谢京
- 作品数：4 被引量：33H指数：3
- 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 天然雌核发育银鲫与两性生殖彩鲫卵母细胞中蛋白激酶基因表达差异的比较被引量：4
- 1999年
- 采用mRNA差异显示方法 ,以蛋白激酶基因家族保守区设计 5′引物 ,比较天然雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫卵母细胞中蛋白激酶基因的表达 .结果表明 ,以引物T12 MA ,T12 MC和T12 MG合成的cDNA第 1链分别再经蛋白激酶特异引物扩增所得到的PCR条带数目和分布模式各不相同 .从胶上总共回收并克隆了 2 1个cDNA片段 ,对其中 3个做了Northern杂交验证 ,有 2个在彩鲫卵母细胞中特异表达 ,另 1个在银鲫中特异表达 .
- 谢京朱燕张帆桂建芳
- 关键词：蛋白激酶银鲫彩鲫卵母细胞蛋白激酶
- 银鲫和彩鲫卵母细胞中差异表达基因的克隆及其特征分析
- 该研究采用差减杂交比较雌核发育银鲫(Carassius auratus gibelio)与两性生殖彩鲫(Carassius auratus color variety)完全长成卵母细胞中mRNA的差异,由此克隆到四个差异...
- 谢京
- 关键词：雌核发育银鲫卵母细胞成熟差减杂交
- 文献传递
- 银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A_1的cDNA克隆被引量：24
- 2000年
- 分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料 ,提取总RNA ,分离mRNA ,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtllSfi Not克隆载体 ,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库。测试结果表明库容量分别达到 3 1× 1 0 6(银鲫 )和 1 6× 1 0 6(彩鲫 )。进一步人工合成CyclinA1 保守引物 ,采用PCR扩增文库的方法 ,克隆了银鲫 (1 61 6bp)与彩鲫 (1 62 6bp)的CyclinA1 全长cDNA。序列分析结果表明 :两种鱼编码区长度均为 1 1 73bp ,起始于一个包含在脊椎动物起始密码子ANNATG基元内ATG的单一开放读码框 ,编码 391个氨基酸 ;5’ -端非编码区长度也同为 70bp ,3-’端非编码区长度略有不同 ,银鲫为 373bp ,而彩鲫则为 383bp ;二者 3’ -端均带有AATAAA的Poly(A)加尾信号以及 2 4bp(银鲫 )和 2 7bp(彩鲫 )的Poly(A)尾巴。比较银鲫、彩鲫和金鱼与人、爪蟾CyclinA1氨基酸序列同源性的结果表明 ,CyclinA1 在人、爪蟾与鱼类之间具有较高同源性 ;而在银鲫、彩鲫和金鱼之间 ,CyclinA1 仅在周期蛋白框外存在 5个氨基酸的差异 ,且这些差异均是由个别碱基的变异造成的。
- 樊连春谢京汪洋桂建芳
- 关键词：雌核发育银鲫彩鲫CDNA文库
- 一个含WD结构域蛋白的基因在鱼类卵子发生过程中的差异表达及其特征分析被引量：6
- 2001年
- 用抑制性差减杂交结合ＳＭＡＲＴ ｃＤＮＡ合成和ＲＡＣＥ－ＰＣＲ技术的综合方法，从鱼类卵母细胞卵黄形成后期差减文库中克隆到一个新的含ＷＤ结构域蛋白的基因．该基因ＣＤＮＡ全长为１８７０ ｂｐ，可读框长９９０ ｂｐ，编码的蛋白质由３２９个氨基酸组成，含有６个ＷＤ结构域；５’非编码区长 ２１０ ｂｐ，３’非编码区长 ６７０ ｂｐ，有脊椎动物典型的ＡＮＮＡＴＧ起始序列和ｐｏｌｙＡ加尾信号ＡＡＴＡＡＡ．由于其编码的蛋白质与ＳＴＲＡＰ蛋白（ｓｅｒｉｎｅ－ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）有９２％的同源性，所以把它称为ＦＳＴＲＡＰ（ｆｉｓｈ ＳＴＲＡＰ）．虚拟Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交表明，ＦＳＴＲＡＰ在卵母细胞的卵黄形成后期表达，而在卵黄形成前期（Ｉ时相卵母细胞）不表达．各种组织的ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦＳＴＲＡＰ在脑、心、肾、肌肉、卵巢、脾和精巢有转录，而在肝脏中未见扩增带．不同发育时相卵母细胞的ＲＴ－ＰＣＲ表明，ＦＳＴＲＡＰ在第Ⅱ—Ⅴ时相都有转录．Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交也显示ＦＳＴＲＡＰ在除肝组织外的多种组织中都表达，与ＲＴ－ＰＣＲ结果相同，ＦＳＴＲＡＰ在卵黄形成前期几乎不表达，从第Ⅱ?
- 文建军谢京谢京刘世贵
- 关键词：银鲫卵子发生抑制性差减杂交
