郭东东 作品数:10 被引量:18 H指数:3 供职机构: 西南大学生物技术学院 更多>> 发文基金: 国家农业科技成果转化资金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家农业科技成果转化资金项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
蚕用益生芽孢杆菌SWL-19的筛选鉴定及其对肠道菌群多样性的影响 被引量:3 2015年 【目的】筛选对家蚕(Bombyx mori)具有益生作用的芽孢杆菌,改善家蚕肠道微环境,促进蚕业生产的发展。【方法】采用高温选育法对家蚕肠道内的芽孢杆菌进行初筛;以产胞外消化酶(蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和淀粉酶)及能在肠道定殖为基础,结合溶血试验、抗生素药敏试验和产消化酶能力大小等对芽孢杆菌进行复筛。通过形态、生理生化特征和16S r DNA序列分析鉴定菌种,再利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术检测其在家蚕肠道内定殖情况及其对肠道内微生物菌群多样性的影响。【结果】共从57株细菌中筛选出两株能同时产蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和淀粉酶且不产生溶血现象的芽孢杆菌SWL-17和SWL-19。14种抗生素药敏纸片检测结果表明,二者对绝大多数抗生素敏感,且敏感程度基本相同。除SWL-19不能利用蔗糖发酵外,两个株菌的革兰氏染色、芽孢染色、产酸产气、柠檬酸利用、葡萄糖发酵、硝酸盐还原和V-P等生理生化特性均相同。二者生长速度相同,但菌落形态特征差异较大。SWL-17的菌落形态为淡黄色,圆形隆起,表面光滑湿润,边缘整齐,而SWL-19的菌落形态为乳白色不透明,表面扁平干燥,边缘不整齐。SWL-17产蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和淀粉酶的能力分别为(1.62±0.04)、(2.12±0.11)、(1.87±0.03)和(1.43±0.03),SWL-19的产酶能力分别为(2.91±0.05)、(2.43±0.04)、(3.24±0.12)和(3.48±0.10)。因此SWL-19具有较高的产消化酶能力,且除脂肪酶外,其产蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶的能力均显著性高于SWL-17(P<0.05)。细菌16S r DNA序列比对和系统发育分析表明SWL-17和SWL-19分别为芽孢杆菌(Bacillus sp.)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis),且SWL-19具有更清楚的遗传背景,适于进行后续试验。进一步DGGE试验结果表明,自然条件下家蚕肠道内的优势菌群为肠球菌属(Enterococcus)细菌,而外源性添加菌株SWL-19后能使家� 李冠楠 夏雪娟 SENDEGEYA Parfait 何石宝 郭东东 朱勇关键词:家蚕 肠道菌群 芽孢杆菌 氟化物导致的家蚕生殖损伤及氧化应激反应 被引量:7 2016年 【目的】研究氟化钠(NaF)对鳞翅目模式生物家蚕Bombyx mori精巢和卵巢组织的形态结构以及抗氧化酶活性及其基因mRNA表达的影响,旨在探讨NaF对昆虫的生殖腺损伤及其机理。【方法】给家蚕幼虫添食不同浓度NaF溶液(0,25,50,100,200 mg/L)浸泡过的桑叶,调查不同性别家蚕5龄幼虫生殖腺中脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及其基因转录表达水平的变化,并通过石蜡切片、HE染色技术观察了生殖腺结构变化情况。【结果】与对照组相比,NaF对雌雄家蚕MDA含量均具有浓度-效应关系,MDA含量随NaF添食浓度的升高而增加。随着NaF添食浓度的增加,SOD和CAT活性都表现为先升高后降低的变化趋势,但均高于对照组。Pearson相关性分析显示,SOD和CAT酶活性变化有显著相关性(雄:R=0.865,P=0.000;雌:R=0.766,P=0.001),雌雄CAT酶活性与其基因mRNA表达水平也具有正相关性。雌雄家蚕生殖腺中GSH-Px活性随着NaF添食浓度的升高而增加,显示浓度-效应关系,其酶活性与gsh-px的mRNA水平的表达具有显著相关性。不同性别家蚕在添食NaF后,雄性的抗氧化酶活性变化较雌性更为敏感。HE染色观察到雌雄生殖腺的形态结构发生变化,表现为形态畸形,细胞内空泡增大,生殖细胞数目相对减少。且伴随着NaF添食浓度的增加,生殖腺损伤越严重。