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李希

作品数：4 被引量：5H指数：1
供职机构：复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系更多>>
发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇电穿孔
  • 2篇视网膜
  • 2篇视网膜色素
  • 2篇网膜
  • 2篇细胞
  • 2篇穿孔
  • 1篇血糖
  • 1篇有丝分裂
  • 1篇脂联素
  • 1篇色素变性
  • 1篇色素上皮
  • 1篇色素上皮细胞
  • 1篇色素性
  • 1篇上皮
  • 1篇上皮细胞
  • 1篇神经节
  • 1篇神经节细胞
  • 1篇视网膜色素变...
  • 1篇视网膜色素上...
  • 1篇视网膜色素上...

机构

  • 4篇复旦大学上海...
  • 2篇复旦大学

作者

  • 4篇李希
  • 2篇张圣海
  • 2篇张萌
  • 2篇汤其群
  • 2篇莫晓芬
  • 2篇方媛
  • 2篇吴继红
  • 2篇郭文毅
  • 1篇董京艳
  • 1篇宋后燕
  • 1篇刘宏磊

传媒

  • 1篇复旦学报（医...
  • 1篇中华眼底病杂...
  • 1篇中国眼耳鼻喉...

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2006
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮细胞层和光感受器细胞层的实验研究
2010年
目的探讨在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮（RPE）细胞层和光感受器（PR）细胞层的可行性。方法147只健康雄性Spragne—Dawley（SD）大鼠根据电穿孑L刺激模式电压值分为5、10、15、20、25、30、35V组，右眼视网膜下腔注射增强型绿色荧光蛋白（EGFP）真核表达质粒pEGFP—N1为实验眼，左眼注射TE Buffer为对照眼。各组根据不同转染方向再分为RPE和PR两个亚组。各组除电压不同外，其余参数均为脉宽99ms，脉冲间期0．5s，连续5个脉冲。将带有负电荷的质粒在电场作用下，拟转染到RPE细胞层，反向置电极，拟转染到PR细胞层。转染后7d取各组视网膜铺片，荧光显微镜下观察EGFP表达强弱、范围及荧光细胞计数分析；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量观察EGFP蛋白和mRNA的表达。结果转染后7d，荧光显微镜观察发现，各组RPE亚组对照眼RPE细胞层内均未见特异性荧光表达，实验眼可见绿色荧光表达；各组RPE亚组对照眼视网膜铺片均未见荧光表达，实验眼视网膜铺片均可见转染了EGFP的RPE细胞。Western blot检测显示，随电压增加，EGFP蛋白与β-肌动蛋白条带灰度相对比值呈上升趋势。RTPCR检测显示，各组均产生阳性扩增条带，随电压增高，EGFP mRNA与GADPH mRNA扩增条带灰度相对比值逐渐增高。结论在体电穿孔方法可以有效辅助基因转染大鼠RPE细胞层。
张萌莫晓芬郭文毅吴继红方媛张圣海李希
关键词：色素上皮视网膜炎电穿孔光感受器
脂肪细胞分化过程中转录因子C/EBPβ促进有丝分裂克隆扩增的机制研究
目的:脂肪细胞的发育分化与肥胖的发生关系密切。研究脂肪细胞分化的分子机制对于人们有效控制肥胖具有重要意义。接触抑制的前脂肪细胞,在分化剂诱导下,首选经历两轮有丝分裂克隆扩增(Mitotic Clonal Expansio...
郭亮李希黄家鑫汤其群
文献传递
人脂联素球状结构域的表达、纯化和功能鉴定被引量：5
2006年
目的表达和纯化人脂联素(adiponectin,APN)球状结构域并观察其生物学活性。方法用PCR方法复制人脂联素球状结构域(globular domain of adiponectin,gAPN)的cDNA,并克隆于pET28a(+)原核表达载体中。将重组表达质粒pET28a(+)-gAPN转化大肠埃希菌BL21(DE3),37℃培养至A600达到0.6时,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达。细菌经超声破菌,得到粗提的包涵体洗涤变性后经镍柱亲和层析柱一步纯化,获得纯化的gAPN重组蛋白,复性后冻干保存。然后,用链佐星(streptozocin,STZ)诱导的小鼠高血糖模型检测其生物活性。结果IPTG诱导后有Mr约为17 000大小的目的蛋白表达,免疫印迹结果进一步表明,其具有人gAPN的抗原性。表达蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体蛋白的30%以上,表达产物经变性、纯化、复性,可获得纯度90%以上的目的蛋白。该重组蛋白能够降低STZ诱导的小鼠高血糖模型的血糖水平。结论在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达了人gAPN蛋白,经变性、纯化、复性后得到具有生物学活性的蛋白。
刘宏磊李希宋后燕汤其群
关键词：脂联素重组蛋白高血糖模型
电穿孔辅助bFGF基因转染视网膜神经节细胞层延缓RCS大鼠视网膜色素变性
2009年
目的以遗传性视网膜色素变性RCS大鼠为模型,探讨在体电穿孔辅助碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因转染视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)层治疗视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)的可行性。方法将编码bFGF的质粒注射至RCS大鼠右眼玻璃体腔内,左眼注射TE buffer作为对照,随即以在体电穿孔法辅助基因转染。于1周后采用Western blot、逆转录聚合酶链反应(re-verse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量观察bFGF的表达,术后1、2、3、4周于光学显微镜下观察视网膜外核层的变化,术后1周用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminaldeoxynucleotidyl transferasemediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果术后1、2、3、4周基因治疗眼视网膜外核层较同期对照眼厚度增加,存活的光感受器数量较对照眼多(P<0.05)。Western blot、RT-PCR可见bFGF蛋白和mRNA的表达。TUNEL结果显示对照眼和治疗眼外核层阳性细胞凋亡指数分别为33.58%±3.72%、12.42%±2.83%,治疗眼TUNEL阳性细胞数较对照眼明显减少(P<0.05)。结论在体电穿孔辅助bFGF基因转染RGC层能够延缓RCS大鼠视网膜色素变性的病程。
张萌莫晓芬郭文毅董京艳吴继红方媛张圣海李希
关键词：电穿孔碱性成纤维细胞生长因子视网膜神经节细胞视网膜色素变性
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