的探讨重组质粒pαACP-HSP70对半乳糖诱导大鼠晶状体组织Smac mRNA水平和蛋白水平影响。方法将大鼠晶状体组织培养6h后,选取透明27只晶状体组织随机分为空白对照组、半乳糖组、半乳糖+重组质粒pαACP-HSP70组(简称α-70组),每组9只;用阳离子脂质体转染法将重组质粒pαACP-HSP70质粒导入α-70组;荧光显微镜下观察重组质粒pαACP-HSP70在晶状体组织的表达情况;Real-time PCR检测各组HSP70、Smac的mRNA水平; Western blot检测各组HSP70、Smac蛋白表达。结果α-70组转染重组质粒pαACP-HSP70后,与空白对照组、半乳糖组相比,晶状体有绿色荧光蛋白表达,HSP70 mRNA、蛋白水平上调,Smac的mRNA、蛋白水平下调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论重组质粒pαACP-HSP70成功转入晶状体组织并上调HSP70基因表达,抑制Smac基因表达。
- 杨名慧范芳李长福赵学发葛正龙
- 关键词:半乳糖HSP70SMAC
- 一种准确量度蛋白条带或核酸条带位置的切胶装置
- 本实用新型公开了一种准确量度蛋白条带或核酸条带位置的切胶装置,包含载胶板,所述载胶板的两侧面均设有滑槽,所述滑槽中设有滑块,所述滑块的上方设有连接起来的上刻线,所述滑块下方设有连接起来的下刻线。这种准确量度蛋白条带或核酸...
- 范芳李宇婷李长福束波
- 文献传递