【结论】家蚕幼虫添食NaF不仅引起其雌雄生殖腺的结构发生改变,而且还导致其生殖腺中的抗氧化酶活性及其基因mRNA转录水平发生变化。 唐文超 肖媛媛 杨成飞 郭东东 朱勇关键词:家蚕 氟化钠 生殖损伤 组织切片 抗氧化酶 家蚕的性别决定分子机制研究进展 家蚕属于雌杂合型生物,性别决定于胚胎细胞染色体组中W染色体的有无,凡有W染色体的个体均为雌性,记为ZW型,雄性为ZZ型。深度测序发现位于家蚕W染色体的雌性决定基因Fem通过piRNA途径决定家蚕性别,位于Z染色体的Mas... 郭东东 何石宝 唐文超 辛佳 朱勇关键词:家蚕 性染色体 性别决定基因 文献传递 家蚕ptp和cyp333a2基因的鉴定及其耐氟性功能研究 本研究以鳞翅目模式昆虫家蚕中的敏感品种734和耐氟品种T6为材料,应用差异显示技术对家蚕耐氟性相关基因进行筛选,并分析这些差异基因的功能。氟化物通过污染桑叶造成家蚕大量死亡,严重危害蚕桑业的发展,同时人类及其他生物也深受... 郭东东关键词:家蚕 基因鉴定 氟中毒 文献传递 蚕用益生枯草芽孢杆菌Swl-19及其应用 本发明公开了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Swl-19及其应用,枯草芽孢杆菌Swl-19由家蚕中肠中分离,芽孢大小为0.8~1.2×1.2~2.4μm,椭圆形柱状,菌落表面干燥粗糙不透明、乳白色,边缘... 朱勇 李冠楠 夏雪娟 隆耀航 赵欢欢 唐文超 郭东东 何石宝文献传递 家蚕的性别决定分子机制研究进展 2015年 家蚕属于雌杂合型生物,性别决定于胚胎细胞染色体组中W染色体的有无,凡有W染色体的个体均为雌性,记为ZW型,雄性为ZZ型。深度测序发现位于家蚕W染色体的雌性决定基因Fem通过piRNA途径决定家蚕性别,位于Z染色体的Masc基因调控雄性胚胎的剂量补偿与决定Bmdsx的雄特异性剪切。本文主要介绍家蚕W染色体上Fem基因的发现及作为性别决定初始信号的作用,以及雄性Z染色体存在的剂量补偿机制和几个性别决定基因的级联调控关系等,并简要分析了该领域仍需要深入研究的内容。 郭东东 何石宝 唐文超 辛佳 朱勇关键词:家蚕 性染色体 性别决定基因 果蝇求偶行为分子调控机制的研究进展 2015年 果蝇(Drosophila)的求偶行为受多个基因调控,例如fruitless(fru)、dissatisfaction(dsf)和retained(retn)等。它们通过不同的剪切方式产生特异性产物,利用这些产物来控制雌雄果蝇的求偶行为,它们的剪切方式是雌雄果蝇求偶行为和性别决定所必需的。主要阐述了这些基因在果蝇求偶行为方面的分子调控机制,为进一步研究果蝇的求偶行为和性别决定提供理论依据。 何石宝 李冠楠 郭东东 唐文超 隆耀航 朱勇关键词:果蝇 求偶行为 性别决定 蚕用益生枯草芽孢杆菌Swl‑19及其应用 本发明公开了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Swl‑19及其应用,枯草芽孢杆菌Swl‑19由家蚕中肠中分离,芽孢大小为0.8~1.2×1.2~2.4μm,椭圆形柱状,菌落表面干燥粗糙不透明、乳白色,边缘... 朱勇 李冠楠 夏雪娟 隆耀航 赵欢欢 唐文超 郭东东 何石宝文献传递 家蚕的性别决定分子机制研究进展 家蚕属于雌杂合型生物,性别决定于胚胎细胞染色体组中W 染色体的有无,凡有W 染色体的个体均为雌性,记为ZW 型,雄性为ZZ 型。深度测序发现位于家蚕W 染色体的雌性决定基因Fem 通过piRNA 途径决定家蚕性别,位于Z... 郭东东 何石宝 唐文超 辛佳 朱勇关键词:家蚕 性染色体 性别决定基因 家蚕保幼激素结合蛋白Bmtol基因的克隆及功能分析 被引量:8 2018年 家蚕头部是一个神经中枢和感受的器官,其头部含有触角和感觉毛,感受外界的信号,并将外界信号传送到大脑进行反应。保幼激素主要是由咽侧体合成和分泌的,而保幼激素结合蛋白是保幼激素转运和发挥功能的载体,在昆虫体内具有极其重要的功能。文中通过Silk DB和NCBI数据库筛选并鉴定到一个新的具有保幼激素结合蛋白家族保守结构的蛋白Bm TOL,其编码基因编号为BGIBMGA003404(Gen Bank登录号:KY681053)。利用原核表达系统成功表达了该蛋白,通过Ni-NTA亲和层析的方法获得了Bm TOL的重组蛋白并制备了多克隆抗体。组织表达分析发现无论是转录水平还是蛋白水平Bm TOL在头部都是高量表达,且Bmtol基因在起蚕时表达量较高,在5龄和蛹期表达量较低,而在化蛾后表达量又开始上调。免疫组化结果显示Bm TOL蛋白定位在头部的皮层、触角和脑中,推测其可能与头部信息传递有关,为家蚕的生长发育和行为调控提供重要的信息来源。 何石宝 殷娅茹 郑茜 郭东东 辛佳 朱勇关键词:家蚕 免疫组化