李惠民
- 作品数:98 被引量:224H指数:7
- 供职机构:昆明医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- IgH重排的实时定量PCR检测及反应参数研究被引量:2
- 2005年
- 为了探讨以通用引物应用PCR技术扩增克隆性免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的最佳实验条件及SYBRGreenⅠ实时定量PCR检测该基因的可行性,以通用引物对克隆性IgH重排进行扩增,对影响PCR扩增的退火温度、引物浓度、Taq酶用量、dNTP浓度、镁离子浓度、循环次数等实验因素进行了系统研究,找出最佳反应参数,并以通用引物进行了SYBRgreenⅠ实时定量PCR对IgH重排基因的检测,测定了该法检测IgH重排基因的敏感性。结果表明:最佳退火温度为60℃,最佳引物浓度为0.8μmol/L,0.5U的Taq酶量效果满意,最适dNTP浓度为100μmol/L,最适镁离子浓度为3.0mmol/L,最佳循环次数为40次。SYBRGreenⅠ实时定量PCR可以实现对克隆性IgH重排的扩增和荧光信号的检测分析,其对IgH重排基因检测的敏感性为104/ml。结论:确定了应用PCR技术检测克隆性IgH重排的最适反应条件,实现了用通用引物对克隆性IgH重排稳定、特异的扩增,初步实现了以通用引物和应用SYBRGreenⅠ实时定量PCR对IgH重排的检测。
- 李惠民石岚段勇段勇刘华
- 关键词:PCRSYBR实时定量PCR
- 侧群细胞在血液系统研究进展
- 2009年
- 血液系统研究主要集中于血液恶性肿瘤。侧群细胞已被证实存在于多种正常和肿瘤组织中,并且认为侧群细胞可能是候选干细胞,利用侧群细胞方法来分离和鉴定白血病干细胞也越来越广泛。与侧群细胞形成有关的ABC转运体家族,还和白血病的耐药有密切相关,从而把侧群细胞甚至是肿瘤干细胞和肿瘤的耐药紧密相连。所以研究侧群细胞可为研究干细胞提供了一个强有力的工具。
- 范瑞华李惠民
- 关键词:侧群细胞白血病
- As_2O_3抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达被引量:7
- 2006年
- 本研究探讨在As2O3作用下人淋巴瘤Raji细胞的增殖及VEGFmRNA表达的变化。采用改良MTT方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGF121和VEGF165mRNA表达的影响。结果表明As2O3对Raji细胞的作用表现时间、剂量依赖性的增殖抑制效应,建立回归方程为IR=0.531dose+0.481time(P<0.05)。半定量RT-PCR方法检测显示,Raji细胞同时表达VEGF121和VEGF165两种剪切变异体,二者的表达水平相当(VEGF1211.17±0.14;VEGF1651.31±0.19,P>0.05)。VEGF121和VEGF165mRNA表达量与As2O3作用时间呈负相关关系(rsv121=-0.547,P<0.05;rsv165=-0.632,P<0.05),且VEGF的各异构体对药物的反应具有差异性,VEGF165mRNA表达下调早且有持续性。但在所选浓度组中未发现类似的相关关系(P>0.05)。结论As2O3既可抑制Raji细胞生长增殖,亦可通过下调VEGFmRNA表达而产生抗血管新生效应,且小剂量、长时程给药时结果亦然。
- 喻镁佳段勇刘华张学美李惠民
- 关键词:三氧化二砷淋巴瘤血管内皮生长因子血管新生
- 恶性血液病患者感染调查研究被引量:18
- 2006年
- 目的了解恶性血液病(HM)患者合并感染的临床特点。方法回顾性分析2004年住院接受化疗的327例HM患者的感染发生情况。结果感染发生率为33.64%;感染部位以呼吸道最多见,占40.85%;分离的病原菌主要是革兰阴性菌(43.33%)、革兰阳性菌(33.33%)和真菌(23.34%);急性白血病和各类复发的HM患者感染率最高,达70.58%;粒细胞缺乏与无粒细胞缺乏者感染率分别是69.39%和18.64%,两者差异有显著性(P<0.05)。结论HM患者感染率高,尤以急性白血病和各类复发的HM患者及粒细胞缺乏者为甚,应加强监控。
- 喻镁佳张学美聂波石岚李惠民
- 关键词:血液病白血病粒细胞缺乏
- As_2O_3抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖及VEGF表达
- 2008年
