葛巍
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 重组微线体MIC10的牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2015年
- 为建立牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法,根据弓形虫MIC10基因序列设计合成引物,应用PCR技术扩增MIC10基因,将其克隆至pET-22b载体,构建重组质粒pET-22b-MIC10,将其转化至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE及Western-blot分析表明,该重组蛋白能与弓形虫阳性血清发生特异性反应。重组蛋白经NiNTA纯化,应用牛弓形虫阳性、阴性血清建立了ELISA检测方法,抗原最佳包被质量浓度为5mg/L,二抗稀释倍数为1∶20 000,封闭液为含5%脱脂奶粉的PBST溶液。该方法重复性好、特异性强、敏感性高,为牛弓形虫流行病学调查奠定基础。
- 李筱鑫王泽东刘全葛巍王巍魏峰
- 关键词：弓形虫间接ELISA
