周庆玲
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林亚泰(集团)股份有限公司更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流感病毒H5N1在Vero细胞上培养条件的优化被引量：2
- 2015年
- 目的优化流感病毒H5N1在Vero细胞上的培养条件。方法在Vero细胞上,用不同维持液[M199、M199+表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、MEM、MEM+EGF、无血清培养基(serum-free medium,SFM)]及含不同胰酶浓度(3、5、7μg/ml)的M199维持液培养流感病毒H5N1,收获培养上清,检测血凝滴度,确定最适维持液及胰酶浓度;用流感病毒H5N1感染细胞上清于冻融前后分别感染Vero细胞,连续传代,收获培养上清,检测血凝滴度,比较冻融对病毒增殖的影响。将流感病毒H5N1以0.01 MOI感染对数生长期Vero细胞,以优化后的培养条件培养,收获培养上清,检测血凝滴度及病毒感染性滴度,确定H5N1在Vero细胞上连续传代的稳定性。结果当维持液培养基为SFM、胰酶浓度为5μg/ml时,利用病毒收获液直接感染2代后,再将维持液培养基更换为M199时,血凝滴度最高。利用优化后的培养条件在Vero细胞上连续传代培养流感病毒H5N1,血凝滴度和感染性病毒滴度均较稳定。结论优化后的培养条件在Vero细胞上可连续稳定传代培养流感病毒H5N1,为建立工作种子批,用于大流感疫苗的制备奠定了基础。
- 谢英林周庆玲王文军岳振奇韩云飞汪一名李春艳李杨郑超李光谱
- 关键词：流感病毒VERO细胞
- 大流行流感疫苗稳定剂的筛选被引量：1
- 2015年
- 目的 筛选大流行流感疫苗的稳定剂。方法 将流感病毒株Influenza A/Vietnam/1194/2004（H5N1）接种Vero细胞制备5批疫苗原液,加入A（lOH）3吸附制备成品疫苗。取同一批疫苗原液,分成5份,分别加入吐温-80（20μg/ml）及0.5%、1%和2%人血白蛋白稳定剂,以不加入稳定剂的疫苗原液作为空白对照,于37℃放置4周,检测流感病毒的血凝滴度,筛选疫苗的稳定剂;将加入筛选出的稳定剂的5批疫苗原液及3批成品疫苗于37℃放置不同时间,检测血凝素（hemagglutinin,HA）含量。结果 不加入稳定剂的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度明显下降;加入20μg/ml吐温-80和0.5%人血白蛋白的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度亦明显下降;而加入1%和2%人血白蛋白的疫苗原液于37℃放置4周,血凝滴度仍未下降,后续试验选择1%人血白蛋白作为疫苗稳定剂。加入1%人血白蛋白的5批疫苗原液于37℃放置1-4周与放置前比较,HA含量差异均无统计学意义（P〉0-05）;加入1%人血白蛋白的3批成品疫苗37℃放置6周,疫苗HA含量有下降趋势,37℃放置1-5周,相邻两周间HA含量差异无统计学意义（P〉0-05）,放置5周,HA含量下降幅度臆1μg/ml。结论1%人血白蛋白对流感病毒具有良好的稳定作用。
- 周庆玲于晶谢英林李春艳韩云飞李杨董焕岳振奇汪一名胡晓明管洪超于洪涛
- 关键词：稳定剂血凝滴度