- 目的 研究As2O3对人淋巴瘤Raji细胞株的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用改良MrI,r方法观察As2O3对Raji细胞的增殖抑制效应;采用半定量RT-PCR方法检测As2O3对Raji细胞VEGFl21和VEGFl65MRNA表达的影响.结果 As2O3对Raji细胞表现增殖抑制效应,效应呈时间、剂量依赖性,建立回归方程为:抑制率(IR)=0.531Dose+0.481Time(P〈0.05),
- 喻镁佳李惠民
- 关键词:三氧化二砷淋巴瘤血管内皮生长因子
- 一定浓度下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株增殖的影响被引量:2
- 2011年
- 背景:近年来有将三氧化二砷试用于T细胞肿瘤的有效报道,但未见其治疗机制的相关研究。目的:检测三氧化二砷对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞的抑制增殖、诱导凋亡及细胞周期的影响。方法:分别采用MTT、PI单标记流式细胞术和TUNEL法检测2,5,10μmol/L的三氧化二砷干预24,48,72h,对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响,及其凋亡相关基因bcl-2及血管内皮细胞生长因子基因表达的变化。结果与结论:在一定的浓度范围内,三氧化二砷对Hut-78细胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能与下调血管内皮细胞生长因子基因的表达有关,同时还存在一定的细胞毒作用;三氧化二砷可诱导Hut-78细胞发生凋亡,凋亡机制主要发生在G2~M期,其凋亡作用可能与下调bcl-2基因表达有关。三氧化二砷对Hut-78细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用呈时间剂量依赖性。
- 张学美王婷李晓进赵亮李惠民
- 关键词:三氧化二砷T细胞淋巴瘤细胞增殖细胞凋亡BCL-2基因
- 启动子DNA甲基化抑制白血病患者WT1基因的表达
- 2008年
- 目的研究白血病患者WT1启动子区域DNA甲基化与WT1表达水平之间的关系及临床意义。方法利用RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)检测64例白血病患者、56例对照者骨髓内WT1mRNA水平及DNA甲基化状态。结果骨髓中WT1表达率与WT1启动子DNA甲基化程度呈负相关性,在急性白血病患者(初诊、复发及未缓解者)和慢粒进入加速期和急变期患者骨髓中WT1启动子DNA甲基化率低于健康者和非白血病患者。结论WT1启动子区域DNA甲基化抑制WT1mRNA表达。激发WT1启动子区甲基化从而抑制WT1表达,与急性白血病发生转化有关,可以作为治疗和预防白血病发生的一个研究方向和方法。
- 丁超李惠民朱宝生何迪李斌
- 关键词:急性白血病WT1MSPDNA甲基化
- 健康供者PBSC动员采集及部分血生化指标的变化
- 2000年
- 何争春温柏平杨绵本李惠民金银慧杨蜀云
- 关键词:细胞因子PBSC健康供者
- 恶性血液病血清和脑脊液中微量元素测定被引量:1
- 1997年
- 对40例恶性血液病患者血清和脑脊液中锌、铜、铁、钙、镁、锰、镉、镍8种微量元素含量进行测定.结果显示:血清中铁、镉、镍均增高;白血病组铜/锌比值增大.脑脊液中锌、铁、镉、镍增高.急性白血病组中血清及脑脊液中铜、铁、镉、镍几种元素含量的变化与疾病状态有关.
- 杨凌李惠民梁瑞琼王家翠
- 关键词:恶性血液病白血病脑脊液微量元素
- 骨髓增殖性疾病JAK2 V617F研究进展被引量:5
- 2009年
- 骨髓增殖性疾病(myeloproliferative disorders,MPD)中已明确bcr-abl是慢性粒细胞白血病发病的关键环节,但bcr-abl阴性MPD发病的分子机制研究进展缓慢。近年来多宗实验研究报道该类MPD疾病有高频获得性JAK2V617F点突变,并通过小鼠骨髓移植实验证实了该突变确实可引起真性红细胞增多症(PV)的发生,提示JAK2V617F点突变在MPD的发病机制中起重要作用。本文就JAK2及JAK2V617F点突变及其检测方法,JAK2V617点突变与MPD的发病关系,临床相关性及与其他恶性血液病的关系进行综述。
- 徐媛媛李惠民
- 关键词:骨髓增殖性疾病JAK2V617F